Determinarea calitativă a proteinelor în urină. Proteina din urină (proteinuria). Determinarea proteinelor în urină


Cuprins [Arată]

O persoană sănătoasă excretă 1,0-1,5 litri de urină pe zi. Conținutul de 8 - 10 mg / dl de proteine ​​din acesta este un fenomen fiziologic. Norma zilnică de proteine ​​în urină de 100-150 mg nu ar trebui să trezească suspiciuni. Globulina, mucoproteinele și albumina sunt cele care alcătuiesc proteina totală din urină. Un flux mare de albumină indică o încălcare a procesului de filtrare la rinichi și se numește proteinurie sau albuminurie.

Fiecare substanță din urină are o normă „sănătoasă”, iar dacă indicatorul de proteină fluctuează, acest lucru poate indica o patologie renală.

O analiză generală a urinei implică utilizarea fie a primei porțiuni (dimineața), fie a unei probe zilnice. Acesta din urmă este de preferat pentru evaluarea nivelului de proteinurie, deoarece conținutul de proteine ​​are fluctuații zilnice pronunțate. În timpul zilei, urina este colectată într-un singur recipient, volumul total este măsurat. Pentru un laborator care analizează urina pentru proteine, este suficientă o probă standard (50 până la 100 ml) din acest recipient, restul nu este necesar. Pentru informații suplimentare, se efectuează un test suplimentar conform Zimnitsky, care arată dacă indicatorii de urină pe zi sunt normali.

Metode de determinare a proteinelor în urină
Vedere Subspecii Particularități
Calitativ Testul Geller Testarea urinei pentru proteine
Testul acidului sulfosalicilic
Analiza fierbei
Cantitativ Turbidimetric Proteinele din urină interacționează cu reactivul, ducând la scăderea solubilității. Ca reactivi se utilizează acizi sulfosalicilici și tricloracetici, clorură de benzetoniu.
Colorimetric Cu unele substanțe, proteina din urină își schimbă culoarea. Aceasta este baza reacției biuret și a metodei Lowry. Se folosesc și alți reactivi - albastru strălucitor, roșu pirogalol.
Semi-cantitativ Dați o indicație relativă a cantității de proteine, rezultatul este interpretat de schimbarea culorii probei. Metodele semicantitative includ benzi de testare și metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Înapoi la cuprins

Proteinele din urină în mod normal la un adult nu trebuie să depășească 0,033 g / l. În același timp, rata zilnică nu este mai mare de 0,05 g / l. Pentru femeile gravide, norma proteică în urina zilnică este mai mare - 0,3 g / l, iar dimineața urina este aceeași - 0,033 g / l. Normele proteice diferă în analiza generală a urinei și a copiilor: 0,036 g / l pentru porția de dimineață și 0,06 g / l pe zi. Cel mai adesea, în laboratoare, analiza se efectuează prin două metode, care arată cât de mult conține fracțiunea proteică în urină. Valorile normale de mai sus sunt valabile pentru analiza efectuată cu acid sulfosalicilic. Dacă s-a folosit vopsea roșie pirogalol, valorile vor diferi cu un factor de trei.


Înapoi la cuprins

  • filtrarea în glomerulii renali merge greșit;
  • absorbția proteinelor în tubuli este afectată;
  • unele boli pun o greutate mare asupra rinichilor - atunci când proteinele din sânge sunt mari, rinichii pur și simplu „nu au timp” să o filtreze.

Restul cauzelor sunt considerate non-renale. Așa se dezvoltă albuminuria funcțională. Proteina în analiza urinei apare în reacții alergice, epilepsie, insuficiență cardiacă, leucemie, otrăvire, mielom, chimioterapie, boli sistemice. Cel mai adesea, un astfel de indicator în analizele pacientului va fi primul clopot al hipertensiunii.

Creșterea proteinelor în urină se poate datora unor factori de natură nepatologică, prin urmare, vor fi necesare teste suplimentare.

Metodele cantitative pentru determinarea proteinelor în urină dau erori, prin urmare, se recomandă efectuarea mai multor analize și apoi utilizarea formulei pentru a calcula valoarea corectă. Conținutul de proteine ​​din urină se măsoară în g / l sau mg / l. Acești indicatori ai proteinelor permit determinarea nivelului de proteinurie, sugerează o cauză, evaluează prognosticul și determină strategia.

Înapoi la cuprins

Pentru funcționarea deplină a corpului, este necesar un schimb constant între sânge și țesuturi. Este posibil doar dacă există o anumită presiune osmotică în vasele de sânge. Proteinele plasmatice mențin un astfel de nivel de presiune atunci când substanțele cu nivel molecular scăzut trec cu ușurință dintr-un mediu cu o concentrație ridicată într-un mediu cu una mai mică. Pierderea moleculelor de proteine ​​duce la eliberarea de sânge din patul său în țesut, care este plin de edem sever. Așa se manifestă proteinuria moderată și severă.


Etapele inițiale ale albuminuriei sunt asimptomatice. Pacientul acordă atenție doar manifestărilor bolii de bază, care este motivul apariției proteinelor în urină.

Urmarea proteinuriei se referă la o creștere a nivelului de proteine ​​din urină datorită utilizării anumitor alimente.

Urina pentru analiză este colectată într-un recipient curat, fără grăsimi. Înainte de colectare, este afișată toaleta perineului, trebuie să vă spălați cu săpun. Femeilor li se recomandă să închidă vaginul cu o bucată de vată sau un tampon, astfel încât scurgerile vaginale să nu afecteze rezultatul. În ajun, este mai bine să nu beți alcool, apă minerală, cafea, picant, sărat și alimente care dau culoarea urinei (afine, sfeclă). Efortul fizic puternic, mersul prelungit, stresul, febra și transpirația, consumul excesiv de alimente proteice sau medicamente înainte de trecerea urinei provoacă apariția proteinelor în analiza urinei unei persoane complet sănătoase. Aceasta este cunoscută sub numele de proteinurie de urmărire.

Înapoi la cuprins

Afecțiuni renale care duc la pierderea proteinelor:

  • Amiloidoza. Celulele normale din rinichi sunt înlocuite de amiloizi (complex proteină-zaharidă), care împiedică funcționarea normală a organului. În stadiul proteinuric, amiloidele sunt depuse în țesuturile renale, distrugând nefronul și, ca urmare, filtrul renal. Acesta este modul în care proteina trece din sânge în urină. Această etapă poate dura mai mult de 10 ani.
  • Nefropatie diabetica. Datorită metabolismului necorespunzător al glucidelor și lipidelor, are loc distrugerea vaselor de sânge, a glomerulilor și a tubulilor din rinichi. Proteinele din urină sunt primul semn al unei complicații prezise a diabetului zaharat.
  • Boli ale genezei inflamatorii - nefrită. Cel mai adesea, leziunile afectează vasele de sânge, glomerulii și sistemele calice-pelvine, perturbând cursul normal al sistemului de filtrare.
  • Glomerulonefrita în majoritatea cazurilor este autoimună. Pacientul se plânge de o scădere a cantității de urină, dureri de spate și presiune crescută. Pentru tratamentul glomerulonefritei, se recomandă dieta, regimul și terapia medicamentoasă.
  • Pielonefrita. În perioada acută, se continuă cu simptomele unei infecții bacteriene: frisoane, greață, cefalee. Este o boală infecțioasă.
  • Boala de rinichi cu chisturi multiple.

Într-un corp sănătos, moleculele de proteine ​​(și au dimensiuni destul de mari) nu pot trece prin sistemul de filtrare a rinichilor. Prin urmare, nu ar trebui să existe proteine ​​în urină. Acest indicator este același atât pentru bărbați, cât și pentru femei. Dacă analiza indică proteinurie, este important să consultați un medic pentru a afla motivele. Specialistul va evalua cât crește nivelul de proteine, dacă există o patologie concomitentă, cum să restabilească funcționarea normală a corpului. Conform statisticilor, o femeie are un risc mai mare de boli genito-urinare decât un bărbat.

Principiul metodei pe baza coagulării proteinelor în urină în prezența acidului azotic (sau 20% sulfosalicilic).

Progres: adăugați 1-2 picături de acid azotic (sau sulfosalicilic) la 5 picături de urină. Turbiditatea apare în urină dacă este prezentă proteină.

Masa. Detectarea componentelor patologice ale urinei .


Notă:în prezența glucozei și a proteinelor în urină, se determină conținutul lor cantitativ.

Principiul metodei : când proteina interacționează cu roșu pirogalol și molibdat de sodiu, se formează un complex colorat, a cărui intensitate de culoare este proporțională cu concentrația de proteine ​​din probă.

Reactivi: Reactiv de lucru - soluție roșie de pirogalol în tampon succinat, soluție de calibrare a proteinelor cu o concentrație de 0,50 g / l

Progres:

Se amestecă probele, se lasă să stea timp de 10 minute. la temperatura camerei (18 -25 ° C). Măsurați densitatea optică a probelor experimentale (Dop) și de calibrare (Dc) față de proba martor la λ = 598 (578-610) nm. Culoarea este stabilă timp de 1 oră.

