Štetne ovisnosti 

Sinteza hijaluronske kiseline. Struktura i primjena hijaluronske kiseline u medicini. Fiziološka uloga hijaluronskih polimera

Hijaluronska kiselina [HA] se nalazi u ekstracelularnom matriksu tkiva kralježnjaka, u površinskom omotaču određenih vrsta Streptococcus i bakterijskih patogena Pasteurella, te na površini nekih djelomično virusom inficiranih algi. Sintaze hijaluronske kiseline [HAS] su enzimi koji polimeriziraju HA koristeći UDP šećerne prekursore koji se nalaze u vanjskim membranama ovih organizama. GCS geni su identifikovani iz svih gore navedenih izvora. Čini se da postoje dvije različite klase GCS zasnovane na razlikama u sekvenci aminokiselina, predviđenoj topologiji u membrani i predloženom mehanizmu reakcije.

Svi GCS su identifikovani kao sintaze klase I, sa izuzetkom GCS u vrsti Pasteurella. Također je objašnjen katalitički način rada jednog GCS klase II (pmGCS). Ovaj enzim proširuje vanjske HA-vezane akceptore oligosaharida dodavanjem pojedinačnih monosaharidnih jedinica na kraj koji se ne skuplja da bi se in vitro formirali dugi polimeri; nijedan GCS klase I nema ovu mogućnost. Način i smjer polimerizacije HA katalizirane GCS klase I ostaju nejasni. Enzim pmGCS je također analiziran na dvije aktivnosti: GlcUA transferazu i GlcNAc transferazu. Dakle, dva aktivna mjesta postoje u jednom pmGCs polipeptidu, pobijajući široko prihvaćenu dogmu glikobiologa: "jedan enzim - jedan modificirani šećer". Preliminarni dokazi sugeriraju da enzimi klase I mogu također imati dva mjesta aktivnosti.

Katalitički potencijal enzima pmGCs može se koristiti za stvaranje novih polisaharida ili dizajn oligosaharida. Zbog mnogih potencijalnih medicinskih terapija zasnovanih na HA, ova hemoenzimska tehnologija obećava našu potragu za dobrim zdravljem.

Ključne riječi

Hijaluronska kiselina (HA), hondroitin, glikoziltransferaza, sintaza, kataliza, mehanizam, himerni polisaharidi, monodisperzni oligosaharidi

Uvod

Hijaluronan [HA] je vrlo bogat glikozaminoglikanom u kralježnjacima, sa strukturnom i signalnom ulogom. Određene patogene bakterije, naime grupe A i C vrste Streptococcus i tip A Pasteurella multocida, proizvode ekstracelularni omotač HA koji se naziva kapsula. U oba tipa HA, kapsula je faktor virulencije, koji bakterijama daje otpornost na fagocite i komplementarnost. Još jedan organizam koji proizvodi HA je morska alga Chlorella, koja je zaražena određenim velikim dvolančanim DNK virusom, PBCV-1. Uloga HA u životnom ciklusu ovog virusa trenutno nije jasna.

Slika 1. Biosintetička reakcija HA.

Enzimi iz klase glikoziltransferaza koje polimeriziraju HA nazivaju se HA sintaze (ili GCS), prema staroj terminologiji, koja uključuje i HA sintetaze. Sve poznate HA sintaze su varijante jednog polipeptida odgovornog za polimerizaciju HA lanca. Prekursore šećera UDP, UDP GlcNAc i UDP GlcUA, koristi HA sintaza u prisustvu dvovalentnog katjona (Mn i/ili Mg) pri neutralnom pH (slika 1). Sve sintaze su proteini vezani za membranu u živoj ćeliji i nalaze se u frakciji membrane nakon stanične lize.

Između 1993. i 1998., Streptococcus grupe A i C HA sintaze [spGCS i sEGCS, respektivno], HA sintaza kralježnjaka [GCS 1,2,3], HA sintaza virusa algi [svGCS], kao i HA sintaza tip A vrste Pasteurella multocida [pmGCS]. Čini se da su prve tri vrste HA sintaza vrlo slične po veličini, sekvenci aminokiselina i predviđenoj topologiji membrane. Pasteurella HA sintaza je, naprotiv, veća i ima značajno drugačiju sekvencu i predviđenu topologiju od drugih sintaza. Stoga smo pretpostavili postojanje dvije klase HA sintaza (Tabela 1). Enzimi klase I uključuju streptokokne, kičmenjačke i virusne proteine, dok je Pasteurella trenutno jedini član klase II. Također imamo neke dokaze da su katalitički procesi enzima klase I i klase II različiti.

