Détermination qualitative des protéines dans l'urine. Protéine urinaire (protéinurie). Détermination des protéines dans l'urine

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Une personne en bonne santé excrète 1,0 à 1,5 litre d'urine par jour. La teneur en protéines de 8 à 10 mg/dl est un phénomène physiologique. Le taux quotidien de protéines dans l'urine de 100 à 150 mg ne doit pas éveiller les soupçons. La globuline, la mucoprotéine et l'albumine constituent les protéines totales dans l'urine. Un écoulement important d'albumine indique une violation du processus de filtration dans les reins et est appelé protéinurie ou albuminurie.

Chaque substance dans l'urine se voit attribuer une norme «saine», et si l'indice protéique fluctue, cela peut indiquer une pathologie rénale.

Une analyse d'urine générale implique l'utilisation soit de la première portion (du matin), soit d'un échantillon quotidien. Ce dernier est préférable pour évaluer le niveau de protéinurie, car la teneur en protéines a des fluctuations quotidiennes prononcées. L'urine pendant la journée est collectée dans un récipient, le volume total est mesuré. Pour un laboratoire qui analyse l'urine pour les protéines, un échantillon standard (50 à 100 ml) de ce récipient est suffisant, le reste n'est pas nécessaire. Pour plus d'informations, un test Zimnitsky supplémentaire est effectué, qui montre si les indicateurs d'urine par jour sont normaux.

Méthodes de détermination des protéines dans l'urine
Voir	Sous-espèce			Particularités
qualité	Test de Geller			L'étude de l'urine pour la présence de protéines
	Test d'acide sulfosalicylique
	Analyse d'ébullition
quantitatif		Turbidimétrique	Les protéines de l'urine interagissent avec le réactif, entraînant une diminution de sa solubilité. Comme réactifs, les acides sulfosalicylique et trichloroacétique, le chlorure de benzéthonium sont utilisés.
		Colorimétrique	Avec certaines substances, la protéine de l'urine change de couleur. C'est la base de la réaction du biuret et de la méthode de Lowry. D'autres réactifs sont également utilisés - bleu brillant, rouge pyrogallol.
semi-quantitatif			Donner une idée relative de la quantité de protéines, le résultat est interprété par le changement de couleur de l'échantillon. Les méthodes semi-quantitatives comprennent les bandelettes réactives et la méthode Brandberg-Roberts-Stolnikov.

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Les protéines dans les urines sont normales chez un adulte et ne doivent pas dépasser 0,033 g / l. Dans ce cas, le taux journalier n'est pas supérieur à 0,05 g/l. Pour les femmes enceintes, la norme protéique dans l'urine quotidienne est supérieure à - 0,3 g / l., et dans l'urine du matin la même - 0,033 g / l. Les normes de protéines dans l'analyse générale de l'urine et chez les enfants diffèrent: 0,036 g / l pour la portion du matin et 0,06 g / l par jour. Le plus souvent, dans les laboratoires, l'analyse est effectuée par deux méthodes, qui montrent la quantité de fraction protéique dans l'urine. Les valeurs normatives ci-dessus sont valables pour l'analyse effectuée avec de l'acide sulfosalicylique. Si un colorant rouge pyrogallol a été utilisé, les valeurs différeront d'un facteur trois.

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• la filtration dans les glomérules rénaux va dans le mauvais sens ;
• l'absorption dans les tubules de la protéine est altérée;
• certaines maladies pèsent lourdement sur les reins - lorsque les protéines dans le sang sont élevées, les reins «n'ont tout simplement pas le temps» de les filtrer.

Les causes restantes sont considérées comme non rénales. C'est ainsi que se développe l'albuminurie fonctionnelle. La protéine dans le test d'urine apparaît avec des réactions allergiques, l'épilepsie, l'insuffisance cardiaque, la leucémie, l'empoisonnement, le myélome, la chimiothérapie et les maladies systémiques. Le plus souvent, c'est cet indicateur dans les analyses du patient qui sera le premier signal d'hypertension.

Une augmentation des protéines dans l'urine peut être due à des facteurs non pathologiques, des tests supplémentaires seront donc nécessaires.

Les méthodes quantitatives de détermination des protéines dans l'urine donnent des erreurs, il est donc recommandé d'effectuer plusieurs analyses, puis d'utiliser la formule pour calculer la valeur correcte. La teneur en protéines dans les urines est mesurée en g/l ou mg/l. Ces valeurs protéiques permettent de déterminer le niveau de protéinurie, suggérer une cause, évaluer le pronostic et décider d'une stratégie.

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Pour le bon fonctionnement de l'organisme, un échange constant entre le sang et les tissus est nécessaire. Cela n'est possible que s'il existe une certaine pression osmotique dans les vaisseaux sanguins. Les protéines du plasma sanguin maintiennent simplement un tel niveau de pression lorsque des substances de faible poids moléculaire passent facilement d'un environnement à forte concentration à un environnement à plus faible. La perte de molécules de protéines entraîne la libération de sang de son canal dans les tissus, ce qui entraîne un œdème sévère. C'est ainsi que se manifestent les protéinuries modérées et sévères.

Les stades initiaux de l'albuminurie sont asymptomatiques. Le patient ne prête attention qu'aux manifestations de la maladie sous-jacente, qui est la cause des protéines dans l'urine.

La protéinurie trace est appelée une augmentation du niveau de protéines dans l'urine due à l'utilisation de certains aliments.

L'urine à analyser est recueillie dans un récipient propre et sans graisse. Avant la collecte, la toilette du périnée est montrée, vous devez la laver avec du savon. Il est conseillé aux femmes de couvrir le vagin avec un morceau de coton ou un tampon afin que les pertes vaginales n'affectent pas le résultat. La veille, il vaut mieux ne pas boire d'alcool, d'eau minérale, de café épicé, salé et d'aliments qui donnent de la couleur aux urines (myrtilles, betteraves). Un effort physique intense, une marche prolongée, du stress, de la fièvre et de la transpiration, une consommation excessive d'aliments protéinés ou de médicaments avant d'uriner provoquent l'apparition de protéines dans l'urine d'une personne en parfaite santé. Ce phénomène tolérable est appelé protéinurie trace.

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Maladie rénale entraînant une perte de protéines :

• Amylose. Les cellules normales des reins sont remplacées par des amyloïdes (complexe protéine-saccharide), ce qui empêche l'organe de fonctionner normalement. Au stade protéinurique, les amyloïdes se déposent dans les tissus rénaux, détruisant le néphron et, par conséquent, le filtre rénal. C'est ainsi que les protéines passent du sang dans l'urine. Cette étape peut durer plus de 10 ans.
• néphropathie diabétique. En raison d'un mauvais métabolisme des glucides et des lipides, la destruction des vaisseaux sanguins, des glomérules et des tubules dans les reins se produit. La présence de protéines dans l'urine est le premier signe d'une complication prévisible du diabète.
• Maladies d'origine inflammatoire - néphrite. Le plus souvent, les lésions affectent les vaisseaux sanguins, les glomérules et les systèmes pelvicalyciens, perturbant le cours normal du système de filtration.
• La glomérulonéphrite dans la plupart des cas est de nature auto-immune. Le patient se plaint d'une diminution de la quantité d'urine, de maux de dos et d'une augmentation de la pression. Pour le traitement de la glomérulonéphrite, un régime alimentaire, un régime et un traitement médicamenteux sont recommandés.
• Pyélonéphrite. Dans la période aiguë, il s'ensuit des symptômes d'une infection bactérienne : frissons, nausées, maux de tête. Il s'agit d'une maladie infectieuse.
• Polykystose rénale.

Dans un corps sain, les molécules de protéines (et elles sont de taille assez importante) ne peuvent pas passer à travers le système de filtration des reins. Par conséquent, il ne devrait y avoir aucune protéine dans l'urine. Ce chiffre est le même pour les hommes et les femmes. Si l'analyse indique une protéinurie, il est important de consulter un médecin pour en connaître les raisons. Le spécialiste évaluera à quel point le niveau de protéines est élevé, s'il existe une pathologie concomitante, comment rétablir le fonctionnement normal du corps. Selon les statistiques, une femme a un risque plus élevé de développer une infection urinaire qu'un homme.

Principe de la méthode basé sur la coagulation des protéines dans l'urine en présence d'acide nitrique (ou d'acide sulfosalicylique à 20%).

Processus de travail: 1 à 2 gouttes d'acide nitrique (ou sulfosalicylique) sont ajoutées à 5 gouttes d'urine. S'il y a des protéines dans l'urine, une turbidité apparaît.

Table. Détection des composants pathologiques de l'urine .

Noter: en présence de glucose et de protéines dans l'urine testée, leur contenu quantitatif est déterminé.

Principe de la méthode : lorsque la protéine interagit avec le rouge de pyrogallol et le molybdate de sodium, il se forme un complexe coloré dont l'intensité de la couleur est proportionnelle à la concentration en protéine de l'échantillon.

Réactifs : Réactif de travail - solution de rouge de pyrogallol dans un tampon succinate, solution d'étalonnage des protéines à une concentration de 0,50 g/l

Processus de travail :

Mélanger les échantillons, maintenir pendant 10 minutes. à température ambiante (18 -25ºС). Mesurez la densité optique de l'échantillon expérimental (Dop) et de l'échantillon d'étalonnage (Dk) par rapport à l'échantillon de contrôle à λ = 598 (578-610) nm. La couleur est stable pendant 1 heure.