Plată: concentrația de proteine ​​în urină (C) g / l se calculează prin formula:

C = Dop / Dk × 0,50

unde: Dop = Dk = C = g / l.

Valori normale: până la 0,094 g / l, (0,141 g / zi)

Ieșire:

Principiul metodei : Când D-glucoza este oxidată de oxigenul atmosferic sub acțiunea glucozei oxidazei, se formează o cantitate echimolară de peroxid de hidrogen. Sub acțiunea peroxidazei, peroxidul de hidrogen oxidează substraturile cromogene (un amestec de fenol și 4 aminoantipirină - 4AAP) cu formarea unui produs colorat. Intensitatea culorii este proporțională cu conținutul de glucoză.

glucoza oxidaza


Glucoza + O2 + H2O gluconolactona + H2O2

peroxidază

2H2O2 + fenol + 4AAP compus colorat + 4H2O

Progres: în două eprubete se adaugă 1 ml de soluție de lucru și 0,5 ml de tampon fosfat. Adăugați 0,02 ml de urină în primul tub și 0,02 ml de calibrator (calibrare, soluție standard de glucoză, 10 mmol / L) în al doilea. Probele sunt amestecate, incubate timp de 15 minute la o temperatură de 370C într-un termostat și densitatea optică a probelor experimentale (Dop) și de calibrare (Dc) este măsurată în raport cu reactivul de lucru la o lungime de undă de 500-546 nm.

Calcul: С = Dop / Dk  10 mmol / l Dop = Dk =

Ieșire:

Notă. Dacă conținutul de zahăr din urină este mai mare de 1%, acesta trebuie diluat.

În prezent, laboratoarele biochimice folosesc o metodă expresă unificată pentru analiza urinei pentru glucoză folosind hârtie reactivă pentru glucoză „Glucotest” sau folosind benzi testate combinate pentru pH, proteine, glucoză, corpuri cetonice și sânge. Benzile de testare sunt scufundate într-un vas cu urină timp de 1 secundă. și comparați culoarea pe scară.

Determinarea proteinelor folosind indicator roșu pirogalol

Principiul metodei se bazează pe măsurarea fotometrică a densității optice a unei soluții a unui complex colorat format prin interacțiunea moleculelor de proteine ​​cu moleculele complexului de colorant roșu pirogalol și molibdat de sodiu (complex pirogalol roșu-molibdat) într-un acid mediu. Intensitatea culorii soluției este proporțională cu conținutul de proteine ​​din materialul de testat. Prezența detergenților în reactiv oferă o determinare echivalentă a proteinelor de natură și structură diferite.

Reactivi. 1) Soluție de 1,5 mmol / L roșu pirogalol (PGA): 60 mg de PGA sunt dizolvate în 100 ml de metanol. Depozitați la 0-5 ° С; 2) 50 mmol / L soluție tampon succinat pH 2,5: 5,9 g acid succinic (HOOC - CH2 - CH2 - COOH); 0,14 g de oxalat de sodiu (Na2C2O4) și 0,5 g de benzoat de sodiu (C6H5COONa) sunt dizolvate în 900 ml de apă distilată; 3) 10 mmol / l soluție de hidrat cristalin de molibdat de sodiu (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg de molibdat de sodiu se dizolvă în 100 ml apă distilată; 4) Reactiv de lucru: se adaugă 40 ml soluție PGC și 4 ml soluție de molibdat de sodiu la 900 ml soluție tampon succinat. PH-ul soluției este ajustat la 2,5 cu 0,1 mol / l soluție de acid clorhidric (HCI) și volumul este ajustat la 1 l. Reactivul sub această formă este gata de utilizare și este stabil atunci când este depozitat într-un loc întunecat la o temperatură de 2-25 ° C timp de 6 luni; 5) 0,5 g / l soluție standard de albumină.

Progresul determinării. La primul tub se adaugă 0,05 ml de urină de test, 0,05 ml de soluție standard de albumină în al doilea tub și 0,05 ml de apă distilată în cel de-al treilea tub (probă martor), apoi se adaugă 3 ml de reactiv de lucru tuburi. Conținutul tuburilor este amestecat și după 10 minute proba și etalonul sunt fotometrice față de proba de control la o lungime de undă de 596 nm într-o cuvă cu o lungime a căii optice de 10 mm.


Calculul concentrației de proteine ​​din proba de urină studiată se efectuează conform formulei:

unde C este concentrația de proteine ​​din proba de urină analizată, g / l; Apr și Ast - dispariția probei de urină analizate și a soluției standard de albumină, g / l; 0,5 - concentrația soluției standard de albumină, g / l.

Note:

  • culoarea soluției (complex de culoare) este stabilă timp de o oră;
  • relația direct proporțională între concentrația de proteine ​​din proba de testare și absorbția soluției depinde de tipul de fotometru;
  • dacă conținutul de proteine ​​din urină depășește 3 g / l, proba se diluează cu soluție izotonică de clorură de sodiu (9 g / l) și se repetă determinarea. Factorul de diluare este luat în considerare la determinarea concentrației de proteine.

Vezi si:

  • Determinarea proteinelor în urină
  • Proba standardizată cu acid sulfosalicilic
  • Unificat Brandberg - Roberts - Metoda Stolnikov
  • Determinarea cantității de proteine ​​în urină prin reacția cu acidul sulfosalicilic
  • Metoda Biuret
  • Detectarea proteinei Bens-Jones în urină

Proteinuria este un fenomen în care proteinele sunt determinate în urină, ceea ce indică posibilitatea afectării rinichilor, servește ca factor în dezvoltarea bolilor de inimă, a sângelui, a vaselor limfatice.

Găsirea unei proteine ​​în urină nu indică întotdeauna boala. Un fenomen similar este tipic chiar și pentru persoanele absolut sănătoase, în a căror proteină din urină poate fi determinată. Hipotermia, activitatea fizică, utilizarea alimentelor cu proteine ​​duc la apariția proteinelor în urină, care dispare fără niciun tratament.

În timpul screening-ului, proteinele sunt determinate la 17% dintre persoanele aparent sănătoase, dar doar 2% din acest număr de persoane au un rezultat pozitiv al testului, care este un semn al bolii renale.

Moleculele proteice nu trebuie să pătrundă în sânge. Acestea sunt vitale pentru organism - sunt materiale de construcție pentru celule, participă la reacții ca coenzime, hormoni, anticorpi. Atât pentru bărbați, cât și pentru femei, norma este absența completă a proteinelor în urină.

Funcția de a preveni pierderea moleculelor de proteine ​​de către organism este realizată de rinichi.

Există două sisteme renale care filtrează urina:

  1. glomeruli renali - nu permit trecerea moleculelor mari, dar nu rețin albumina, globulinele - o mică parte din moleculele de proteine;
  2. tubuli renali - adsorb proteine ​​filtrate de glomeruli, readucându-le înapoi în sistemul circulator.

Albumina (aproximativ 49%), mucoproteinele, globulinele se găsesc în urină, dintre care aproximativ 20% sunt imunoglobuline.

Globulinele sunt proteine ​​din zer cu greutate moleculară mare, care sunt produse de sistemul imunitar și de ficat. Majoritatea sunt sintetizate de sistemul imunitar, se referă la imunoglobuline sau anticorpi.

Albumina este o fracțiune de proteine ​​care sunt primele care apar în urină deja cu leziuni renale minore. O anumită cantitate de albumină este prezentă și în urina sănătoasă, dar este atât de nesemnificativă încât nu poate fi detectată folosind diagnostice de laborator.

Pragul inferior care poate fi detectat prin diagnosticul de laborator este de 0,033 g / l. Dacă se pierd peste 150 mg de proteine ​​pe zi, atunci se vorbește despre proteinurie.


Date de bază privind proteinele din urină

Boala cu un grad ușor de proteinurie este asimptomatică. Vizual, urina fără proteine ​​nu se poate distinge de urină, care conține o cantitate mică de proteine. O urină oarecum spumoasă devine deja cu un grad ridicat de proteinurie.

Este posibil să se presupună excreția activă a proteinelor în urină prin apariția pacientului numai cu un grad mediu sau sever al bolii datorită apariției edemului extremităților, feței, abdomenului.

În stadiile incipiente ale bolii, semnele indirecte ale proteinuriei pot fi simptome:

  • modificări ale culorii urinei;
  • slăbiciune crescândă;
  • lipsa poftei de mâncare;
  • greață, vărsături;
  • dureri osoase;
  • somnolență, amețeli;
  • temperatură ridicată.

Apariția unor astfel de semne nu poate fi ignorată, mai ales în timpul sarcinii. Acest lucru poate însemna o ușoară abatere de la normă sau poate fi un simptom al dezvoltării preeclampsiei, preeclampsiei.

Cuantificarea pierderii de proteine ​​nu este o sarcină ușoară; mai multe teste de laborator sunt utilizate pentru a obține o imagine mai completă a stării pacientului.

Dificultățile în alegerea unei metode pentru detectarea excesului de proteine ​​în urină sunt explicate prin:

  • concentrație scăzută de proteine, care necesită recunoașterea instrumentelor de înaltă precizie;
  • compoziția urinei, care complică sarcina, deoarece conține substanțe care denaturează rezultatul.