Tabela 1. Dvije klase HA sintaze:

Iako je Pasteurella HA sintaza bio posljednji otkriveni enzim, nekoliko karakteristika pmGC-a učinilo ga je značajnim napretkom u njegovom proučavanju u poređenju s nekim članovima enzima klase I koji su proučavani četiri decenije. Ključna karakteristika pmGC-a, koja je omogućila razjašnjavanje molekularnog smjera polimerizacije i identifikaciju njegova dva aktivna mjesta, je sposobnost pmGC-a da produži eksterno locirani akceptorski oligosaharid. Rekombinantni PMGC dodaje pojedinačne monosaharide na repetitivni način oligosaharidu povezanom s HA ​​in vitro. Intrinzična karakteristika svakog prijenosa monosaharida je odgovorna za formiranje alternativnog ponavljanja disaharida u tom glikozaminoglikanu; nije potrebno istovremeno formiranje disaharidne jedinice. S druge strane, takvo proširenje eksternih akceptora nije dokazano ni za jedan enzim klase I. Kroz osnovna naučna istraživanja, razvili smo neke biotehnološke primjene izvanrednog proteina klase Pasteurella HA sintaze.

Materijali i metode

Reagensi

Svi neobilježeni molekularni biološki reagensi su iz Promega. Standardni oligonukleotidi su iz Great American Gene Company. Svi ostali reagensi visoke čistoće, osim ako nije drugačije naznačeno, bili su iz Sigme ili Fishera.

Skraćivanje pmGC-a i tačkastih mutanata

Određeni broj skraćenih polipeptida je proizveden amplifikacijom pPm7A umetka lančanom reakcijom polimeraze sa Taq polimerazom (Fisher) i sintetičkim oligonukleotidnim prajmerima koji odgovaraju različitim dijelovima pmGC-a, sa otvorenim okvirom za čitanje. Amplikoni su zatim klonirani u pKK223-3 ekspresijski plazmid (tac promoter, Pharmacia). Dobijeni rekombinantni konstrukti su transformisani u ćelije Escherichia coli soja TOP 10F" (Invitrogen) i uzgajani na LB medijumu (Luria-Bertani) uz selekciju ampicilina. Mutacije su napravljene primenom QuickChange metode mutageneze usmerene na mesto (Stratagene) sa plazmidom pKK /pmGCs kao uzorak DNK.

Priprema enzima

Za pripremu membrane koja sadrži rekombinantni pmGCS pune dužine, pmGK1-972 je izolovan iz E. coli kako je opisano. Za rastvorljive skraćene pmGCs proteine, pmGCs1-703, pmGCs1-650 i pmGCs1-703 koji sadrže mutante, ćelije su ekstrahovane korišćenjem B-PerTM II bakterijskog reagensa za ekstrakciju proteina (Pieree) prema uputstvima proizvođača, osim što je urađeno na 7 °C u prisustvu inhibitora proteaze.

Enzimski putevi polimerizacije HA. GlcNAc modifikacija ili GlcUA modifikacija

Tri varijante su dizajnirane da otkriju da li (a) polimerizacija dugih HA lanaca ili (b) dodavanje jednog GlcNAc oligosaharidu HA akceptora GlcUA-terminalnog, ili (c) dodavanje jednog GlcUA oligosaharida HA akceptora GlcNAc-terminala . Ukupna aktivnost GCS procijenjena je za otopinu koja sadrži 50 mM Tris, pH 7,2, 20 mM MnCl2, 0,1 M (NH4)2SO4, 1 M etilen glikol, 0,12 mM UDP-(14C)GlcUA (0,01 μCi.3M), mM UDP-GlcNAc i drugačiji set HA oligosaharida dobijenih iz testisa tretmanom sa hijaluronidazom [(GlcNAc-GlcUA)n, n= 4-10] na 30°C tokom 25 minuta u zapremini reakcione smeše od 50 μl. Aktivnost GlcNAc transferaze je procenjena 4 minuta u istom pufer sistemu sa različitim setom GA oligosaharida, ali sa samo jednim šećerom kao prekursorom, 0,3 mM UDP-(3H)GlcUA (0,2 μCi; NEN). Aktivnost GlcUA-transferaze procjenjivana je 4 minute u istom puferskom sistemu, ali sa samo 0,12 mM UDP-(14C)GlcUA (0,02 µCi) i neparnim skupom oligosaharida HA (3,5 µg uronske kiseline) pripremljenim izlaganjem acetatnoj živi Streptomyces HA-lyase. Reakcije su prekinute dodavanjem SDS do 2% (w/v). Reakcioni produkti su odvojeni od supstrata papirnom hromatografijom (Whatman 3M) ​​sa etanolom/1 M amonijum sulfatom, pH 5:5 kao glavnim rastvaračem (65:35 za GCS i GlcUA-Tase test; 75:25 za GlcNAc -Tase test). Za procjenu GCS-a, uzorak papirne trake je ispran vodom, a povezanost radioaktivnih šećera u HA polimer je detektirana scintilacijom tekućine izračunatom korištenjem BioSafe II koktela (RPI). Za poluprobne reakcije, uzorak i trake od 6 cm nizvodno su brojane u koracima od 2 cm. Svi eksperimenti evaluacije su izračunati da budu linearni s vremenom inkubacije i koncentracijom proteina.