Calcul: concentration de protéines dans l'urine (С) g/l à calculer par la formule :

С= Dop/Dk×0.50

où: Dop \u003d Dk \u003d C \u003d g / l.

Valeurs normales : jusqu'à 0,094 g/l, (0,141 g/jour)

Conclusion:

Principe de la méthode : Lorsque le D-glucose est oxydé par l'oxygène atmosphérique sous l'action de la glucose oxydase, il se forme une quantité équimolaire de peroxyde d'hydrogène. Sous l'action de la peroxydase, le peroxyde d'hydrogène oxyde les substrats chromogéniques (un mélange de phénol et de 4 aminoantipyrine - 4AAP) avec formation d'un produit coloré. L'intensité de la couleur est proportionnelle à la teneur en glucose.

glucose oxydase

Glucose + O2 + H2O gluconolactone + H2O2

peroxydase

2H2O2 + phénol + composé coloré 4AAP + 4H2O

Processus de travail: ajouter 1 ml de solution de travail et 0,5 ml de tampon phosphate dans deux tubes à essai. 0,02 ml d'urine est ajouté dans le premier tube, 0,02 ml du calibrateur (calibrage, solution de glucose standard, 10 mmol/l) est ajouté dans le second tube. Les échantillons sont mélangés, maintenus pendant 15 minutes à une température de 370C dans un thermostat, et la densité optique des échantillons expérimentaux (Dop) et d'étalonnage (Dc) est mesurée par rapport au réactif de travail à une longueur d'onde de 500-546 nm.

Calcul : С = Dop/Dk  10 mmol/l Dop= Dk =

Conclusion:

Noter. Si la teneur en sucre dans l'urine est supérieure à 1%, elle doit être diluée.

Actuellement, les laboratoires biochimiques utilisent une méthode express unifiée pour tester l'urine pour le glucose en utilisant du papier réactif pour le glucose Glucotest ou en utilisant des bandelettes de test combinées pour le pH, les protéines, le glucose, les corps cétoniques et le sang. Les bandelettes de test sont abaissées dans un récipient contenant de l'urine pendant 1 seconde. et comparer l'échelle de couleurs.

Détermination des protéines à l'aide d'un indicateur au rouge pyrogallol

Le principe de la méthode repose sur la mesure photométrique de la densité optique d'une solution d'un complexe coloré formé par l'interaction de molécules protéiques avec des molécules du complexe colorant Pyrogallol Rouge-Molybdate en milieu acide. L'intensité de la couleur de la solution est proportionnelle à la teneur en protéines du matériau d'essai. La présence de détergents dans le réactif permet un dosage équivalent de protéines de nature et de structure différentes.

Réactifs. 1) Solution à 1,5 mmol/l de rouge de pyrogallol (PGD) : 60 mg de PGA sont dissous dans 100 ml de méthanol. Conserver à une température de 0 à 5 °C ; 2) Tampon succinate 50 mmol/l pH 2,5 : 5,9 g d'acide succinique (HOOC-CH2-CH2-COOH) ; 0,14 g d'oxalate de sodium (Na2C2O4) et 0,5 g de benzoate de sodium (C6H5COONa) sont dissous dans 900 ml d'eau distillée ; 3) Solution à 10 mmol/l de cristal de molybdate de sodium hydraté (Na2MoO4 × 2H2O) : 240 mg de molybdate de sodium sont dissous dans 100 ml d'eau distillée ; 4) Réactif de travail : 40 ml de solution PGA et 4 ml de solution de molybdate de sodium sont ajoutés à 900 ml de solution tampon succinate. Le pH de la solution est ajusté à 2,5 avec une solution d'acide chlorhydrique (HCl) 0,1 mol/l et le volume est ajusté à 1 litre. Le réactif sous cette forme est prêt à l'emploi et est stable lorsqu'il est conservé à l'abri de la lumière et à une température de 2 à 25 °C pendant 6 mois ; 5) Solution étalon d'albumine à 0,5 g/l.

Progression de la définition. 0,05 ml de l'urine à tester est ajouté au premier tube, 0,05 ml de la solution étalon d'albumine est ajouté au deuxième tube et 0,05 ml d'eau distillée est ajouté au troisième tube (échantillon témoin), puis 3 ml de la solution de travail réactif sont ajoutés à ces tubes. Le contenu des tubes est mélangé et après 10 minutes l'échantillon et l'étalon sont photométrés contre l'échantillon témoin à une longueur d'onde de 596 nm dans une cuvette avec une longueur de trajet optique de 10 mm.

Le calcul de la concentration en protéines dans l'échantillon d'urine à tester est effectué selon la formule :

où C est la concentration de protéines dans l'échantillon d'urine à tester, g/l ; Apr et Ast - extinction de l'échantillon d'urine étudié et de la solution étalon d'albumine, g/l ; 0,5 - concentration de la solution étalon d'albumine, g/l.

Remarques:

• la couleur de la solution (complexe coloré) est stable pendant une heure ;
• la relation directement proportionnelle entre la concentration en protéines dans l'échantillon à tester et l'absorbance de la solution dépend du type de photomètre ;
• lorsque la teneur en protéines dans l'urine est supérieure à 3 g/l, l'échantillon est dilué avec une solution isotonique de chlorure de sodium (9 g/l) et le dosage est répété. Le degré de dilution est pris en compte lors de la détermination de la concentration en protéines.

Voir également:

• Détermination des protéines dans l'urine
• Test standardisé avec l'acide sulfosalicylique
• Méthode Brandberg – Roberts – Stolnikov unifiée
• Détermination de la quantité de protéines dans l'urine par réaction avec l'acide sulfosalicylique
• Méthode Biuret
• Détection de la protéine Bence-Jones dans l'urine

La protéinurie est un phénomène dans lequel les protéines sont déterminées dans l'urine, ce qui indique la possibilité de dommages aux reins, sert de facteur dans le développement de maladies du cœur, du sang et des vaisseaux lymphatiques.

La détection de protéines dans l'urine n'indique pas toujours une maladie. Un phénomène similaire est typique même pour les personnes en parfaite santé, dans l'urine desquelles la protéine peut être déterminée. L'hypothermie, l'activité physique, l'utilisation d'aliments protéinés entraînent l'apparition de protéines dans les urines, qui disparaissent sans aucun traitement.

Lors du dépistage, des protéines sont détectées chez 17% des personnes apparemment en bonne santé, mais seulement 2% de ce nombre de personnes un résultat de test positif est un signe de maladie rénale.

Les molécules de protéines ne doivent pas pénétrer dans le sang. Ils sont vitaux pour le corps - ils sont le matériau de construction des cellules, participent aux réactions en tant que coenzymes, hormones, anticorps. Chez les hommes et les femmes, la norme est l'absence totale de protéines dans l'urine.

La fonction d'empêcher le corps de perdre des molécules de protéines est assurée par les reins.

Il existe deux systèmes de reins qui filtrent l'urine :

1. glomérules rénaux - ne laissent pas passer les grosses molécules, mais ne retiennent pas les albumines, les globulines - une petite fraction de molécules de protéines;
2. tubules rénaux - adsorbent les protéines filtrées par les glomérules, retournent dans le système circulatoire.

Les albumines (environ 49%), les mucoprotéines, les globulines se retrouvent dans les urines, dont les immunoglobulines représentent environ 20%.

Les globulines sont des protéines de lactosérum de haut poids moléculaire qui sont produites par le système immunitaire et le foie. La plupart d'entre eux sont synthétisés par le système immunitaire, se réfèrent aux immunoglobulines ou aux anticorps.

Les albumines sont la fraction des protéines qui sont les premières à apparaître dans l'urine déjà avec des lésions rénales mineures. Une certaine quantité d'albumine se trouve également dans l'urine saine, mais elle est si insignifiante qu'elle n'est pas détectée par les diagnostics de laboratoire.

Le seuil inférieur, qui peut être détecté à l'aide de diagnostics de laboratoire, est de 0,033 g / l. Si plus de 150 mg de protéines sont perdues par jour, on parle alors de protéinurie.

Principaux faits sur les protéines dans l'urine

La maladie avec un léger degré de protéinurie est asymptomatique. Visuellement, l'urine qui ne contient pas de protéines ne peut pas être distinguée de l'urine qui contient une petite quantité de protéines. L'urine un peu mousseuse devient déjà avec un degré élevé de protéinurie.

Il est possible de supposer une excrétion active de protéines dans l'urine par l'apparition du patient uniquement avec un degré modéré ou sévère de la maladie par l'apparition d'un œdème des extrémités, du visage et de l'abdomen.

Aux premiers stades de la maladie, les signes indirects de protéinurie peuvent être des symptômes :

• changements dans la couleur de l'urine;
• faiblesse croissante;
• manque d'appétit;
• nausées Vomissements;
• douleur osseuse;
• somnolence, vertiges;
• température élevée.

L'apparition de tels signes ne doit pas être ignorée, en particulier pendant la grossesse. Cela peut signifier un léger écart par rapport à la norme et peut être un symptôme de développement de la prééclampsie, de la prééclampsie.

La quantification de la perte de protéines n'est pas une tâche facile ; plusieurs tests de laboratoire sont utilisés pour obtenir une image plus complète de l'état du patient.

Les difficultés de choix d'une méthode de détection d'un excès de protéines dans les urines s'expliquent par :

• faible concentration en protéines, pour la reconnaissance de laquelle des instruments de haute précision sont nécessaires;
• la composition de l'urine, ce qui complique la tâche, car elle contient des substances qui faussent le résultat.