Cele mai multe informații pot fi obținute din analiza primei probe de urină de dimineață, care este colectată după trezire.

În ajunul analizei, trebuie îndeplinite următoarele condiții:

  • nu consuma alimente picante, prajite, proteice, alcool;
  • excludeți administrarea de diuretice cu 48 de ore în avans;
  • limitează activitatea fizică;
  • respectați cu atenție regulile de igienă personală.

Urina de dimineață este cea mai informativă, deoarece rămâne în vezică mult timp și este mai puțin dependentă de aportul de alimente.

Este posibil să se analizeze cantitatea de proteine ​​din urină printr-o porțiune aleatorie, care este luată în orice moment, dar o astfel de analiză este mai puțin informativă, probabilitatea de eroare fiind mai mare.

Pentru a cuantifica pierderile zilnice de proteine, se face o analiză a urinei zilnice totale. Pentru a face acest lucru, în termen de 24 de ore, toată urina eliminată în timpul zilei este colectată într-un recipient special din plastic. Puteți începe să colecționați în orice moment. Condiția principală este exact o zi de colectare.

Definiția calitativă a proteinuriei se bazează pe proprietatea unei proteine ​​de a se denatura sub influența factorilor fizici sau chimici. Metodele calitative se referă la metodele de screening care permit stabilirea prezenței proteinelor în urină, dar nu fac posibilă evaluarea corectă a gradului de proteinurie.

Probele utilizate:

  • fierbere;
  • acid sulfosalicilic;
  • acid azotic, reactivul Larionova cu testul inelului Geller.

Un test cu acid sulfosalicilic este efectuat prin compararea unei probe de urină martor cu una experimentală, în care se adaugă 7-8 picături de acid sulfosalicilic 20% în urină. Concluzia despre prezența proteinelor se face prin intensitatea turbidității opalescente care apare în eprubetă în timpul reacției.

Testul Geller care utilizează 50% acid azotic este mai frecvent utilizat. Sensibilitatea metodei este de 0,033 g / l. La o astfel de concentrație de proteine, în tub apare un inel alb ca un fir cu o probă de urină și un reactiv la 2-3 minute după începerea experimentului, a cărui formare indică prezența proteinei.

Testul Geller

Metodele semicantitative includ:

  • metoda de determinare a proteinelor în urină cu benzi de testare;
  • Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Metoda de determinare prin metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov se bazează pe metoda inelului Geller, dar permite o estimare mai precisă a cantității de proteine. La efectuarea testului conform acestei tehnici, mai multe diluții de urină realizează apariția unui inel proteic filamentos în intervalul de timp cuprins între 2 - 3 minute de la începutul testării.

În practică, se folosește metoda benzilor testate acoperite cu colorant albastru de bromofenol ca indicator. Dezavantajul benzilor de testare este sensibilitatea selectivă la albumină, ceea ce duce la o denaturare a rezultatului în cazul unei creșteri a concentrației de globuline sau alte proteine ​​din urină.

Dezavantajele metodei includ, de asemenea, sensibilitatea relativ scăzută a testului la proteină. Benzile de testare încep să reacționeze la prezența proteinelor în urină atunci când concentrația de proteine ​​depășește 0,15 g / L.

Metodele de evaluare cantitativă pot fi aproximativ împărțite în:

  1. turbidimetric;
  2. colorimetric.

Metodele se bazează pe proprietatea proteinelor de a reduce solubilitatea sub acțiunea unui agent de legare cu formarea unui compus slab solubil.

Agenții de legare a proteinelor pot fi:

  • acid sulfosalicilic;
  • acid tricloracetic;
  • clorură de benzetoniu.

Rezultatele testelor se fac pe baza gradului de atenuare a fluxului luminos din eșantion cu suspensia în comparație cu controlul. Rezultatele acestei metode nu pot fi întotdeauna atribuite fiabilității datorită diferențelor în condițiile de realizare: viteza de amestecare a reactivilor, temperatura, aciditatea mediului.

Afectați evaluarea administrării medicamentelor cu o zi înainte, înainte de a efectua teste folosind aceste metode, nu puteți lua:

  • antibiotice;
  • sulfonamide;
  • preparate care conțin iod.

Metoda este accesibilă, ceea ce permite utilizarea sa pe scară largă pentru screening. Dar rezultate mai precise pot fi obținute folosind tehnici colorimetrice mai scumpe.

Tehnicile colorimetrice sunt metode sensibile care determină cu exactitate concentrația de proteine ​​în urină.

Acest lucru se poate face cu precizie ridicată:

  • reacția biuretului;
  • Tehnica lui Lowry;
  • tehnici de colorare care utilizează coloranți care formează complexe cu proteinele din urină care diferă vizual de eșantion.

Metode colorimetrice pentru detectarea proteinelor în urină

Metoda este fiabilă, foarte sensibilă, permițând determinarea albuminei, globulinelor, paraproteinelor în urină. Este utilizat ca principal mod de a clarifica rezultatele controversate ale testelor, precum și proteine ​​zilnice în urină la pacienții cu secții nefrologice ale spitalelor.

Rezultate și mai precise pot fi obținute prin metoda Lowry, care se bazează pe reacția biuret, precum și pe reacția Folin, care recunoaște triptofanul și tirozina în moleculele de proteine.

Pentru a exclude posibilele erori, proba de urină este purificată prin dializă din aminoacizi și acid uric. Sunt posibile erori atunci când se utilizează salicilați, tetracicline, clorpromazină.

Cea mai precisă metodă de determinare a unei proteine ​​se bazează pe capacitatea sa de a se lega de coloranți, dintre care se utilizează:

  • ponceau;
  • Coomassie Blue Brilliant;
  • roșu pirogall.

În timpul zilei, cantitatea de proteină excretată în urină se modifică. Pentru a evalua mai obiectiv pierderea de proteine ​​în urină, se introduce conceptul de proteină zilnică în urină. Această valoare este măsurată în g / zi.

Pentru o evaluare rapidă a proteinelor zilnice în urină, cantitatea de proteine ​​și creatinină este determinată într-o singură porție de urină, apoi raportul proteină / creatinină este utilizat pentru a face o concluzie despre pierderea de proteine ​​pe zi.

Metoda se bazează pe faptul că rata de excreție a creatininei în urină este o valoare constantă, nu se schimbă în timpul zilei. La o persoană sănătoasă, raportul normal de proteină: creatinină în urină este de 0,2.

Această metodă elimină posibilele erori care pot apărea la colectarea urinei zilnice.

Testele calitative sunt mai susceptibile decât testele cantitative de a da rezultate fals pozitive sau false negative. Apar erori în legătură cu administrarea de medicamente, obiceiurile alimentare, activitatea fizică în ajunul testului.

Decodarea acestui test calitativ este dată de evaluarea vizuală a turbidității într-o eprubetă în comparație cu rezultatul testului cu controlul:

  1. o reacție slab pozitivă este evaluată ca +;
  2. pozitiv ++;
  3. puternic pozitiv +++.

Testul inelului Geller estimează mai precis prezența proteinelor în urină, dar nu cuantifică proteina din urină. La fel ca testul acidului sulfosalicilic, testul Geller oferă doar o idee aproximativă a conținutului de proteine ​​din urină.

Metoda vă permite să evaluați cantitativ gradul de proteinurie, dar este prea laborioasă, inexactă, deoarece cu o diluare puternică, precizia evaluării scade.

Pentru a calcula proteina, trebuie să înmulțiți rata de diluare a urinei cu 0,033 g / l:

1 1 1: 2 0,066
1 2 1: 3 0,099
1 3 1: 4 0,132
1 4 1: 5 0,165
1 5 1: 6 0,198
1 6 1: 7 0,231
1 7 1: 8 0,264
1 8 1: 9 0,297
1 9 1: 10 0,33

Testul nu necesită condiții speciale, această procedură este ușor de făcut acasă. Pentru a face acest lucru, înmuiați banda de testare în urină timp de 2 minute.

Rezultatele vor fi exprimate prin numărul de plusuri pe bandă, a căror decodificare este conținută în tabel:

  1. Rezultatele testelor corespunzătoare valorilor de până la 30 mg / 100 ml corespund proteinuriei fiziologice.
  2. Citirile benzilor de test 1+ și 2 ++ indică proteinurie semnificativă.
  3. Valorile 3 +++, 4 ++++ sunt observate în proteinuria patologică cauzată de boli de rinichi.

Benzile de testare oferă doar o indicație aproximativă a proteinei crescute în urină. Nu sunt folosite pentru diagnosticarea precisă și cu atât mai mult nu pot spune ce înseamnă.

Nu permiteți testelor să evalueze în mod adecvat cantitatea de proteine ​​din urina gravidelor. O metodă mai fiabilă de evaluare este determinarea proteinelor în urina zilnică.

Determinarea proteinelor în urină folosind o bandă de testare:

Proteinele zilnice din urină servesc drept diagnostic mai precis al evaluării stării funcționale a rinichilor. Pentru a face acest lucru, este necesar să colectați toată urina excretată de rinichi pe zi.

Valorile acceptabile pentru raportul proteină / creatinină sunt datele date în tabel:

Dacă pierdeți mai mult de 3,5 g de proteine ​​pe zi, afecțiunea se numește proteinurie masivă.