Gel filtracijska hromatografija

Veličina HA polimera je analizirana hromatografski na kolonama Phenomenex PolySep-GFC-P 3000, eluiranjem sa 0,2 M natrijum nitratom. Kolona je standardizovana fluorescentnim dekstranima različitih veličina. Radioaktivne komponente detektovane su pomoću senzora radioprotoka LB508 (EG&G Berthold) i Zinsser koktela. U poređenju sa potpunom procjenom GCS-a korištenjem papirne hromatografije opisane gore, ove 3-minutne reakcije sadržavale su dvostruko veće koncentracije UDP šećera, 0,06 µCi UDP-(14C)GlcUA i 0,25 ng raspona HA oligosaharida. Dodatno, dodavanje refluksa (2 minute) etilendiamina tetracilne kiseline (konačna koncentracija 22 mM) korišteno je za završetak reakcija umjesto dodavanja SDS.

Rezultati i diskusija

Upotreba i specifičnost GCS akceptora

Nekoliko oligosaharida je testirano kao akceptori za rekombinantni pmGCS1-972 (Tabela 2). HA oligosaharidi su dobijeni iz testisa cijepanjem hijaluronidazom i produženi pomoću PMGC koristeći odgovarajuće dostavljene UDP šećere. Redukcija natrijum borohidratom ne remeti aktivnost akceptora. S druge strane, oligosaharidi izvedeni iz HA cijepanjem liazom ne podržavaju elongaciju; dehidrirani, nezasićeni, nereducirani terminalni ostaci GlcUA zahtijevaju hidroksilne grupe da vežu ulazni šećer iz UDP prekursora. Stoga se u slučaju nereduciranih krajnjih grupa javlja elongacija katalizirana pmGC. U nizu paralelnih eksperimenata, pronađeni su rekombinantni oblici sintaza klase I, spGCS i x1GCS, koji ne produžuju akceptore izvedene iz HA. S obzirom na smjer aktivnosti enzima klase I, napravljeni su oprečni izvještaji i potrebna su dalja istraživanja.

Tabela 2. Specifičnost akceptora oligosaharida pmGCs:

Zanimljivo je da je hondroitin sulfat pentamer dobar akceptor za pmGCS. Drugi strukturno srodni oligosaharidi, kao što su hitotetroza ili heparosan pentamer, međutim, ne služe kao PMGC akceptori. Općenito, čini se da pmGC zahtijevaju β-vezane akceptorske oligosaharide koji sadrže GlcUA. Pretpostavljamo da je mjesto vezivanja oligosaharida srednje u lancu zadržavanja HA tokom polimerizacije.