La plus grande information peut être obtenue à partir de l'analyse de la première portion d'urine du matin, qui est recueillie après le réveil.

A la veille de l'analyse, les conditions suivantes doivent être respectées:

• n'utilisez pas d'aliments épicés, frits, protéinés, d'alcool;
• éviter de prendre des diurétiques pendant 48 heures ;
• limiter l'activité physique;
• respecter scrupuleusement les règles d'hygiène personnelle.

L'urine du matin est la plus informative, car elle reste longtemps dans la vessie et, dans une moindre mesure, dépend de l'apport alimentaire.

Il est possible d'analyser la quantité de protéines dans l'urine par une portion aléatoire, qui est prise à tout moment, mais une telle analyse est moins informative et la probabilité d'erreur est plus élevée.

Pour quantifier la perte quotidienne de protéines, une analyse de l'urine quotidienne totale est effectuée. Pour ce faire, dans les 24 heures, toute l'urine excrétée pendant la journée est collectée dans un récipient en plastique spécial. Vous pouvez commencer à collecter à tout moment. La condition principale est exactement un jour de collecte.

La définition qualitative de la protéinurie repose sur la propriété de la protéine à se dénaturer sous l'influence de facteurs physiques ou chimiques. Les méthodes qualitatives sont des méthodes de dépistage qui permettent de déterminer la présence de protéines dans les urines, mais ne permettent pas d'évaluer précisément le degré de protéinurie.

Échantillons utilisés :

• avec ébullition;
• acide sulfosalicylique;
• l'acide nitrique, le réactif de Larionova avec le test de l'anneau Heller.

Un test avec de l'acide sulfosalicylique est effectué en comparant un échantillon d'urine témoin avec un échantillon expérimental, dans lequel 7 à 8 gouttes d'acide sulfosalicylique à 20% sont ajoutées à l'urine. La conclusion sur la présence de la protéine est faite par l'intensité de la turbidité opalescente qui apparaît dans le tube à essai pendant la réaction.

Le plus souvent, le test de Geller est utilisé avec de l'acide nitrique à 50 %. La sensibilité de la méthode est de 0,033 g/l. A cette concentration de protéine dans un tube à essai avec un échantillon d'urine et un réactif, 2-3 minutes après le début de l'expérience, un anneau filiforme blanc apparaît, dont la formation indique la présence de la protéine.

Test de Geller

Les méthodes semi-quantitatives comprennent :

• méthode de détermination des protéines dans l'urine avec des bandelettes réactives ;
• Méthode de Brandberg-Roberts-Stolnikov.

La méthode de détermination de Brandberg-Roberts-Stolnikov est basée sur la méthode de l'anneau de Geller, mais permet une évaluation plus précise de la quantité de protéines. Lors de la réalisation d'un test selon cette méthode, plusieurs dilutions d'urine permettent d'obtenir l'apparition d'un anneau protéique filamenteux dans l'intervalle de temps compris entre 2 et 3 minutes à compter du début du test.

En pratique, la méthode des bandelettes de test avec colorant bleu de bromophénol appliqué comme indicateur est utilisée. L'inconvénient des bandelettes de test est la sensibilité sélective à l'albumine, ce qui entraîne une distorsion du résultat en cas d'augmentation de la concentration de globulines ou d'autres protéines dans l'urine.

Les inconvénients de la méthode comprennent également la sensibilité relativement faible du test aux protéines. Les bandelettes de test commencent à réagir à la présence de protéines dans les urines à une concentration en protéines supérieure à 0,15 g/l.

Les méthodes de quantification peuvent être conditionnellement divisées en :

1. turbidimétrique;
2. colorimétrique.

Les méthodes sont basées sur la propriété des protéines de réduire la solubilité sous l'action d'un agent liant avec la formation d'un composé peu soluble.

Les agents de liaison aux protéines peuvent être :

• acide sulfosalicylique;
• acide trichloroacetic;
• chlorure de benzéthonium.

Les résultats des tests sont conclus sur la base du degré d'atténuation du flux lumineux dans l'échantillon de suspension par rapport au témoin. Les résultats de cette méthode ne peuvent pas toujours être attribués à la fiabilité en raison des différences dans les conditions de réalisation : vitesse de mélange des réactifs, température, acidité du milieu.

Influencer l'évaluation de la prise de médicaments la veille, avant d'effectuer des tests à l'aide de ces méthodes, vous ne pouvez pas prendre :

• antibiotiques;
• les sulfamides;
• préparations iodées.

La méthode est abordable, ce qui lui permet d'être largement utilisée pour le dépistage. Mais des résultats plus précis peuvent être obtenus en utilisant des techniques colorimétriques plus coûteuses.

Les techniques colorimétriques font partie des méthodes sensibles pour déterminer avec précision la concentration de protéines dans l'urine.

Pour ce faire avec une grande précision, permettez:

• réaction biuret;
• technique de Lowry;
• techniques de coloration qui utilisent des colorants qui forment des complexes avec des protéines d'urine qui diffèrent visuellement de l'échantillon.

Méthodes colorimétriques pour détecter les protéines dans l'urine

La méthode est fiable, très sensible, permettant la détermination de l'albumine, des globulines, des paraprotéines dans l'urine. Il est utilisé comme principal moyen de clarifier les résultats des tests controversés, ainsi que les protéines quotidiennes dans l'urine chez les patients des services de néphrologie des hôpitaux.

Des résultats encore plus précis peuvent être obtenus par la méthode de Lowry, basée sur la réaction du biuret, ainsi que sur la réaction de Folin, qui reconnaît le tryptophane et la tyrosine dans les molécules de protéines.

Pour éliminer d'éventuelles erreurs, l'échantillon d'urine est purifié par dialyse à partir d'acides aminés, l'acide urique. Des erreurs sont possibles lors de l'utilisation de salicylates, de tétracyclines, de chlorpromazine.

La façon la plus précise de déterminer une protéine est basée sur sa capacité à se lier aux colorants, dont on utilise :

• ponceau;
• coumasi bleu brillant;
• rouge pyrogalle.

Au cours de la journée, la quantité de protéines excrétées dans l'urine change. Afin d'évaluer plus objectivement la perte de protéines dans les urines, le concept de protéines quotidiennes dans les urines est introduit. Cette valeur est mesurée en g/jour.

Pour une évaluation rapide des protéines quotidiennes dans l'urine, la quantité de protéines et de créatinine est déterminée dans une seule portion d'urine, puis le rapport protéines/créatinine est utilisé pour tirer une conclusion sur la perte de protéines par jour.

La méthode est basée sur le fait que le taux d'excrétion de la créatinine dans l'urine est une valeur constante, ne change pas au cours de la journée. Chez une personne en bonne santé, le rapport protéine/créatinine normal dans l'urine est de 0,2.

Cette méthode élimine les erreurs possibles qui peuvent survenir lors de la collecte de l'urine quotidienne.

Les échantillons qualitatifs sont plus susceptibles que les tests quantitatifs de donner des résultats faux positifs ou faux négatifs. Des erreurs se produisent dans le cadre de la prise de médicaments, des habitudes alimentaires, de l'activité physique à la veille du test.

L'interprétation de ce test qualitatif est donnée par l'appréciation visuelle de la turbidité dans le tube à essai en comparaison du résultat du test avec le contrôle :

1. une réaction faiblement positive est estimée comme + ;
2. positif ++ ;
3. fortement positif +++.

Le test de l'anneau Heller est plus précis pour évaluer la présence de protéines dans l'urine, mais ne quantifie pas les protéines dans l'urine. Comme le test à l'acide sulfosalicylique, le test Heller ne donne qu'une idée approximative de la quantité de protéines dans les urines.

La méthode permet de quantifier le degré de protéinurie, mais elle est trop laborieuse, imprécise, car avec une forte dilution, la précision de l'évaluation diminue.

Pour calculer la protéine, il faut multiplier le degré de dilution de l'urine par 0,033 g/l :

1	1	1: 2	0,066
1	2	1: 3	0,099
1	3	1: 4	0,132
1	4	1: 5	0,165
1	5	1: 6	0,198
1	6	1: 7	0,231
1	7	1: 8	0,264
1	8	1: 9	0,297
1	9	1: 10	0,33

Le test ne nécessite pas de conditions particulières, cette procédure est facile à faire à la maison. Pour ce faire, vous devez abaisser la bandelette de test dans l'urine pendant 2 minutes.

Les résultats seront exprimés par le nombre de plus sur la bande, dont le décodage est contenu dans le tableau:

1. Les résultats des tests correspondant à des valeurs allant jusqu'à 30 mg/100 ml sont compatibles avec une protéinurie physiologique.
2. Les valeurs de bandelette de test de 1+ et 2++ indiquent une protéinurie importante.
3. Les valeurs 3+++, 4++++ sont observées dans la protéinurie pathologique causée par une maladie rénale.

Les bandelettes de test ne peuvent déterminer qu'approximativement l'augmentation des protéines dans l'urine. Ils ne sont pas utilisés pour un diagnostic précis, et plus encore, ils ne peuvent pas dire ce que cela signifie.

Ne laissez pas les bandelettes de test évaluer correctement la quantité de protéines dans l'urine des femmes enceintes. Une méthode d'évaluation plus fiable est la détermination des protéines dans l'urine quotidienne.