Dacă există multe proteine ​​în urină, este necesară o reexaminare după 1 lună, apoi după 3 luni, în funcție de rezultatele cărora se stabilește de ce este depășită norma.

Motivele creșterii proteinelor în urină sunt producția crescută în organism și afectarea funcției renale, proteinuria se distinge:

  • fiziologice - abaterile minore de la normă sunt cauzate de procese fiziologice, se rezolvă spontan;
  • patologice - modificările sunt cauzate ca urmare a unui proces patologic la rinichi sau alte organe ale corpului, acesta progresează fără tratament.

O ușoară creștere a proteinelor poate fi observată cu nutriție abundentă a proteinelor, arsuri mecanice, leziuni, însoțită de o creștere a producției de imunoglobuline.

Un grad ușor de proteinurie poate fi cauzat de efortul fizic, stresul psiho-emoțional, luarea anumitor medicamente.

Proteinuria fiziologică se referă la o creștere a proteinelor în urina copiilor în primele zile după naștere. Dar după o săptămână de viață, conținutul de proteine ​​din urina copilului este considerat ca o abatere de la normă și indică o patologie în curs de dezvoltare.

Bolile renale, bolile infecțioase sunt, de asemenea, uneori însoțite de apariția proteinelor în urină.

Astfel de condiții corespund de obicei unui grad ușor de proteinurie, sunt fenomene tranzitorii, trec rapid de la sine, fără a necesita tratament special.

Condiții mai severe, proteinurie severă este observată în cazul:

  • glomerulonefrita;
  • Diabet;
  • boala de inima;
  • cancer al vezicii urinare;
  • mielom multiplu;
  • infecții, leziuni medicamentoase, boli renale polichistice;
  • tensiune arterială crescută;
  • lupus eritematos sistemic;
  • Sindromul Goodpasture.

Obstrucția intestinală, insuficiența cardiacă, hipertiroidia pot cauza urme de proteine ​​în urină.

Tipurile de proteinurie sunt clasificate în mai multe moduri. Pentru o evaluare calitativă a proteinelor, puteți utiliza clasificarea Yaroshevsky.

Conform taxonomiei lui Yaroshevsky, creată în 1971, proteinuria se distinge:

  1. renal - care include filtrarea glomerulară afectată, secreția de proteine ​​tubulare, reabsorbția insuficientă a proteinelor din tubuli;
  2. prerenal - apare în afara rinichilor, excreția hemoglobinei, proteine ​​care apar în exces în sânge ca urmare a mielomului multiplu;
  3. postrenal - apare în zona tractului urinar după rinichi, excreția de proteine ​​în timpul distrugerii organelor urinare.

Pentru o evaluare cantitativă a ceea ce se întâmplă, condiționat este izolat gradul de proteinurie. Trebuie amintit că pot progresa cu ușurință la unul mai sever fără tratament.

Cea mai severă etapă a proteinuriei se dezvoltă cu o pierdere de peste 3 g de proteine ​​pe zi. Pierderea de proteine ​​de la 30 mg la 300 mg pe zi corespunde unui stadiu moderat sau microalbumnurie. Până la 30 mg de proteine ​​în urină zilnică înseamnă proteinurie ușoară.

Câtă proteină este în urină?

  1. În mod normal, practic nu există proteine ​​în urină (mai puțin de 0,002 g / l). Cu toate acestea, în unele condiții, o cantitate mică de proteine ​​poate apărea în urina persoanelor sănătoase după ce a consumat o cantitate mare de alimente proteice, ca urmare a răcirii, în timpul stresului emoțional, a efortului fizic prelungit (așa-numita proteinurie de marș).

    Apariția unei cantități semnificative de proteine ​​în urină (proteinurie) este o patologie. Proteinuria poate fi cauzată de boli de rinichi (glomerulonefrita acută și cronică, pielonefrita, nefropatia femeilor însărcinate etc.) sau de boala tractului urinar (inflamația vezicii urinare, a prostatei, ureterelor). Proteinuria renală poate fi organică (glomerulară, tubulară și în exces) și funcțională (proteinurie febrilă, ortostatică la adolescenți, sugari supraalimentați, la nou-născuți). Proteinuria funcțională nu este asociată cu boala renală. Cantitatea zilnică de proteine ​​variază la pacienți de la 0,1 la 3,0 g sau mai mult. Compoziția proteinelor din urină este determinată prin electroforeză. Apariția proteinei Bens-Jones în urină este caracteristică mielomului și macroglobulinemiei lui Waldenstrom, # 223; 2 microglobuline cu leziuni ale tubilor renali.

  2. În mod normal, practic nu există proteine ​​în urină (mai puțin de 0,002 g / l).
  3. Principalele semne ale bolilor detectate prin studiul urinei.

    SG Greutate specifică. O scădere a greutății specifice indică o scădere a capacității rinichilor de a concentra urina și de a elimina toxinele din organism, ceea ce se întâmplă cu insuficiența renală. Creșterea greutății specifice este asociată cu o cantitate mare de zahăr și săruri în urină. Trebuie remarcat faptul că este imposibil să se estimeze greutatea specifică dintr-un singur test de urină, pot exista modificări aleatorii, este necesar să se repete analiza urinei de 1-2 ori.

    Proteine ​​Proteine ​​în urină - proteinurie. Proteinuria poate fi cauzată de afectarea rinichilor în sine prin nefrită, amiloidoză și daune otrăvitoare. Proteinele din urină pot apărea și din cauza bolilor tractului urinar (pielonefrita, cistita, prostatita).

    Glucoza Glucoza (zahărul) din urină - glucozuria - este cel mai adesea cauzată de diabetul zaharat. O cauză mai rară este afectarea tubilor renali. Este foarte alarmant dacă corpurile cetonice sunt determinate împreună cu zahărul din urină. Acest lucru se întâmplă în cazul diabetului zaharat sever, nereglementat și este un vestitor al celei mai severe complicații a diabetului - coma diabetică.

    Bilirubina, urobilinogenul Bilirubina și urobilina sunt determinate în urină sub diferite forme de icter.

    Eritrocite Eritrocite în urină - hematurie. Acest lucru se întâmplă fie cu afectarea rinichilor înșiși, cel mai adesea cu inflamația lor, fie la pacienții cu boli ale tractului urinar. Dacă, de exemplu, o piatră se mișcă de-a lungul lor, aceasta poate răni membrana mucoasă, vor exista celule roșii din sânge în urină. O tumoare renală dezintegrată poate duce, de asemenea, la hematurie.

    Leucocite Leucocite în urină - leucociturie, cel mai adesea o consecință a modificărilor inflamatorii ale tractului urinar la pacienții cu pielonefrită, cistită. Leucocitele sunt adesea determinate cu inflamația organelor genitale externe feminine, la bărbați - cu inflamația glandei prostatei.

    Cilindrii Cilindrii sunt formațiuni microscopice deosebite. Aruncările de hialină în cantitate de 1-2 pot fi găsite la o persoană sănătoasă. Se formează în tubulii renali, acestea sunt particule de proteine ​​lipite între ele. Dar o creștere a numărului lor, cilindrii de alte tipuri (granulare, eritrocitare, grase) indică întotdeauna deteriorarea țesutului renal în sine. Există cilindri în bolile inflamatorii ale rinichilor, leziunile metabolice, de exemplu, diabetul zaharat.

    Informativitatea metodei și limitele acesteia. Valoarea informativă a unui test general de urină pentru recunoașterea bolilor renale specifice este scăzută; de obicei sunt necesare studii suplimentare și mai precise. Dar acest studiu este foarte important, mai ales atunci când se efectuează studii preventive, deoarece vă permite să identificați semnele timpurii ale bolii renale. Se știe, de asemenea, că adesea bolile renale sunt latente și doar analiza urinei le permite să fie suspectate și examinarea necesară în continuare.

  4. În majoritatea laboratoarelor, atunci când examinează urina pentru proteine, utilizează mai întâi reacții calitative care nu detectează proteinele în urina unei persoane sănătoase. Dacă proteina din urină este detectată prin reacții calitative, se efectuează determinarea sa cantitativă (sau semicantitativă). În acest caz, caracteristicile metodelor utilizate, care acoperă un spectru diferit de uroproteine, contează. Deci, atunci când se determină proteina utilizând acid sulfosalicilic 3%, cantitatea de proteină de până la 0,03 g / l este considerată normală, în timp ce atunci când se utilizează metoda pirogalolului, limita valorilor normale a proteinelor crește la 0,1 g / l. În acest sens, în formularul de analiză, este necesar să se indice valoarea proteinei normale pentru metoda utilizată de laborator.

    La determinarea cantităților minime de proteine, se recomandă repetarea analizei; în cazuri îndoielnice, ar trebui determinată pierderea zilnică de proteine ​​în urină. În mod normal, urina zilnică conține cantități mici de proteine. În condiții fiziologice, proteina filtrată este aproape complet reabsorbită de epiteliul tubulilor proximali și conținutul său în cantitatea zilnică de urină variază în funcție de diferiți autori de la urme la 20 50, 80 100 mg și chiar până la 150 200 mg. Unii autori cred că excreția zilnică de proteine ​​în cantitate de 30-50 mg / zi este norma fiziologică pentru un adult. Alții consideră că excreția de proteine ​​urinare nu trebuie să depășească 60 mg / m2 de suprafață corporală pe zi, cu excepția primei luni de viață, când valoarea proteinuriei fiziologice poate fi de patru ori mai mare decât valorile indicate.