Molekularna analiza aktivnosti pmGC transferaze: dva aktivna mjesta u jednom polipeptidu

Sposobnost mjerenja dvije komponente glikoziltransferazne aktivnosti HA sintaze, GlcNAc-transferaze i GlcUA-transferaze, omogućila je molekularnu analizu PMGC. Primijetili smo da je u pmGCS prisutan motiv kratke duplirane sekvence: Asp-Gly-Ser (Asparaginska kiselina-ta-Glicin-Serin). Iz uporedne analize hidrofobnih grupa mnogih drugih glikoziltransferaza koje proizvode β-vezane polisaharide ili oligosaharide, sugerirano je da općenito postoje dvije vrste domena: "A" i "B" regije. PMGC, sintaza klase II, jedinstvena je po tome što sadrži dva "A" domena (osobna komunikacija, B. Henrissat). Predloženo je da određeni članovi klase I HA sintaze (spGCS) sadrže pojedinačne "A" i pojedinačne "B" regije. Različiti delecijski ili tačkasti mutanti pmGC-a procijenjeni su zbog njihove sposobnosti da polimeriziraju HA lance ili njihove sposobnosti da dodaju jedan šećer oligosaharidu akceptora HA (Tablica 3). Sumirajući gore navedeno, pmGCS sadrži dva različita aktivna mjesta. Mutageneza aspartata DGS motiva (ostatak 196 ili 477) na oba mjesta rezultirala je gubitkom polimerizacije HA, ali je aktivnost drugog mjesta ostala relativno nepromijenjena. Tako je dvostruka aktivnost HA sintaze pretvorena u dva različita pojedinačna djelovanja glikoziltransferaze.

Tabela 3. Aktivnost pmGCS sa izbrisanim mjestom ili mutacijom tačke.

Uklanjanje poslednjih 269 ostataka sa terminalne karboksilne grupe je konvertovalo slabo eksprimirani membranski protein u dobro izražen rastvorljiv protein. Razmatranje sekvence aminokiselina pmGCs proteina u ovoj regiji, međutim, ne pokazuje tipične karakteristike sekundarne strukture koja bi omogućila direktnu interakciju enzima sa lipidnim dvoslojem. Postavili smo hipotezu da se terminalna karboksilna grupa katalitičkog enzima pmGCs spaja sa usmjeravajućim membranom vezanim polisaharidnim transportnim aparatom žive bakterijske stanice.

Prvi "A" region pmGCs, A1, je GlcNAc-taza, dok je drugi "A" region, A2, GlcUA-taza (slika 2). Ovo je prva identifikacija dva aktivna mjesta za enzim koji proizvodi heteropolisaharid, kao i jasan dokaz da jedan enzim zaista može prenijeti dva različita šećera. Pronađeno je da enzim ne-F tipa vrste P. multocida, nazvan pmCS, katalizira formiranje nesulfatnog polimera hondroitina. HA i hondroitin su identične strukture, sa izuzetkom gore navedenog polimera koji umjesto GlcNAc sadrži N-acetilglukozamin. I pmGC i pmCS su 87% identični na nivou aminokiselina. Većina promjena ostataka je u A1 regiji, što je sasvim u skladu s hipotezom da je ova regija odgovorna za prijenos heksozamina.

Slika 2. Šematski prikaz pmGCS regiona.
Dva nezavisna domena transferaze, A1 i A2, odgovorna su za katalizaciju polimerizacije HA lanca. Ponovljeni uzastopni dodaci pojedinačnih šećera brzo izgrađuju HA lanac. Čini se da karboksilni kraj pmGC-a na neki način stupa u interakciju s membranom vezanim transportnim aparatom bakterijske ćelije.

Slika 3. Model biosinteze HA upotrebom pmGC.
Pojedinačni šećeri se dodaju u svaki "A" domen na ponovljeni način na nereducirajući kraj HA lanca. Unutrašnja preciznost svakog koraka aktivnosti transferaze održava ponavljanje HA disaharidne strukture. Nastali HA lanac vjerovatno zadržavaju PMGCs tokom katalize preko mjesta vezanja oligosaharida.

Pokazali smo efikasan transfer jednog šećera sa pmGC in vitro u nekoliko tipova eksperimenata, pa smo pretpostavili da se HA lanci formiraju brzim, ponavljajućim dodavanjem jednog šećera pomoću sintaze klase II (slika 3). Do sada, jedan niz dokaza sugerira da enzim klase I također posjeduje dva mjesta transferaze. Mutacija leucinskog ostatka 314 u valin u mmGCS1, u dijelu pred-lokacije GlcUA taze, je prijavljeno da pretvara ovaj GCS kralježnjaka u hito-oligosaharid sintazu. Nije identifikovano nijedno mesto sa odgovarajućom aktivnošću GlcNAc-transferaze.