Détermination des protéines dans l'urine à l'aide d'une bandelette de test :

La protéine quotidienne dans l'urine sert de diagnostic plus précis de l'évaluation de l'état fonctionnel des reins. Pour ce faire, vous devez collecter toute l'urine excrétée par les reins chaque jour.

Les valeurs acceptables pour le rapport protéines / créatinine sont les données indiquées dans le tableau:

Si vous perdez plus de 3,5 g de protéines par jour, on parle de protéinurie massive.

S'il y a beaucoup de protéines dans les urines, un deuxième examen est requis après 1 mois, puis après 3 mois, selon les résultats desquels il est établi pourquoi la norme est dépassée.

Les causes de l'augmentation des protéines dans l'urine sont sa production accrue dans le corps et la perturbation des reins, on distingue la protéinurie :

• physiologique - les écarts mineurs par rapport à la norme sont causés par des processus physiologiques, sont résolus spontanément;
• pathologique - les changements sont causés à la suite d'un processus pathologique dans les reins ou d'autres organes du corps, progressent sans traitement.

Une légère augmentation des protéines peut être observée avec une nutrition protéique abondante, des brûlures mécaniques, des blessures, accompagnées d'une augmentation de la production d'immunoglobulines.

Un léger degré de protéinurie peut être causé par l'activité physique, le stress psycho-émotionnel et la prise de certains médicaments.

La protéinurie physiologique fait référence à une augmentation des protéines dans l'urine chez les enfants dans les premiers jours après la naissance. Mais déjà après une semaine de vie, la teneur en protéines de l'urine d'un enfant est considérée comme un écart par rapport à la norme et indique une pathologie en développement.

Les maladies rénales, les maladies infectieuses s'accompagnent aussi parfois de l'apparition de protéines dans les urines.

De telles conditions correspondent généralement à un léger degré de protéinurie, sont des phénomènes transitoires, disparaissent rapidement d'elles-mêmes, sans nécessiter de traitement particulier.

Affections plus sévères, une protéinurie sévère est notée en cas de :

• glomérulonéphrite;
• Diabète
• cardiopathie;
• cancer de la vessie;
• le myélome multiple;
• infection, lésion d'origine médicamenteuse, maladie polykystique des reins ;
• hypertension artérielle;
• le lupus érythémateux disséminé;
• Syndrome de Goodpasture.

Obstruction intestinale, insuffisance cardiaque, hyperthyroïdie peuvent entraîner des traces de protéines dans les urines.

Les variétés de protéinurie sont classées de plusieurs manières. Pour une évaluation qualitative des protéines, vous pouvez utiliser la classification Yaroshevsky.

Selon la systématique de Yaroshevsky, créée en 1971, on distingue la protéinurie :

1. rénal - qui comprend une violation de la filtration glomérulaire, la libération de protéines tubulaires, une résorption insuffisante des protéines dans les tubules;
2. prérénal - se produit en dehors des reins, excrétion d'hémoglobine, protéines qui se produisent en excès dans le sang à la suite d'un myélome multiple;
3. postrénal - se produit dans la région des voies urinaires après les reins, l'excrétion de protéines lors de la destruction des organes urinaires.

Pour quantifier ce qui se passe, le degré de protéinurie est conditionnellement isolé. Il faut se rappeler qu'ils peuvent facilement s'aggraver sans traitement.

Le stade le plus sévère de la protéinurie se développe lorsque plus de 3 g de protéines sont perdues par jour. Une perte de protéines de 30 mg à 300 mg par jour correspond à un stade modéré ou microalbumnurie. Jusqu'à 30 mg de protéines dans l'urine quotidienne signifient un léger degré de protéinurie.

Combien de protéines dans les urines ?

1. Normalement, il n'y a pratiquement pas de protéines dans les urines (moins de 0,002 g/l). Cependant, dans certaines conditions, une petite quantité de protéines peut apparaître dans l'urine d'individus en bonne santé après avoir pris une grande quantité d'aliments protéinés, à la suite d'un refroidissement, d'un stress émotionnel, d'une activité physique prolongée (appelée protéinurie en marche).

   L'apparition d'une quantité importante de protéines dans les urines (protéinurie) est une pathologie. La protéinurie peut être causée par des maladies des reins (glomérulonéphrite aiguë et chronique, pyélonéphrite, néphropathie de la grossesse, etc.) ou des voies urinaires (inflammation de la vessie, de la prostate, des uretères). La protéinurie rénale peut être organique (glomérulaire, tubulaire et excessive) et fonctionnelle (protéinurie fébrile, orthostatique chez l'adolescent, avec suralimentation du nourrisson, chez le nouveau-né). La protéinurie fonctionnelle n'est pas associée à une pathologie rénale. La quantité quotidienne de protéines varie chez les patients de 0,1 à 3,0 g ou plus. La composition des protéines urinaires est déterminée par électrophorèse. L'apparition de la protéine de Bence-Jones dans les urines est caractéristique du myélome multiple et de la macroglobulinémie de Waldenström, #223;2 microglobuline en cas d'atteinte des tubules rénaux.

2. Normalement, il n'y a pratiquement pas de protéines dans les urines (moins de 0,002 g/l).
3. Les principaux signes de maladie détectés dans l'étude de l'urine.

   SG Gravité spécifique. Une diminution de la gravité spécifique indique une diminution de la capacité des reins à concentrer l'urine et à éliminer les toxines du corps, ce qui se produit en cas d'insuffisance rénale. L'augmentation de la gravité spécifique est associée à une grande quantité de sucre et de sels dans l'urine. Il convient de noter qu'il est impossible d'estimer la gravité spécifique par une seule analyse d'urine, il peut y avoir des changements aléatoires, il est nécessaire de répéter l'analyse d'urine 1 à 2 fois.

   Protéine Protéine dans l'urine - protéinurie. La cause de la protéinurie peut être des dommages aux reins eux-mêmes avec une néphrite, une amylose, des dommages causés par des poisons. Des protéines dans l'urine peuvent également apparaître en raison de maladies des voies urinaires (pyélonéphrite, cystite, prostatite).

   Glucose Le glucose (sucre) dans l'urine - glucosurie - est le plus souvent causé par le diabète. Une cause plus rare est une atteinte des tubules rénaux. C'est très alarmant si les corps cétoniques sont déterminés avec le sucre dans l'urine. Cela se produit dans le diabète sucré sévère et mal régulé et est un signe avant-coureur de la complication la plus grave du diabète - le coma diabétique.

   Bilirubine, urobilinogène La bilirubine et l'urobiline sont déterminées dans l'urine dans diverses formes d'ictère.

   Érythrocytes Érythrocytes dans l'urine - hématurie. Cela se produit soit avec des dommages aux reins eux-mêmes, le plus souvent avec leur inflammation, soit chez des patients atteints de maladies des voies urinaires. Si, par exemple, une pierre se déplace le long d'eux, cela peut blesser la membrane muqueuse, il y aura des globules rouges dans l'urine. Une tumeur rénale en décomposition peut également entraîner une hématurie.

   Leucocytes Leucocytes dans l'urine - leucocyturie, le plus souvent une conséquence de modifications inflammatoires des voies urinaires chez les patients atteints de pyélonéphrite, de cystite. Les leucocytes sont souvent déterminés avec une inflammation des organes génitaux externes féminins, chez les hommes - avec une inflammation de la prostate.

   Les cylindres Les cylindres sont des formations microscopiques particulières. Les cylindres hyalins en quantité de 1-2 peuvent être chez une personne en bonne santé. Ils se forment dans les tubules rénaux, ce sont des particules de protéines collées entre elles. Mais une augmentation de leur nombre, des cylindres d'autres types (granulaires, érythrocytaires, gras) indiquent toujours des dommages au tissu rénal lui-même. Il existe des cylindres dans les maladies inflammatoires des reins, les lésions métaboliques, par exemple le diabète sucré.

   Informativité de la méthode et ses limites. Le caractère informatif d'un test d'urine général pour reconnaître des maladies rénales spécifiques est faible ; des études supplémentaires plus précises sont généralement nécessaires. Mais cette étude est très importante, surtout lors de la réalisation d'études préventives, car elle permet d'identifier les premiers signes de maladie rénale. On sait également que les maladies rénales sont souvent cachées et que seul un test d'urine permet de les suspecter et d'effectuer les examens complémentaires nécessaires.

4. Dans la plupart des laboratoires, lorsqu'ils testent l'urine pour les protéines, ils utilisent d'abord des réactions qualitatives qui ne détectent pas les protéines dans l'urine d'une personne en bonne santé. Si la protéine dans l'urine est détectée par des réactions qualitatives, une détermination quantitative (ou semi-quantitative) est effectuée. Dans le même temps, les caractéristiques des méthodes utilisées, couvrant un spectre différent d'uroprotéines, sont importantes. Ainsi, lors de la détermination des protéines à l'aide d'acide sulfosalicylique à 3%, la quantité de protéines jusqu'à 0,03 g/l est considérée comme normale, tandis qu'en utilisant la méthode au pyrogallol, la limite des valeurs de protéines normales s'élève à 0,1 g/l. A cet égard, la fiche d'analyse doit indiquer la valeur normale de la protéine pour la méthode utilisée par le laboratoire.