    Condiția generală pentru apariția proteinelor în urina unei persoane sănătoase este o concentrație suficient de mare de proteine ​​în sânge și o greutate moleculară de cel mult 100-200 kDa.

  5. aceasta nu este norma, cu diagnosticul dvs. este posibil, un alt lucru este că pentru sindromul nefrotic acesta este de fapt un mic indicator .. uitați-vă la clinică - umflături, presiune etc. continuați să luați tratamentul prescris ..
  6. și totuși voi spune: NU ar trebui să fie normal!

Indicatori normali: proteina este în mod normal conținută în urină în cantități minime care nu sunt detectate de reacții calitative normale. Limita superioară a normei de proteine ​​în urină este de 0,033 g / l. Dacă conținutul de proteine ​​este mai mare decât această valoare, atunci testele de calitate pentru proteine ​​devin pozitive.

Semnificația clinică a definiției:

Apariția proteinelor în urină se numește proteinurie. Proteinuria poate fi falsă și renală. Proteinuria extrarenală poate fi în prezența impurităților de origine proteică din organele genitale (vaginite, uretrite etc.), în timp ce cantitatea de proteine ​​este nesemnificativă - până la 0,01 g / l. Proteinuria renală poate fi funcțională (cu hipotermie, exerciții fizice, febră) și organică - cu glomerulonefrită, pielonefrită, nefrită, nefroză, insuficiență renală. În proteinuria renală, conținutul de proteine ​​poate fi de la 0,033 la 10-15 g / l, uneori mai mare.

Definiție calitativă.

Principiul metodei: pe baza faptului că proteina se coagulează (devine vizibilă) sub acțiunea acizilor anorganici. Gradul de tulbure depinde de cantitatea de proteine.

Detectarea proteinelor în urină cu acid sulfosalicilic 20%.

Reactivi: soluție de acid sulfosalicilic 20%. Echipament: fundal întunecat.

Progresul cercetării:

2. Se toarnă 2 ml de urină preparată în 2 eprubete cu același diametru. 1 eprubetă - control, 2 - experiment. La eprubetă se adaugă 4 picături de acid sulfosalicilic 20%.

3. Rezultatul este marcat pe un fundal întunecat.

4. În prezența proteinelor, urina din eprubetă devine tulbure.

Determinarea calitativă a proteinelor în teste de urină - benzi.

Pentru a detecta proteinuria, se utilizează diferite monoteste - benzi: Albufan, Albustics, Biofan E și politeste: Triscan, Nonafan etc.

Cuantificare.

Detectarea proteinelor în urină prin metoda Roberts-Stolnikov.

Principiul metodei: pe baza faptului că proteina se coagulează (devine vizibilă) sub acțiunea acizilor anorganici. Gradul de ceață depinde de cantitatea de proteină (adică testul inelului Geller). Cu o concentrație de proteine ​​în urină de 0,033 g / l, la sfârșitul a 3 minute după stratificarea urinei, apare un inel alb subțire, asemănător firului.

Reactivi: Soluție 50% de acid azotic sau reactiv Roberts (98 părți dintr-o soluție saturată de clorură de sodiu și 2 părți de acid clorhidric concentrat) sau reactiv Larionova (98 părți dintr-o soluție saturată de clorură de sodiu și 2 părți de acid azotic concentrat) .

Echipament: fundal întunecat.

Progresul cercetării:

1. Cerințe pentru urină: urina trebuie să aibă pH acid (sau ușor acid), trebuie să fie transparentă, deoarece această urină este centrifugată. Urina alcalină este acidulată până la o reacție ușor acidă a mediului, folosind hârtie indicatoare pentru control.

2. Se toarnă 2 ml soluție 50% de acid azotic sau unul dintre reactivi într-o eprubetă, apoi se așează cu atenție același volum de urină preparată de-a lungul peretelui eprubetei folosind o pipetă.

3. Proba se lasă 3 minute.

4. După 3 minute, citiți rezultatul. Rezultatul este notat pe un fundal întunecat în lumina transmisă. Dacă inelul este larg, compact, atunci urina este diluată cu apă distilată și din nou stratificată pe reactiv.

5. Urina se diluează până când după 3 minute se formează un inel subțire asemănător firului.

C = 0,033g / l x rata de diluare.

Pentru clinică, este importantă atât determinarea calitativă, cât și cantitativă a proteinelor în urină.

Eșantioane calitative pentru determinarea proteinelor în urină
Au fost propuse peste 100 de reacții pentru determinarea calitativă a proteinelor în urină. Cele mai multe dintre ele se bazează pe depunerea de proteine ​​prin mijloace fizice (de încălzire) sau chimice. Prezența proteinelor este dovedită de apariția turbidității.

Probele colorimetrice uscate sunt, de asemenea, de interes.

Numai cele mai importante mostre pentru practică vor fi descrise mai jos.

Testul acidului sulfosalicilic... La câțiva mililitri de urină, adăugați 2-4 picături dintr-o soluție de acid sulfosalicilic 20%. Cu o reacție pozitivă, apare turbiditatea. Rezultatul este indicat de termenii: opalescență, reacție slab pozitivă, pozitivă sau puternic pozitivă. Testul acidului sulfosalicilic este unul dintre cele mai sensibile teste pentru determinarea proteinelor în urină. Detectează chiar și cele mai mici creșteri patologice ale proteinelor din urină. Datorită unei tehnici simple, acest test a fost utilizat pe scară largă.

Testul aseptolului... Aseptolul este un substitut pentru acidul sulfosalicilic. Poate fi preparat din materiale disponibile în orice laborator (fenol și acid sulfuric). O soluție de aseptol de 20% este utilizată ca reactiv. Testul se efectuează după cum urmează: într-o eprubetă care conține 2-3 ml de urină, 0,5-1 ml de soluție de aseptol se adaugă pe fund. Dacă se formează un inel alb de proteină coagulată la interfața dintre cele două lichide, proba este pozitivă.

Testul Geller... Sub câțiva mililitri de urină, se adaugă 1-2 ml de acid azotic 30% (greutate specifică 1,20). Dacă se formează un inel alb la marginea ambelor lichide, proba este pozitivă. Reacția devine pozitivă dacă proteina este mai mare de 3,3 mg%. Uneori se obține un inel alb atunci când sunt prezente cantități mari de urați. Spre deosebire de inelul proteic, inelul urat nu apare la interfața dintre cele două lichide, ci puțin mai sus. Larionova sugerează utilizarea unei soluții 1% de acid azotic într-o soluție saturată de clorură de sodiu în loc de 30% acid azotic ca reactiv; acest lucru oferă economii mari în acid azotic.

Proba cu cianură de fier potasiu și acid acetic... Această reacție face posibilă diferențierea proteinelor serice de nucleoalbumine.

Cantități egale de urină sunt turnate în două eprubete. La una dintre ele se adaugă câteva picături dintr-o soluție de acid acetic 30%. Dacă este tulbure în comparație cu tubul de control, urina conține nucleoalbumină. Dacă nu apare tulbure, conținutul ambelor tuburi este amestecat și din nou împărțit în două părți. Câteva picături sunt adăugate la una dintre cele două eprubete (excesul poate transforma o probă pozitivă în una negativă) dintr-o soluție de 10% sare galbenă din sânge (cianură de potasiu feruginoasă). În prezența proteinelor din zer, se obține turbiditate.

În cazul în care urina concentrată conține cantități mari de acid uric și urate, o probă cu cianură de fier potasiu și acid acetic trebuie efectuată după diluarea preliminară (de 2-3 ori) a urinei cu apă. În caz contrar, pot apărea tulburări cauzate de acidul uric depus.

Acest lucru este deosebit de important atunci când se examinează urina sugarilor, care conține o mulțime de acid uric și urat.

Dintre restul testelor calitative pentru proteine ​​în urină, bazate pe precipitarea proteinelor, au fost utilizate următoarele: testul de fierbere, Esbach, Perdy, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann-Suzanne, Jollet , Probe Exton, Kamlet, Kobuladze, Liliendhal-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya etc.

Atunci când se produc probe de înaltă calitate pentru proteine ​​în urină, pe baza precipitării proteinelor, trebuie respectate următoarele reguli generale, a căror încălcare duce la erori semnificative în studiu.

1. Urina care trebuie examinată trebuie să aibă o reacție acidă. Cu o reacție alcalină, urina este ușor acidulată cu acid acetic. Producerea unei probe cu urină alcalină în cazurile în care un acid este utilizat ca reactiv poate duce la neutralizarea acidului și la un rezultat negativ dacă reacția este pozitivă. Acest lucru este valabil mai ales pentru proba de acid sulfosalicilic, deoarece acidul este adăugat în cantități foarte mici și poate fi ușor neutralizat.