   Lors de la détermination des quantités minimales de protéines, il est recommandé de répéter l'analyse ; dans les cas douteux, la perte quotidienne de protéines dans l'urine doit être déterminée. L'urine quotidienne normale contient des protéines en petites quantités. Dans des conditions physiologiques, la protéine filtrée est presque entièrement réabsorbée par l'épithélium des tubules proximaux et sa teneur dans la quantité quotidienne d'urine varie selon différents auteurs de traces à 20-50, 80-100 mg et même jusqu'à 150-200 mg. Certains auteurs pensent que l'excrétion quotidienne de protéines à raison de 30 à 50 mg/jour est la norme physiologique pour un adulte. D'autres suggèrent que l'excrétion urinaire de protéines ne doit pas dépasser 60 mg/m2 de surface corporelle par jour, sauf au cours du premier mois de vie, lorsque la protéinurie physiologique peut être quatre fois supérieure à la valeur indiquée.

   La condition générale pour l'apparition de protéines dans l'urine d'une personne en bonne santé est leur concentration suffisamment élevée dans le sang et un poids moléculaire ne dépassant pas 100-200 kDa.

5. ce n'est pas la norme, avec votre diagnostic c'est possible, une autre chose est que pour le syndrome néphrotique c'est en fait un petit indicateur .. regardez à la clinique - gonflement, pression, etc. continuez à prendre le traitement prescrit ..
6. et pourtant je dirai : ça ne devrait PAS être normal !

Indicateurs normaux : la protéine se trouve normalement dans l'urine en quantités minimes qui ne sont pas détectées par les réactions qualitatives conventionnelles. La limite supérieure de la norme de protéines dans l'urine est de 0,033 g / l. Si la teneur en protéines est supérieure à cette valeur, les tests qualitatifs pour les protéines deviennent positifs.

Signification clinique de la définition :

L'apparition de protéines dans l'urine est appelée protéinurie. La protéinurie peut être fausse et rénale. La protéinurie extrarénale peut être en présence d'impuretés d'origine protéique provenant des organes génitaux (vaginite, urétrite, etc.), alors que la quantité de protéines est insignifiante - jusqu'à 0,01 g / l. La protéinurie rénale peut être fonctionnelle (avec hypothermie, effort physique, fièvre) et organique - avec glomérulonéphrite, pyélonéphrite, néphrite, néphrose, insuffisance rénale. Avec la protéinurie rénale, la teneur en protéines peut aller de 0,033 à 10 - 15 g / l, parfois plus.

définition de la qualité.

Principe de la méthode: basé sur le fait que la protéine sous l'action d'acides inorganiques coagule (devient visible). Le degré de turbidité dépend de la quantité de protéines.

Détection de protéines dans l'urine avec de l'acide sulfosalicylique à 20 %.

Réactifs : solution à 20 % d'acide sulfosalicylique. Equipement : fond sombre.

Avancement de la recherche :

2. Verser 2 ml d'urine préparée dans 2 éprouvettes de même diamètre. 1 tube - contrôle, 2 - expérience. Ajouter 4 gouttes d'acide sulfosalicylique à 20 % dans le tube à essai.

3. Le résultat est noté sur un fond sombre.

4. En présence de protéines, l'urine dans le tube à essai devient trouble.

Détermination qualitative des protéines dans le test d'urine - bandelettes.

Pour détecter la protéinurie, différents monotests sont utilisés - bandelettes : Albufan, Albustiks, Biofan E et polytests : Triscan, Nonafan, etc.

Quantification.

Détection des protéines dans l'urine par la méthode Roberts-Stolnikov.

Principe de la méthode: basé sur le fait que la protéine sous l'action d'acides inorganiques coagule (devient visible). Le degré de turbidité dépend de la quantité de protéines (c'est-à-dire le test de l'anneau de Heller). À une concentration de protéines dans l'urine de 0,033 g/l, un mince anneau blanc filamenteux apparaît au bout de 3 minutes après la stratification de l'urine.

Réactifs: solution d'acide nitrique à 50 % ou réactif de Roberts (98 parties de solution saturée de chlorure de sodium et 2 parties d'acide chlorhydrique concentré) ou réactif de Larionova (98 parties de solution saturée de chlorure de sodium et 2 parties d'acide nitrique concentré).

Equipement : fond sombre.

Avancement de la recherche :

1. Exigences pour l'urine : l'urine doit avoir un pH acide (ou légèrement acide), doit être transparente, car cette urine est centrifugée. L'urine alcaline est acidifiée pour une réaction légèrement acide du milieu, en utilisant du papier indicateur pour le contrôle.

2. Versez 2 ml de solution d'acide nitrique à 50 % ou l'un des réactifs dans le tube à essai, puis couchez soigneusement le même volume d'urine préparée le long de la paroi du tube à essai avec une pipette.

3. L'échantillon est laissé pendant 3 minutes

4. Après 3 minutes, rapportez le résultat. Le résultat est noté sur un fond sombre en lumière transmise. Si l'anneau est large, compact, l'urine est diluée avec de l'eau distillée et à nouveau déposée sur le réactif.

5. L'urine est diluée jusqu'à ce qu'un fin anneau filiforme se forme après 3 minutes.

C \u003d 0,033 g / l x le degré de dilution.

Pour la clinique, la détermination qualitative et quantitative des protéines dans l'urine est importante.

Tests qualitatifs pour la détermination des protéines dans l'urine
Plus de 100 réactions pour la détermination qualitative des protéines dans l'urine ont été proposées. La plupart d'entre eux sont basés sur la précipitation des protéines par des moyens physiques (chauffage) ou chimiques. La présence de protéines est prouvée par l'apparition d'un trouble.

Les échantillons secs colorimétriques sont également intéressants.

Seuls les exemples les plus importants pour la pratique seront décrits ci-dessous.

Échantillon avec acide sulfosalicylique. À plusieurs millilitres d'urine, ajoutez 2 à 4 gouttes d'une solution à 20 % d'acide sulfosalicylique. Avec une réaction positive, la turbidité apparaît. Le résultat est désigné par les termes : opalescence, réaction faiblement positive, positive ou fortement positive. Le test de l'acide sulfosalicylique est l'un des tests les plus sensibles pour déterminer les protéines dans l'urine. Il détecte même les augmentations pathologiques les plus insignifiantes des protéines dans l'urine. Grâce à une technique simple, ce test a trouvé une large application.

Test aseptol. L'aseptol est un substitut de l'acide sulfosalicylique. Il peut être préparé à partir de matériaux disponibles dans n'importe quel laboratoire (phénol et acide sulfurique). Une solution à 20% d'aseptol est utilisée comme réactif. Le test est effectué comme suit: dans un tube à essai contenant 2-3 ml d'urine, ajoutez 0,5-1 ml de solution d'aseptol au fond. Si un anneau blanc de protéine coagulée se forme à l'interface entre les deux fluides, le test est positif.

Test de Geller. Sous quelques millilitres d'urine, ajouter 1-2 ml d'acide nitrique à 30% (sp. poids 1,20). Si un anneau blanc apparaît à l'interface des deux liquides, l'échantillon est positif. La réaction devient positive si la protéine est supérieure à 3,3 mg%. Parfois, un anneau blanc est obtenu en présence de grandes quantités d'urates. Contrairement à l'anneau protéique, l'anneau urique n'apparaît pas à la frontière entre les deux fluides, mais un peu plus haut. Larionova suggère qu'au lieu d'acide nitrique à 30%, utilisez comme réactif une solution à 1% d'acide nitrique dans une solution saturée de sel commun; cela donne une grande économie d'acide nitrique.

Test avec du potassium ferrugineux et de l'acide acétique. Cette réaction permet de distinguer les protéines sériques des nucléoalbumines.

Des quantités égales d'urine sont versées dans deux tubes à essai. Quelques gouttes d'une solution d'acide acétique à 30% sont ajoutées à l'un d'eux. S'il y a trouble par rapport au tube témoin, l'urine contient de la nucléoalbumine. Si la turbidité n'apparaît pas, le contenu des deux tubes est mélangé et à nouveau divisé en deux parties. Dans l'un des deux tubes à essai, ajoutez quelques gouttes (un excès peut transformer un échantillon positif en un échantillon négatif) d'une solution à 10 % de sel jaune du sang (ferricyanure de potassium). En présence de protéines de lactosérum, une turbidité est obtenue.

Avec de l'urine concentrée contenant de grandes quantités d'acide urique et d'urates, un test avec du ferricyanure de potassium et de l'acide acétique doit être effectué après dilution préalable (2 à 3 fois) de l'urine avec de l'eau. Sinon, une nébulosité causée par l'acide urique décanté peut se produire.

Ceci est particulièrement important lors de l'examen de l'urine de nourrissons contenant beaucoup d'acide urique et d'urates.

Parmi les autres tests qualitatifs des protéines dans les urines, basés sur la précipitation des protéines, on a utilisé : le test d'ébullition, les tests d'Esbach, Purdy, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann -Suzanne, Jollet, Exton, Kamlet, Kobuladze , Liliendal-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya, etc.

Lors de la production d'échantillons de protéines urinaires de qualité basés sur la précipitation des protéines, les règles générales suivantes doivent être respectées, dont la violation entraîne des erreurs importantes dans l'étude.

1. L'urine à tester doit être acide. Dans une réaction alcaline, l'urine est légèrement acidifiée avec de l'acide acétique. La production d'un échantillon d'urine alcaline, lorsque l'acide est utilisé comme réactif, peut entraîner la neutralisation de l'acide et un résultat négatif s'il est positif. Cela est particulièrement vrai pour l'échantillon d'acide sulfosalicylique, car l'acide est ajouté en très petites quantités et peut être facilement neutralisé.