2. Urina analizată trebuie să fie transparentă.

3. Probele pentru determinarea proteinelor în urină trebuie întotdeauna efectuate în două eprubete, dintre care una servește drept martor. Fără un tub de control, este posibil să nu observați o ușoară turbiditate în reacții.

4. Cantitatea de acid adăugată în timpul probelor nu trebuie să fie prea mare. Cantități mari de acid pot forma acidalbumine solubile și pot transforma o probă pozitivă în una negativă.

Probele colorimetrice uscate merită o atenție deosebită datorită tehnicii lor simple. Aceste teste utilizează efectul pe care îl are proteina asupra culorii indicatorului din soluția tampon (așa-numita eroare a indicatorului proteinei). O bandă de hârtie de filtru îmbibată în tampon citrat acid și albastru de bromofenol ca indicator este scufundată pentru scurt timp în urină. Eșantionul este pozitiv dacă se obține o culoare albastru-verde. Comparând intensitatea culorii cu standardele de hârtie colorată, puteți deduce concluzii aproximative și cantitative. Hârtiile de testare sunt vândute în pachete cu standardele de culoare corespunzătoare, similar cu hârtiile de testare multifuncționale.

Metode de cuantificare a proteinelor în urină
Multe metode au fost propuse pentru determinarea cantitativă a proteinelor în urină. Metodele cantitative exacte pentru determinarea proteinelor din materialul biologic nu au găsit o aplicare largă în determinarea proteinelor în urină, datorită unei tehnici complexe și laborioase. Metodele volumetrice s-au răspândit, în special metoda Esbach. Sunt foarte simple, dar, din păcate, nu sunt foarte exacte. Metodele grupului Brandberg-Stolnikov sunt convenabile și pentru clinică, oferind rezultate mai precise decât metodele volumetrice, cu o tehnică relativ simplă. Cu un fotometru sau nefelometru, metodele nefelometrice sunt, de asemenea, convenabile.

Metoda Esbach... A fost propus de medicul parizian Esbach în 1874. Urina și un reactiv sunt turnate într-o eprubetă specială (albuminometrul lui Esbach). Tubul este etanșat cu un dop de cauciuc, amestecat bine (fără a bate!) Și lăsat în poziție verticală până a doua zi. Citiți diviziunea la care ajunge coloana de sedimente proteice. Numărul găsit arată conținutul de proteine. Este foarte important cu metoda Esbach ca urina să fie acidă. Urina alcalină poate neutraliza constituenții acizi ai reactivului și poate preveni depunerea proteinelor.

Avantajele metodei: este simplă și convenabilă în practică.

Dezavantaje: metoda este inexactă, rezultatul se obține după 24 - 48 de ore.

Metoda Brandberg-Stolnikov... Se bazează pe testul de calitate Geller. Testul Geller poate fi utilizat pentru determinarea cantitativă, deoarece dă un rezultat pozitiv cu un conținut de proteine ​​peste 3,3 mg%. Aceasta este concentrația limitată de proteine ​​sub care proba devine negativă.

Modificarea lui Ehrlich și Althausen... Oamenii de știință sovietici S. L. Erlikh și A. Ya. Altgauzen au modificat metoda Brandberg-Stolnikov, indicând posibilitățile de simplificare a cercetării și de economisire a timpului în producția sa.

Prima simplificare este legată de momentul apariției inelului. Ora exactă a apariției sale este determinată, fără a respecta neapărat minutele 2 și 3.

A doua simplificare face posibilă stabilirea a ceea ce ar trebui să se facă reproducere. Autorii au demonstrat că prin apariția inelului rezultat, diluția necesară poate fi aproximativ stabilită. Ele fac diferența între filamentare, largi
și un inel compact.

Dintre metodele nefelometrice, merită menționat Metoda Kingsbarry și Clark... 2,5 ml de urină filtrată sunt turnate într-un cilindru mic gradat, umplut cu o soluție apoasă 3% de acid sulfosalicilic până la 10 ml. Se amestecă bine și după 5 minute fotometrie într-o cuvă de 1 cm cu un filtru galben, folosind apă ca lichid de compensare. Cu un fotometru Pulfrich, dispariția găsită înmulțită cu 2,5 dă cantitatea de proteine ​​în% o. În cazul în care rata de dispariție este mai mare de 1,0, urina este pre-diluată de 2 ori, de 4 ori sau chiar mai mult.

Pentru a avea o idee clară a cantității de proteine ​​excretate în urină, este necesar să se determine nu numai concentrația acestora într-o porțiune separată de urină, ci și cantitatea lor zilnică totală. Pentru a face acest lucru, colectați urina pacientului timp de 24 de ore, măsurați volumul acestuia în mililitri și determinați concentrația de proteine ​​într-o porțiune de urină zilnică în g%. Cantitatea de proteine ​​excretată în urină în 24 de ore este determinată în funcție de cantitatea zilnică de urină în grame.

Semnificația clinică a proteinelor în urină

Urina umană conține în mod normal cantități minime de proteine ​​care nu pot fi determinate de probele obișnuite de proteine ​​calitative din urină. Eliberarea de cantități mari de proteine, în care testele calitative obișnuite pentru proteine ​​în urină devin pozitive, este un fenomen anormal numit proteinurie. Proteinuria este fiziologică doar la un nou-născut, în primele 4-10 zile după naștere. Denumirea obișnuită de albuminurie este incorectă, deoarece nu numai albumina este excretată în urină, ci și alte tipuri de proteine ​​(globuline etc.).

Proteinuria, ca simptom de diagnostic, a fost descoperită în 1770 de Cotugno.

Cele mai importante proteinurii renale funcționale la copii sunt următoarele:

1. Proteinuria fiziologică a nou-născutului... Apare la majoritatea nou-născuților și nu are efect advers. Explicați printr-un filtru de rinichi fragil, daune la naștere sau pierderea de lichide în primele zile ale vieții. Proteinuria fiziologică dispare la 4-10 zile după naștere (mai târziu la copiii prematuri). Cantitatea de proteine ​​este redusă. Este nucleoalbumină.

Albuminuria neonatală pe termen lung poate fi un simptom al lueselor congenitale.

2. Albuminuria AVC... Acestea sunt cauzate de depășirea pragului de iritabilitate normală a filtrului renal prin iritații semnificative mecanice, termice, chimice, mentale și alte - pierderea de lichide la sugari (proteinurie deshidratată), scăldat la rece, alimente abundente, bogate în proteine ​​(proteinurie alimentară) , palparea rinichiului (albuminuria de palpare), suprasolicitarea fizică, frica etc.

Albuminuria accident vascular cerebral apare mai ușor la copii la o vârstă fragedă decât la copiii mai mari și la adulți, deoarece rinichii unui sugar și ale unui copil mic sunt mai ușor iritați. Deshidratarea albuminuriei (încălcarea hrănirii, hidratării, toxicozei, diareei, vărsăturilor) este deosebit de frecventă la sugari.

Albuminuria AVC este benignă. Ele dispar imediat după eliminarea cauzelor care le provoacă. Sedimentul conține uneori leucocite unice, aruncări și eritrocite. Proteina este cel mai adesea nucleoalbumină.

3. Proteinuria ortostatică... Această afecțiune este tipică pentru copiii de vârstă preșcolară și școlară. Apare pe baza tulburărilor vasomotorii ale aportului de sânge la rinichi. Tipic pentru albuminuria ortostatică (de aici și numele său) este că apare numai atunci când copilul stă în picioare, când coloana vertebrală este în poziție lordotică. În poziția culcat, acesta dispare. Nucleoalbumina este eliberată. În cazuri îndoielnice, puteți recurge la experiența ortostatică, care este următoarea: seara, cu o oră înainte de culcare, copilul golește vezica; dimineața, ridicându-se din pat, eliberează din nou urină. Această urină nu conține proteine. Apoi copilul este pus în genunchi timp de 15-30 de minute cu un băț la spate, între coatele îndoite ale ambelor mâini. Se creează o poziție lordoză, care are ca rezultat eliberarea de proteine, fără modificări ale sedimentului.

Cu albuminuria ortostatică, 8-10 g de proteine ​​pot fi eliberate pe zi.

Proteinuria renală organică are o importanță clinică extremă între toate proteinuriile. Acestea sunt cauzate de boli renale organice (nefrită, nefroză, nefroscleroză). Proteinuria este unul dintre cele mai importante și mai cunoscute simptome ale bolilor renale organice.

1. În glomerulonefrita acută și cronică, proteinuria apare în mod regulat. Cantitatea de proteine ​​este moderată și nu există niciun paralelism între gradul de proteinurie și severitatea bolii. În schimb, nefrita cronică și mai severă apare adesea cu mai puține proteine ​​decât nefrita acută. După nefrită acută, uneori pentru o lungă perioadă de timp (ani), se stabilesc cantități mici de proteine ​​în urină, care nu au nicio semnificație patologică („albuminurie reziduală”). Nu trebuie uitat că poate apărea și „nefrita fără proteinurie”. Uneori proteina se găsește într-o porțiune de urină, dar nu în alta. Raportul dintre albumină și globuline în nefritele acute este scăzut, iar în nefritele cronice este mai mare.

2. În nefroscleroză, cantitatea de proteine ​​din urină este destul de nesemnificativă; se găsesc deseori forme ale bolii fără proteine ​​în urină.

3. Dintre toate bolile renale, nefroza apare cu cea mai pronunțată proteinurie.

4. În condiții infecțioase și toxice, există așa-numita proteinurie febrilă și toxică. Acestea sunt nefroze acute, în care cantitatea de proteine ​​este mică. Acest grup include, de asemenea, proteinurie în condiții convulsive (convulsii), cu hiperfuncție a glandei tiroide, icter, intususcepție, enterocolită, arsuri, anemie severă etc. Aceste albuminurii sunt benigne și trec rapid (albuminurie tranzitorie).

5. Odată cu stagnarea sângelui în rinichi, apare așa-numita albuminurie congestivă, care este caracteristică pacienților cardiaci în stadiul decompensării. Apare și în cazul ascitei și tumorilor abdomenului.

În cazul albuminuriei febrile, toxice și congestive, permeabilitatea crescută a filtrului renal este deosebit de pronunțată. Potrivit unor autori, multe dintre aceste proteinurie se desfășoară fără afectarea organică a parenchimului renal.

Albuminurie extrarenală sunt de obicei cauzate de impurități proteice (secreții, celule dezintegrate), care sunt secretate de tractul urinar bolnav și organele genitale. Albuminuria extrarenală datorată cistopielitei (piuriei) este mai frecventă, mai rar datorită vulvovaginitei, calculilor și tumorilor tractului urinar.

Cu albuminuria extrarenală, un număr mare de leucocite și bacterii se găsesc în sediment. Elementele renale nu se găsesc aproape niciodată. Cantitatea de proteine ​​este redusă. Urina filtrată sau centrifugată de obicei nu dă rezultate pozitive pentru proteine.

La cei care se recuperează după pielită, albuminuria dispare după bacteriurie și piurie.

Trebuie subliniat ca fenomen caracteristic faptul că în copilăria timpurie bolile renale organice apar extrem de rar, de aceea proteinuria organică este de asemenea rară. Dintre acestea, sunt în principal febrile și toxice. Spre deosebire de proteinuria organică, albuminuria accident vascular cerebral este foarte frecventă la copii la o vârstă fragedă.

La copiii mai mari, proteinuria organică este mai des funcțională. În general, odată cu vârsta, proteinuriile funcționale sunt mai puțin frecvente, iar cele organice mai des.

Studii electroforetice ale proteinelor din urină

Un număr de autori utilizează metoda electroforetică pentru a studia proteinele din urină (uroproteine). Din electroforegramele obținute se poate observa că au aceeași compoziție calitativă ca proteinele plasmatice. Acest lucru indică faptul că proteinele din urină sunt derivate din proteinele plasmatice.

R-tu 50% soluție de azot sau soluție de larion. Proces de determinare: puneți un număr de eprubete într-un trepied și turnați 1 ml dintr-o soluție de azot la care adăugați 1 ml de urină, puneți-l pe reactiv și înregistrați timpul, când apare inelul, notați timpul de aspectul inelului. Dacă inelul este larg, diluați urina.

4. Determinarea concentrației de proteine ​​în urină cu acid sulfosalicilic 3%.

R-you: 3% ccc, clorură de sodiu 9%, albumină str 10% Curs de determinare: În două tuburi de centrifugă de măsurare "O" - experiență și "K" - controlul este plasat pe 1,25 ml de urină limpede. La cea experimentală se adaugă 3,75 ml dintr-o soluție 3% de acid sulfosalicilic, la controlul 3,75 ml soluție de clorură de sodiu 0,9%. Se lasă 5 minute și apoi fotometric pe FEC la o lungime de undă de 590 - 650 nm (filtru portocaliu sau roșu) într-o cuvă cu o grosime a stratului de 5 mm, experimentați contra controlului. Calculul se efectuează în conformitate cu programul sau tabelul de calibrare. Principiul metodei pe baza faptului că proteina cu acid sulfosalicilic dă ceață, a cărei intensitate este direct proporțională cu concentrația proteinei.

5. detectarea glucozei în testul de urină Gaines-Akimov. Principiu: Glucoza, când este încălzită într-un mediu alcalin, reduce dihidroxidul de cupru (galben) la monohidroxid de cupru (roșu portocaliu). Pregătirea reactivului: 1) 13,3 g chim. sulfat de cupru cristalin pur (CuSO 4 . 5 H 2 O) soluție. în 400 ml apă. 2) 50 g de hidroxid de sodiu se dizolvă în 400 ml de apă. 3) 15 g de glicerină pură se diluează în 200 ml de apă. Prima și a doua soluție sunt amestecate și a treia este turnată imediat. Reactivul stă. Progresul determinării: Adăugați 1 picătură de urină și 9 picături de reactiv într-o eprubetă și fierbeți într-o baie de apă timp de 1-2 minute. Eșantion pozitiv: culoare galbenă sau portocalie a lichidului sau a sedimentelor.

6. Determinarea calitativă a glucozei în urină prin metoda glucozei oxidazei. Principiul metodei: glucoza se oxidează în prezența glucozei oxidazei, conform reacției: Glucoză + O 2 gliconolant + H 2 O 2. Peroxidul de hidrogen rezultat sub acțiunea peroxidazei oxidează substratul cu formarea unui produs colorat.

Adăugăm și incubăm timp de 15 minute la 37 0 С. Uită-te la KFK, cuvă de 5 mm.

Apoi se fac calcule conform formulei: C op = Ext op . Cst / Ect st.

7. Detectarea corpurilor cetonice în urină prin testul lui Lestrade. O pulbere sau o tabletă de soluție Lestrade este aplicată (la vârful unui bisturiu) pe o lamă și se aplică 2-3 picături de urină pe ea. În prezența corpurilor cetonice, va apărea o culoare de la roz la violet. Eșantionul este evaluat pe un fundal alb.

8. Detectarea pigmentului de sânge în urină prin probă cu soluție de 5% alcool de amidopirină.

Soluție 1,5% alcool amidopirină (0,5 g amidopirină se dizolvă în 10 ml alcool 96%) 2,3% soluție peroxid de hidrogen 1,5 g hidropirit se dizolvă în 50 ml apă) Procedură: se toarnă 2-3 ml acid acetic într-o eprubetă - extract de eter sau urină nefiltrată agitată. adăugați 8-10 picături de soluție 5% de amidopirină și 8-10 picături de soluție 3% de peroxid de hidrogen; țineți cont de rezultat nu mai târziu de 2-3 minute. eșantionul este considerat pozitiv în prezența colorării gri-violet.

Detectarea urobilinei în urină prin testul Neubauer.

Pe baza reacției de culoare a urobilinogenului cu reactivul Ehrlich, care constă din 2 g de paradimetilaminobenaldehidă și 100 ml soluție de acid clorhidric (200 g l). Determinare. Câteva picături de soluție Ehrlich se adaugă la câțiva ml de urină proaspătă (pe 1 ml de urină și 1 ml de soluție. Apariția unei culori roșii în primele 30 de secunde indică o creștere a gazonului de urobilinogen. În condiții normale, culoarea apare mai târziu sau complet absentă. Când urina este în picioare, urobilinogenul se transformă în urobilină și testul poate fi fals negativ.

Detectarea bilirubinei în urină prin testul Rosin.

Soluție alcoolică de iod (10 g l): 1 g de iod cristalin se dizolvă într-un cilindru cu o capacitate de 100 ml în 20-30 ml de 96 g de alcool rectificat, apoi se adaugă alcool la semn. urina care trebuie examinată și stratificarea cu atenție a unei soluții alcoolice de iod pe ea (dacă urina are o densitate relativă scăzută, atunci ar trebui să fie stratificată pe o soluție alcoolică de iod). antipirină, precum și cu sodă în urina sângelui pigment, testul se dovedește a fi pozitiv). La o persoană sănătoasă, acest test este negativ.

Studiul urinei prin chimie uscată (monopoliteste).

Principiu. Metoda se bazează pe efectul unei proteine ​​asupra culorii unui indicator dintr-o soluție tampon, în urma căreia colorantul își schimbă culoarea din galben în albastru.

Atunci când efectuați o reacție pentru prezența proteinelor în urină și determinați pH-ul folosind hârtie indicatoare, se recomandă să urmați aceste instrucțiuni:

  1. Colectați urina într-un vas bine spălat.
  2. Utilizați urină proaspăt colectată, fără conservanți.
  3. Închideți carcasa cu atenție după ce ați scos din acesta numărul necesar de benzi indicatoare de hârtie.
  4. Nu apucați zonele indicator cu degetele.
  5. A se utiliza numai în termenul de expirare indicat pe etichetă.
  6. Respectați regulile pentru depozitarea hârtiei indicatoare.
  7. Efectuați o evaluare a rezultatelor în conformitate cu instrucțiunile date în instrucțiuni.

Efectuarea analizei urinei pe un analizor chimic uscat în urină.