2. L'urine à tester doit être claire.

3. Les prélèvements pour la détermination des protéines dans l'urine doivent toujours être effectués dans deux tubes à essai, dont l'un sert de témoin. Sans tube de contrôle, vous ne remarquerez peut-être pas de légère turbidité dans les réactions.

4. La quantité d'acide ajoutée dans les échantillons ne doit pas être trop importante. Une grande quantité d'acide peut conduire à la formation d'albumines acides solubles et à la transformation d'un échantillon positif en négatif.

Méritent une grande attention, en raison de leur technique simple, les échantillons secs colorimétriques. Ces tests utilisent l'influence qu'une protéine a sur la couleur d'un indicateur dans une solution tampon (ce que l'on appelle l'erreur de la protéine indicatrice). Une bande de papier filtre imprégnée d'un tampon de citrate acide et de bleu de bromophénol comme indicateur est immergée pendant une courte période dans l'urine. Le test est positif si une couleur bleu-vert est obtenue. En comparant l'intensité de la couleur avec les normes de papier couleur, des conclusions provisoires et quantitatives peuvent également être tirées. Le papier indicateur est vendu en rames de normes de couleur appropriées, similaires au papier indicateur universel.

Méthodes de détermination quantitative des protéines dans l'urine
De nombreuses méthodes ont été proposées pour la détermination quantitative des protéines dans l'urine. Les méthodes quantitatives précises pour la détermination des protéines dans le matériel biologique n'ont pas trouvé une large application dans la détermination des protéines dans l'urine, en raison de techniques complexes et chronophages. Les méthodes volumétriques, en particulier la méthode d'Esbach, sont largement utilisées. Ils sont très simples, mais, malheureusement, ils ne sont pas très précis. Les méthodes du groupe Brandberg-Stolnikov sont également pratiques pour la clinique, donnant des résultats plus précis que les méthodes volumétriques, avec une technique relativement simple. En présence d'un photomètre ou d'un néphélomètre, les méthodes néphélométriques conviennent également.

Méthode d'Esbach. Il a été proposé par le médecin parisien Esbach en 1874. L'urine et un réactif sont versés dans un tube à essai spécial (albuminomètre d'Esbach). Le tube à essai est bouché avec un bouchon en caoutchouc, bien agité (sans battre !) et laissé en position verticale jusqu'au lendemain. Ils signalent la division à laquelle atteint la colonne de sédiment protéique. Le nombre trouvé indique la teneur en protéines. Il est très important avec la méthode Esbach que l'urine soit acide. L'urine alcaline peut neutraliser les constituants acides du réactif et empêcher la précipitation des protéines.

Avantages de la méthode : elle est simple et pratique dans la pratique.

Inconvénients : la méthode est imprécise, le résultat est obtenu au bout de 24 à 48 heures.

Méthode de Brandberg-Stolnikov. Il est basé sur un test qualitatif de Geller. Le test Heller peut être utilisé pour la quantification car il donne un résultat positif au-dessus de 3,3 mg% de protéines. Il s'agit de la concentration protéique limite en dessous de laquelle l'échantillon devient négatif.

Modification d'Erlich et d'Althausen. Les scientifiques soviétiques S. L. Erlikh et A. Ya. Althausen ont modifié la méthode Brandberg-Stolnikov, indiquant la possibilité de simplifier l'étude et de gagner du temps dans sa production.

La première simplification est liée au moment de l'apparition de l'anneau. L'heure exacte de son apparition est déterminée, sans nécessairement respecter les 2e et 3e minutes.

La deuxième simplification permet d'établir quelle dilution doit être faite. Les auteurs ont prouvé que la dilution requise peut être approximativement déterminée par le type d'anneau résultant. Ils distinguent filiforme, large
et un anneau compact.

Parmi les méthodes néphélométriques, il convient de noter Méthode Kingsberry et Clark. 2,5 ml d'urine filtrée sont versés dans un petit cylindre gradué, réapprovisionné avec une solution aqueuse à 3% d'acide sulfosalicylique à 10 ml. Agiter soigneusement et après 5 minutes de photomètre dans une cuvette de 1 cm, avec un filtre jaune, en utilisant de l'eau comme liquide de compensation. Avec un photomètre Pulfrich, l'extinction trouvée, multipliée par 2,5, donne la quantité de protéines en %o. Dans le cas où l'indice d'extinction est supérieur à 1,0, l'urine est prédiluée 2 fois, 4 fois voire plus.

Afin d'avoir une idée claire de la quantité de protéines excrétées dans l'urine, il est nécessaire de déterminer non seulement leur concentration dans une portion distincte d'urine, mais également leur quantité quotidienne totale. Pour ce faire, recueillez l'urine du patient pendant 24 heures, mesurez son volume en millilitres et déterminez la concentration en protéines dans une portion d'urine quotidienne en g%. La quantité de protéines excrétées dans l'urine en 24 heures est déterminée en fonction de la quantité quotidienne d'urine en grammes.

Signification clinique des protéines dans l'urine

L'urine humaine contient normalement des quantités minimales de protéines qui ne peuvent pas être déterminées par des tests de protéines urinaires qualitatifs de routine. L'excrétion de grandes quantités de protéines, dans laquelle les tests qualitatifs ordinaires pour les protéines dans l'urine deviennent positifs, est un phénomène anormal appelé protéinurie. La protéinurie n'est physiologique que chez un nouveau-né, dans les 4 à 10 premiers jours après la naissance. Le nom couramment utilisé d'albuminurie est incorrect, car non seulement les albumines, mais également d'autres types de protéines (globulines, etc.) sont excrétées dans l'urine.

La protéinurie, en tant que symptôme diagnostique, a été découverte en 1770 par Cotugno.

Les protéinuries rénales fonctionnelles les plus importantes chez l'enfant sont les suivantes :

1. Protéinurie physiologique du nouveau-né. Il survient chez la plupart des nouveau-nés et n'a pas d'effet indésirable. Cela s'explique par un filtre rénal faible, des dommages à la naissance ou une perte de liquides dans les premiers jours de la vie. La protéinurie physiologique disparaît entre le 4e et le 10e jour après la naissance (plus tard chez les bébés prématurés). La quantité de protéines est faible. C'est la nucléoalbumine.

L'albuminurie néonatale à long terme peut être un symptôme de maladies congénitales.

2. Albuminurie d'AVC. Elles sont causées par le dépassement du seuil d'irritabilité normale du filtre rénal par des irritations mécaniques, thermiques, chimiques, mentales et autres importantes - perte de liquide chez le nourrisson (protéinurie déshydratante), bains froids, alimentation abondante et riche en protéines (protéinurie alimentaire) , palpation du rein (albuminurie palpatoire), surmenage physique, peur, etc.

L'albuminurie d'AVC apparaît plus facilement chez les enfants à un âge précoce que chez les enfants plus âgés et les adultes, car les reins d'un nourrisson et d'un petit enfant sont plus facilement irrités. L'albuminurie de déshydratation (malnutrition, hydrolabilité, toxicose, diarrhée, vomissements) est particulièrement souvent observée chez les nourrissons.

L'albuminurie d'AVC est bénigne. Ils disparaissent immédiatement après l'élimination des causes qui les provoquent. Dans le gisement il y a parfois des leucocytes isolés, des cylindres et des erythrocytes. La protéine est le plus souvent la nucléoalbumine.

3. Protéinurie orthostatique. Cette condition est typique pour les enfants d'âge préscolaire et scolaire. Il se produit sur la base de troubles vasomoteurs de l'apport sanguin au rein. La caractéristique typique de l'albuminurie orthostatique (d'où son nom) est qu'elle n'apparaît que lorsque l'enfant est debout, lorsque la colonne vertébrale est en position lordotique. En décubitus dorsal, il disparaît. La nucléoalbumine est libérée. Dans les cas douteux, on peut recourir à l'expérience orthostatique, qui est la suivante : le soir, une heure avant de se coucher, l'enfant vide la vessie ; le matin, en se levant, il urine à nouveau. Cette urine ne contient pas de protéines. Ensuite, l'enfant est mis à genoux pendant 15 à 30 minutes avec un bâton derrière le dos, entre les coudes pliés des deux mains. Une position de lordose est créée qui entraîne la libération de protéines, sans modification des sédiments.

Avec l'albuminurie orthostatique, 8 à 10 g de protéines peuvent être sécrétés par jour.

Parmi toutes les protéinuries, la signification clinique la plus importante est la protéinurie rénale organique. Elles sont causées par des maladies organiques des reins (néphrite, néphrose, néphrosclérose). La protéinurie est l'un des symptômes les plus importants et les mieux connus de la maladie rénale organique.

1. Dans la glomérulonéphrite aiguë et chronique, une protéinurie survient régulièrement. La quantité de protéines est modérée et il n'y a pas de parallèle entre le degré de protéinurie et la gravité de la maladie. En revanche, la néphrite chronique et plus sévère survient souvent avec moins de protéines que les aiguës. Après une néphrite aiguë, parfois pendant une longue période (des années), de petites quantités de protéines dans l'urine sont établies, qui n'ont pas de signification pathologique ("albuminurie résiduelle"). Il ne faut pas oublier que des "néphrites sans protéinurie" peuvent également survenir. Parfois, la protéine se trouve dans une partie de l'urine, mais pas dans l'autre. Le rapport des albumines aux globulines dans la néphrite aiguë est faible et dans la néphrite chronique, il est plus élevé.