Progresul determinării. O bandă de hârtie indicatoare este îndepărtată din creion și introdusă în urina de testare pentru a umezi simultan ambele zone indicatoare. După 2-3 s, banda se așează pe o placă de sticlă albă. O evaluare imediată a pH-ului se efectuează utilizând scara colorată imprimată pe carcasă. Valoarea pH-ului pe scala de culoare este de 6,0 (sau mai puțin); 7,0; 8,0; 9.0.

Pregătirea urinei, pregătirea preparatelor din examinarea microscopică a sedimentelor de urină într-un mod aproximativ.

Examinarea microscopică a sedimentelor de urină se efectuează printr-o metodă aproximativă în analiza generală și calculul cantitativ al elementelor formate pentru o evaluare mai precisă a gradului de lukociturie și hematurie.

Reguli pentru prepararea sedimentului de urină pentru microscopie.

Prima probă de urină de dimineață este supusă examinării microscopice.

După amestecarea preliminară, se iau 10 ml de urină, centrifugată timp de 10 minute la 1500 rpm.

Apoi, tubul de centrifugă cu urină este răsturnat cu o mișcare ascuțită, lichidul supernatant este turnat rapid într-un borcan gol.

Se amestecă, se așează picătura pe o lamă de sticlă și se acoperă cu grijă cu o lamă de acoperire.

Dacă sedimentul este format din mai multe straturi, atunci se prepară un preparat, apoi se centrifugează din nou și preparatele se prepară separat din fiecare strat.

În absența unui sediment vizibil ochiului, o picătură de urină este aplicată pe o lamă de sticlă și microscopată.

La început, materialul este examinat la mărire mică (ocular 7-10, obiectiv 8), condensatorul este coborât, diafragma este ușor îngustată, apoi preparatul este examinat în detaliu la mărire mare (ocular 10.7; obiectiv 40).

14.Studiu cantitativ al sedimentelor de urină conform Nechiporenko.

Metoda este utilizată pentru procesele inflamatorii latente lent (pielonefrita, glomerulonefrita), piuria latentă. Pentru a studia procesul patologic în dinamică. Pentru a evalua eficacitatea tratamentului. Avantajele metodei: simplu din punct de vedere tehnic, nu necesită o cantitate mare de urină și durată. depozitarea acestuia, se utilizează în ambulatoriu. Obligaţie condiții: urină de dimineață, porție medie, soluție acidă (în alcaline poate exista o descompunere parțială a elementelor celulare). 1. Se amestecă urina 2. Se introduc 10 ml de urină într-un tub de măsurare pentru centrifugă și se centrifughează timp de 10 minute la 1500 rpm. 3. După centrifugă. aspiraţie Pipetați partea superioară a lichidului, lăsați-o. exact 1 ml de sediment. 4. Precipitatul este bine amestecat și umplut în camera Goryaev. 5. În 3-5 minute după umplere, începeți să numărați elementele formate. 6. Numărul de leucocite, Er, cilindri cu ocular 15, obiectivul 8 atunci când este omis. condensator, în 100 de pătrate mari ale camerei. Leucocitele, Er sunt numărate separat, cilindrii (numărând cel puțin 4 camere Goryaev) elimină mediul. arith. X = A x 0,25x 10 6 / l. Normă: adăpătoare. 2-4x 10 6 / l, Er până la 1 x 10 6 / l, cilindri până la 0,02 x 10 6 / l (unul pentru 4 camere). La copii: udă. până la 2-4x 10 6 / l, Er până la 0,75 x 10 6 / l, cilindri până la 0,02 x 10 6 / l.

15. Studiu de urină în conformitate cu Zimnitsky

Acest test stabilește capacitatea rinichilor de a se concentra. și diluați urina. Esența eșantionului în determinarea dinamică a densității relative și a cantității de urină în trei ore în porții în timpul zilei. Testare: după golirea vezicii urinare la ora 6 dimineața în toaletă, pacientul colectează urina în borcane separate la fiecare trei ore în timpul zilei. Doar 8 porții. Progresul cercetării: 1. Livrat. Urina este plasată în funcție de oră și cantitatea și densitatea relativă sunt determinate în fiecare porțiune. 2. Comparați cantitatea zilnică de urină și cantitatea de lichid băut pentru a determina. % din eliminarea sa. 3. Calculați diureza zi și noapte, adunați, obțineți diureza zilnică. 4. Setați gama de fluctuații a numărului și a relativei. densitatea urinei pe zi, adică care este diferența dintre cea mai mică porțiune și cea mai mare. Spectacol. probe la sănătate. persoane: 1. Ieșire zilnică de urină 800-1500 ml. 2. Producția de urină din timpul zilei prevalează în mod semnificativ față de noaptea. 3. Fluctuațiile volumului de urină în porțiuni individuale sunt semnificative (de la 50 la 400 ml). 4. Fluctuațiile în p de la 1,003 la 1,028 ar trebui să fie mai mari de 0,008. Cu funk. insuficiență renală: hipostenurie, hipoizostenurie, izostenurie, hiperstenenurie, oligurie, anurie, nocturie.

16. Descrierea proprietăților generale ale fecalelor.

În mod normal, fecalele constau din produse de secreție și excreție a tractului digestiv, resturi de nedigestie sau digestie parțială a produselor alimentare, floră microbiană. Cantitatea de fecale este de 100-150 g. Consistența este densă. Forma este cilindrică. Mirosul este fecale normale. Culoarea maro. P-tion - neutru, ușor alcalin sau ușor acid (pH 6,5-7,0-7,5). Mucusul este absent. Sângele lipsește. Resturile de alimente nedigerate sunt absente.

Instrucțiuni

Metode calitative pentru determinarea proteinelor în urină: Metoda Geller, test cu soluție de acid sulfosalicilic 20%, test de fierbere etc. Metode semicantitative: utilizarea benzilor de testare diagnostice pentru determinarea proteinelor urină, Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov. Metode cantitative: turbidimetric și colorimetric.

Determinarea proteinelor pe zi urină la o concentrație de 0,033 g / litru sau mai mult este o patologie. De regulă, în porțiunea de urină de dimineață, concentrația de proteine ​​nu depășește 0,002 g / l și în zilnic urină concentrația de proteine ​​nu depășește 50-150 mg de proteină.

Surse:

  • determinarea proteinelor în urină

Urina este un produs al metabolismului uman. Se formează prin filtrarea sângelui în rinichi, motiv pentru care compoziția urinei oferă o descriere clară a stării corpului uman.

Urina este o soluție complexă de peste 150 de compuși. Unele substanțe specifice, de exemplu, acetonă, acizi biliari, proteine, glucoză, pot fi prezente numai în anumite boli.

Pentru a controla sănătatea umană, în primul rând, este necesar să se determine cantitatea de urină. Norma este formarea a 1-1,8 litri de urină pe zi. Atunci când se eliberează mai mult de 2 litri de urină, acesta este un semn al unei posibile afectări a funcționării rinichilor, a diabetului zaharat și a unui număr de alte boli. Dacă se produc mai puțin de 0,5 litri de urină pe zi, există un blocaj al ureterului sau al vezicii urinare.

Culoarea urinei

Culoarea urinei excretate depinde de mulți factori, deci poate varia de la galben deschis la portocaliu. Prezența anumitor nuanțe poate fi afectată de unele produse alimentare, precum și de medicamentele luate de o persoană.

După administrarea medicamentelor, urina poate deveni colorată și roșiatică. Dacă o persoană se mișcă activ, în timp ce are o cantitate mare de transpirație, urina va avea o culoare galbenă intensă, precum și atunci când ia fonduri precum „Nitroxoline” sau „Biomycin”.

Dacă o persoană nu a luat alimente și medicamente colorante, dar culoarea urinei sale este diferită de cea obișnuită, se poate suspecta prezența unei boli în organism. De exemplu, în cazul bolilor hepatice, urina va fi de culoare galben închis sau de culoare verzuie.

Prezența sângelui în urina excretată indică în mod clar prezența unei pietre în sângerări renale sau în cazul în care se observă și durere.

Dacă urinarea este dificilă, aceasta poate indica un proces inflamator cauzat de o infecție în vezică. Dar urina murdară și tulbure indică o boală renală severă.

Proteine ​​în urină

În sângele unei persoane, nu există proteine ​​sau cantitatea sa este atât de mică încât nu poate fi determinată folosind teste de laborator. Dacă proteinele sunt detectate în urină, este necesar să se efectueze teste repetate, deoarece pot fi prezente atunci când o persoană se trezește dimineața, precum și după o muncă fizică grea sau stres la sportivi.

Este 100% imposibil să se determine vizual dacă proteina este prezentă sau nu în urină. Se poate ghici doar când există o cantitate mare de fulgi albicioși în urină.

Dacă proteinele sunt re-detectate în urină, aceasta indică prezența unui fel de boală renală. Procesele inflamatorii care apar în ele provoacă o ușoară creștere a cantității de proteine. Dacă mai mult de 2 grame sunt excretate în urină, acesta este un semnal alarmant.

Pielonefrita este o boală inflamatorie în care sunt afectate pelvisul renal, caliciul și parenchimul. În majoritatea cazurilor, cauza inflamației este o infecție bacteriană. Recuperarea completă este posibilă numai cu diagnosticul în timp util, prin urmare, atunci când apar simptome, este necesară o examinare amănunțită.