2. Avec la néphrosclérose, la quantité de protéines dans l'urine est très faible, il existe souvent des formes de la maladie sans protéines dans l'urine.

3. De toutes les maladies rénales, la néphrose survient avec la protéinurie la plus prononcée.

4. Dans des conditions infectieuses et toxiques, une protéinurie dite fébrile et toxique se produit. Ce sont des néphroses aiguës, dans lesquelles la quantité de protéines est faible. Ce groupe comprend également la protéinurie dans les états convulsifs (convulsions), l'hyperthyroïdie, la jaunisse, l'intussusception, l'entérocolite, les brûlures, l'anémie sévère, etc. Ces albuminuries sont bénignes et passent rapidement (albuminurie transitoire).

5. Avec la stagnation du sang dans les reins, il se produit ce que l'on appelle l'albuminurie congestive, caractéristique des patients cardiaques au stade de la décompensation. On le trouve également dans les ascites et les tumeurs de l'abdomen.

Avec l'albuminurie fébrile, toxique et congestive, la perméabilité accrue du filtre rénal est particulièrement prononcée. Selon certains auteurs, nombre de ces protéinuries surviennent sans atteinte organique du parenchyme rénal.

Albuminurie extrarénale sont généralement causées par des impuretés protéiques (sécrétions, cellules décomposées), qui sont excrétées par les voies urinaires et les organes génitaux malades. L'albuminurie extrarénale est plus fréquente en raison d'une cystopyélite (pyurie), moins souvent en raison d'une vulvovaginite, de calculs et de tumeurs des voies urinaires.

Avec l'albuminurie extrarénale, un grand nombre de leucocytes et de bactéries se trouvent dans les sédiments. Les éléments rénaux ne sont presque jamais retrouvés. La quantité de protéines est faible. L'urine filtrée ou centrifugée n'est généralement pas positive pour les protéines.

Chez ceux qui se remettent d'une pyélite, l'albuminurie disparaît après la bactériurie et la pyurie.

Il convient de souligner comme phénomène caractéristique que les maladies rénales organiques apparaissent extrêmement rarement dans la petite enfance, et donc la protéinurie organique est également rare. Parmi ceux-ci, il y a principalement des fébriles et des toxiques. Contrairement à la protéinurie organique, l'albuminurie d'AVC est très fréquente chez les enfants à un âge précoce.

Chez les enfants plus âgés, la protéinurie organique est plus souvent fonctionnelle. En général, avec l'âge, la protéinurie fonctionnelle est moins fréquente, et organique plus souvent.

Études électrophorétiques des protéines dans l'urine

Un certain nombre d'auteurs utilisent la méthode électrophorétique pour étudier les protéines dans l'urine (uroprotéines). On peut voir d'après les électrophorégrammes obtenus qu'ils ont la même composition qualitative que les protéines plasmatiques. Cela indique que les protéines dans l'urine sont dérivées de protéines plasmatiques.

R-vous solution à 50% d'azote à-vous ou p-larionique. Le déroulement de la détermination : un certain nombre de tubes à essai sont placés dans un trépied et 1 ml de solution d'acide nitrique est versé, ajoutez 1 ml d'urine, couchez sur le réactif et notez l'heure, lorsqu'un anneau apparaît, nous enregistrons l'heure de l'apparence de la bague. Si l'anneau est large, diluez l'urine.

4. Détermination de la concentration en protéines dans l'urine avec de l'acide sulfosalicylique à 3 %.

P-you: 3% ssk, chlorure de sodium 9%, albumine pp 10% Le déroulement de la détermination: 1,25 ml d'urine claire sont placés dans deux tubes à centrifuger mesurés "O" - expérience et "K" - contrôle. 3,75 ml d'une solution à 3% d'acide sulfosalicylique sont ajoutés à l'expérimental et 3,75 ml d'une solution à 0,9% de chlorure de sodium sont ajoutés au témoin. Laisser reposer 5 minutes, puis photométriquement sur FEC à une longueur d'onde de 590 - 650 nm (filtre de lumière orange ou rouge) dans une cuvette d'une épaisseur de couche de 5 mm, expérimenter contre contrôle. Le calcul est effectué selon le graphique ou le tableau d'étalonnage. Principe de la méthode est basé sur le fait que la protéine avec l'acide sulfosalicylique donne une turbidité dont l'intensité est directement proportionnelle à la concentration de la protéine.

5. détection du glucose dans l'urine, le test de Gaines-Akimov. Principe: Le glucose, lorsqu'il est chauffé en milieu alcalin, réduit le dihydroxyde de cuivre (jaune) en monohydroxyde de cuivre (rouge orangé). Préparation des réactifs: 1) 13,3 g chim. sulfate de cuivre cristallin pur (CuSO 4 . 5H2O). dans 400 ml d'eau. 2) 50 g de soude caustique sont dissous dans 400 ml d'eau. 3) 15 g de glycérine pure sont dilués dans 200 ml d'eau. Mélanger les première et deuxième solutions et ajouter immédiatement la troisième. Portoirs de réactifs. Avancement de la définition: 1 goutte d'urine et 9 gouttes de réactif sont ajoutées au tube à essai et bouillies au bain-marie pendant 1 à 2 minutes. Test positif: couleur jaune ou orange du liquide ou du précipité.

6. Détermination qualitative du glucose dans l'urine par la méthode de la glucose oxydase. Principe de la méthode: le glucose s'oxyde en présence de glucose oxydase, selon la réaction : Glucose + O 2 avec glyconolant + H 2 O 2. Le peroxyde H formé sous l'action de la peroxydase oxyde le substrat avec formation d'un produit coloré.

Verser et incuber pendant 15 minutes à 37 0 C. Regarder la cuvette CPK, 5 mm.

Ensuite, les calculs sont effectués selon la formule: С op = Ext op . Cst/ Ect st.

7. Détection des corps cétoniques dans l'urine par le test de Lestrade. Sur la lame de verre est appliquée (à la pointe du scalpel) une poudre ou un comprimé de solution Lestrade, et 2-3 gouttes d'urine y sont appliquées. En présence de corps cétoniques, une coloration rose à violette apparaîtra. L'échantillon est évalué sur un fond blanc.

8. Détection du pigment sanguin dans l'urine par un test avec une solution d'alcool à 5% d'amidopyrine.

Solution alcoolique à 1,5% d'amidopyrine (0,5 g d'amidopyrine est dissous dans 10 ml d'alcool à 96%) Solution à 2,3% de peroxyde d'hydrogène 1,5 g d'hydropyrite est dissous dans 50 ml d'eau) -extrait éthéré ou urine non filtrée agitée ajouter 8- 10 gouttes de solution d'amidopyrine à 5% et 8-10 gouttes de solution de peroxyde d'hydrogène à 3%; prendre en compte le résultat au plus tard 2-3 minutes. L'échantillon est considéré comme positif en présence d'une coloration gris-violet.

Détection de l'urobiline dans l'urine avec un test de Neubauer.

Basé sur la réaction colorée de l'urobilinogène avec le réactif d'Erlich, qui consiste en 2 g de paradiméthylaminobenaldéhyde et 100 ml de solution d'acide chlorhydrique (200 g.l. 1 ml d'urine et 1 ml de solution. L'apparition de la couleur rouge dans les 30 premières secondes indique une augmentation de la teneur en urobilinogène. Normalement, la couleur apparaît plus tard ou est complètement absente. Lorsque l'urine se lève, l'urobilinogène se transforme en urobiline et le test peut être faux négatif. ne peut pas être chauffé, car des composés complexes sous-produits, aldéhyde avec porphyrines, indole et des médicaments peuvent se former.

Détection de la bilirubine dans les urines avec un test Rosin.

Solution alcoolique d'iode (10g.l): 1 g d'iode cristallin est dissous dans un cylindre d'une capacité de 100 ml dans 20-30 ml de 96 g d'alcool rectifié, puis complété avec de l'alcool jusqu'au trait. Versez dans un tube à essai chimique 4 à 5 ml d'urine à tester et recouvrez-la soigneusement d'une solution alcoolique d'iode (si l'urine a une faible densité relative, elle doit être superposée sur une solution alcoolique d'iode). antipyrine, ainsi que lorsqu'il y a un pigment sanguin dans les urines, le test s'avère positif) Chez une personne en bonne santé, ce test est négatif.

Examen des urines par chimie sèche (monopolytests).

Principe. La méthode est basée sur l'effet exercé par la protéine sur la couleur de l'indicateur dans la solution tampon, à la suite de quoi le colorant change de couleur du jaune au bleu.

Lors du test de la présence de protéines dans l'urine et de la détermination du pH à l'aide d'un papier indicateur, il est recommandé de suivre les directives suivantes :

1. Recueillir les urines dans un plat soigneusement lavé.
2. Utilisez de l'urine fraîchement collectée et sans conservateur.
3. Fermez soigneusement le boîtier après en avoir retiré le nombre requis de bandes de papier indicatrices.
4. Ne saisissez pas les zones indicatrices avec vos doigts.
5. Utiliser uniquement dans la date de péremption indiquée sur l'étiquette.
6. Respectez les règles de stockage du papier indicateur.
7. Évaluez les résultats conformément aux instructions disponibles dans les instructions.

Réalisation d'un test d'urine sur un analyseur chimique d'urine sèche.

Progression de la définition. Une bande de papier indicateur est retirée de l'étui et immergée dans l'urine de test de sorte que les deux zones indicatrices soient humidifiées simultanément. Après 2-3 secondes, la bande est placée sur une plaque de verre blanc. Effectuez immédiatement une évaluation du pH à l'aide de l'échelle de couleurs imprimée sur la trousse. La valeur du pH sur l'échelle de couleurs correspond à 6,0 (ou moins) ; 7,0 ; 8,0 ; 9.0.

Préparation d'urine, préparation de préparations à partir de sédiments d'urine par examen microscopique de manière approximative.

L'examen microscopique du sédiment urinaire est effectué par une méthode approximative dans l'analyse générale et le calcul quantitatif des éléments façonnés pour une évaluation plus précise du degré de leucocyturie et d'hématurie.

Règles pour la préparation du sédiment urinaire pour la microscopie.

La première portion d'urine du matin est soumise à un examen microscopique.

Après mélange préalable, 10 ml d'urine sont prélevés, centrifugés 10 minutes à 1500 rpm.

Ensuite, le tube à centrifuger contenant de l'urine est renversé d'un mouvement brusque, le surnageant est rapidement versé dans un bocal vide.

Remuer, déposer une goutte sur une lame de verre et recouvrir soigneusement d'une lamelle.

Si le précipité se compose de plusieurs couches, préparez la préparation, puis centrifugez à nouveau et préparez les préparations de chaque couche séparément.

En l'absence de sédiment visible à l'œil, une goutte d'urine est appliquée sur une lame de verre et au microscope.

Au début, le matériau est examiné à faible grossissement (oculaire 7-10, objectif 8), tandis que le condenseur est baissé, le diaphragme est légèrement rétréci, puis la préparation est étudiée en détail à fort grossissement (oculaire 10,7 ; objectif 40) .

14.Étude quantitative du sédiment urinaire selon Nechiporenko.

La méthode est utilisée pour les processus inflammatoires lents latents (pyélonéphrite, glomérulonéphrite), la pyurie latente. Étudier le processus pathologique en dynamique. Pour évaluer l'efficacité du traitement. Avantages de la méthode : techniquement simple, ne nécessite pas une grande quantité d'urine et dure longtemps. son stockage, est utilisé en pratique ambulatoire. Obligatoire conditions: urine du matin, portion moyenne, solution acide (en alcaline, il peut y avoir une dégradation partielle des éléments cellulaires). 1. L'urine est mélangée 2. 10 ml d'urine sont placés dans un tube à centrifuger doseur et centrifugés pendant 10 minutes à 1500 rpm. 3. Après centrifugation. succion Pipeter le dessus du liquide, laisser. exactement 1 ml de sédiment. 4. Le précipité est soigneusement mélangé et la chambre Goryaev est remplie. 5. Après 3 à 5 minutes après le remplissage, ils commencent à compter les éléments façonnés. 6. Comptage des leucocytes, Er, cylindres avec un oculaire 15 objectif 8 lorsqu'il est abaissé. condenseur, en 100 grands carrés de chambre. Les globules blancs, Er sont comptés séparément, les cylindres (comptant au moins 4 chambres de Goryaev) sont excrétés. arith. X \u003d A x 0,25x 10 6 / l. Norme : lac. 2-4x 10 6 /l, Er jusqu'à 1 x 10 6 /l, cylindres jusqu'à 0,02 x 10 6 /l (un pour 4 chambres). Chez l'enfant : leuc. jusqu'à 2-4x 10 6 /l, Er jusqu'à 0,75 x 10 6 /l, bouteilles jusqu'à 0,02 x 10 6 /l.

15. L'analyse d'urine selon Zimnitsky

Ce test détermine la capacité des reins à se concentrer. et diluer l'urine. Essence de l'échantillon dans la détermination dynamique de la densité relative et de la quantité d'urine en trois heures par portions au cours de la journée. Réalisation d'un test: après avoir vidé la vessie à 6 heures du matin dans les toilettes, le patient recueille l'urine toutes les trois heures dans des bocaux séparés pendant la journée. Seulement 8 portions. Avancement de la recherche : 1. Livraison. L'urine est disposée à l'heure et dans chaque portion, déterminez la quantité et la densité relative. 2. Comparez la quantité quotidienne d'urine et la quantité de liquide bu pour déterminer. % de son excrétion. 3. Calculez la diurèse diurne et nocturne, résumez, obtenez la diurèse quotidienne. 4. Définissez la plage de fluctuation de la quantité et relative. densité urinaire par jour, c'est-à-dire quelle est la différence entre la plus petite portion et la plus grande. Spectacle. tests de santé. personnes: 1. Diurèse quotidienne 800-1500 ml. 2. La diurèse diurne prévaut de manière significative pendant la nuit. 3. Les fluctuations du volume d'urine dans les portions individuelles sont importantes (de 50 à 400 ml). 4. Les fluctuations p de 1,003 à 1,028 doivent être supérieures à 0,008. Avec fonc. insuffisance rénale : hypostenurie, hypoisostenurie, isostenurie, hyperstenurie, oligurie, anurie, nycturie.

16. Description des propriétés générales des matières fécales.

Normalement, les matières fécales sont constituées de produits de sécrétion et d'excrétion du tube digestif, de résidus d'aliments non digérés ou partiellement digérés et de la flore microbienne. La quantité de matières fécales est de 100 à 150 g, la consistance est dense. La forme est cylindrique. L'odeur est fécale normale. Couleur marron. R-tion est neutre, légèrement alcalin ou légèrement acide (pH 6,5-7,0-7,5). Le mucus est absent. Le sang est absent. Les restes de nourriture non digérée sont absents.

Instruction

Méthodes qualitatives pour la détermination des protéines dans urine: Méthode Heller, test de solution d'acide sulfosalicylique à 20 %, test d'ébullition, etc. Méthodes semi-quantitatives : utilisation de bandelettes de test de diagnostic pour déterminer la protéine dans urine, méthode de Brandberg-Roberts-Stolnikov. Méthodes quantitatives : turbidimétrique et colorimétrique.

Détermination des protéines au quotidien urineà une concentration de 0,033 g/litre ou plus est une pathologie. En règle générale, dans la portion d'urine du matin, la concentration en protéines ne dépasse pas 0,002 g / l, et dans le quotidien urine la concentration en protéines ne dépasse pas 50 à 150 mg de protéines.

Sources:

• dosage des protéines dans l'urine

L'urine est un produit du métabolisme humain. Il se forme lors de la filtration du sang dans les reins, c'est pourquoi la composition de l'urine donne une description claire de l'état du corps humain.

L'urine est une solution complexe de plus de 150 composés. Certaines substances spécifiques, par exemple l'acétone, les acides biliaires, les protéines, le glucose, peuvent n'être présentes que dans certaines maladies.

Pour contrôler la santé humaine, il est tout d'abord nécessaire de déterminer la quantité d'urine. La norme est la formation de 1 à 1,8 litre d'urine par jour. Lorsque plus de 2 litres d'urine sont excrétés, c'est le signe d'une perturbation possible du fonctionnement des reins, du diabète sucré et d'un certain nombre d'autres maladies. Si moins de 0,5 litre d'urine est formé par jour, il y a un blocage de l'uretère ou de la vessie.

couleur des urines

La couleur de l'urine excrétée dépend de nombreux facteurs, elle peut donc varier, allant du jaune clair à l'orange. La présence de certaines nuances peut être affectée par certains aliments, ainsi que par les médicaments pris par une personne.

Après avoir pris des médicaments, l'urine peut se tacher et acquérir une teinte rougeâtre. Si une personne bouge activement, alors qu'elle produit une grande quantité de sueur, l'urine aura une couleur jaune intense, comme lors de la prise de médicaments tels que la nitroxoline ou la biomycine.

Si une personne n'a pas pris d'aliments colorants ni de médicaments, mais que la couleur de son urine est différente de la normale, on peut suspecter la présence d'une maladie dans le corps. Par exemple, dans les maladies du foie, l'urine aura une couleur jaune foncé ou verdâtre.

La présence de sang dans l'urine excrétée indique clairement la présence d'un calcul ou d'un saignement rénal, si une douleur est également observée.

Si la miction est difficile, cela peut indiquer un processus inflammatoire causé par une infection de la vessie. Mais une urine sale et trouble indique une maladie rénale grave.

Protéine dans l'urine

Il n'y a pas de protéine dans le sang d'une personne ou sa quantité est si petite qu'elle ne peut pas être déterminée à l'aide de tests de laboratoire. Si une protéine est détectée dans l'urine, il est nécessaire d'effectuer des tests répétés, car elle peut être présente lorsqu'une personne se réveille le matin, ainsi qu'après un travail physique intense ou un exercice chez les athlètes.

Déterminer visuellement si des protéines sont présentes ou non dans l'urine est impossible à 100%. On ne peut que deviner quand il y a une grande quantité de flocons blanchâtres dans l'urine.

Si la protéine dans l'urine est détectée à plusieurs reprises, cela indique la présence d'une sorte de maladie rénale. Les processus inflammatoires qui s'y déroulent provoquent une légère augmentation de la quantité de protéines. Si plus de 2 grammes sont excrétés dans l'urine, c'est un signal d'alarme.

La pyélonéphrite est une maladie inflammatoire qui affecte le bassinet du rein, les calices et le parenchyme. Dans la plupart des cas, l'inflammation est causée par une infection bactérienne. Un rétablissement complet n'est possible qu'avec un diagnostic rapide. Par conséquent, lorsque les symptômes apparaissent, un examen approfondi est nécessaire.