Polimerno kalemljenje polisaharidnim sintazama: dodavanje HA molekulama ili čvrstim česticama

Proučavanje pmGC-a u istraživačkoj laboratoriji transformisalo je koncept HA sintaza iz područja teških, upornih čudovišta sličnih životinjama u potencijalne biotehnološke radne konje. Novi molekuli se mogu formirati korištenjem sposobnosti pmGC-a da cijepe dugačke HA lance na kratke lance izvedene iz HA ili akceptore izvedene iz hondroitina. Na primjer, korisni akceptori mogu se sastojati od malih molekula ili lijekova s ​​kovalentno vezanim HA ili hondroitin-oligosaharidnim lancima (na primjer, dužine 4 šećera). Alternativno, HA lanci se mogu dodati u oligosaharidni prajmer imobiliziran na čvrstoj površini (Tabela 4). Stoga se dugi HA lanci mogu nježno dodati osjetljivim tvarima ili osjetljivim uređajima.

U drugoj primjeni, mogu se formirati novi himerni polisaharidi jer upotreba pmGC-a od strane akceptora oligosaharida nije tako stroga kao specifičnost saharid transferaze. Hondroitin i hondroitin sulfat su prepoznati kao akceptori pmGC-a i izduženi su pomoću GC-a sa lancem različite dužine (slika 4). Suprotno tome, pmCS, koji je veoma homologan hondroitin sintazi, prepoznaje i produžava HA akceptore sa lancima hondroitina. Formiraju se himerni molekuli glikozaminoglikana koji sadrže prirodne spojeve specifične veze. Ovi presađeni polisaharidi mogu poslužiti da se vežu za ćeliju ili tkivo koje veže HA za drugu ćeliju ili tkivo koje vezuje hondroitin ili kondroitin sulfat. U određenim aspektima, presađeni glikozaminoglikani liče na proteoglikane, koji su bitne komponente matriksa u tkivima kičmenjaka. Ali pošto u himernim polimerima nisu prisutni proteinski linkeri, problemi antigenosti i proteolize koji okružuju medicinsku upotrebu proteoglikana su eliminisani. Rizik od prenošenja infektivnih agenasa iz tkiva ekstrahovanih od životinja na čoveka, takođe je smanjen upotrebom himernih polimera.

Tabela 4. PMGC-iniciran kalemljenje HA na poliakrilamidne kuglice. Reakciona smeša sadrži pmGC koji nose radioaktivnu oznaku UDP-(14C)GlcUA i UDP-(3H)GlcNAc, kao i razne imobilizovane šećerne prajmere (akceptore spregnute reduktivnom aminacijom u amino kuglice). Zrnca su isprana i radioaktivno ugrađena u druge perle mjerene metodom proračuna tekućine scintilacije. HA lanci su kalemljeni na plastične perle koristeći odgovarajući prajmer i pmGC.

Slika 4. Šematski prikaz cijepljenih polisaharidnih struktura. Pasteurella HA sintaza ili hondroitin sintaza će produžiti određene druge polimere na neredukcionom kraju in vitro kako bi se formirali novi himerni glikozaminoglikani. Prikazani su neki primjeri.

Sinteza monodisperznih HA i HA-vezanih oligosaharida

Pored dodavanja velikog polimernog HA lanca akceptorskim molekulama, PMGC sintetiziraju određene manje HA oligosaharide u rasponu od 5 do 24 šećera. Koristeći enzim divljeg tipa i različite reakcione uslove, relativno lako se dobija HA oligosaharid koji sadrži 4 ili 5 monoaharida proširenih sa nekoliko šećera do dužih verzija, koje je vrlo često teško dobiti u velikim količinama. Otkrili smo da kombinovanjem rastvorljivog GlcUA-Tase mutanta i rastvorljivog GlcNAc-Tase mutanta u istoj smeši, reakcija omogućava formiranje HA polimera ako je sistem opremljen akceptorom. U roku od 3 minute napravljen je lanac od približno 150 šećera (-30 kDa). Bilo koji pojedinačni mutant sintaze neće rezultirati HA lancem. Stoga, ako se dalja kontrola reakcije vrši selektivnim kombinovanjem različitih enzima, UDP šećera i akceptora, tada se mogu dobiti određeni monodisperzni oligosaharidi (slika 5).

Slika 5. Priprema određenih oligosaharida.
U ovom primjeru, tetrasaharid HA akceptora je proširen jednom jedinicom hondroitin disaharida koristeći dva koraka s imobiliziranim mutantom sintaze vrste Pasteurella (prikazano bijelim strelicama). Prikazani proizvod je novi heksasaharid. Ponavljanje ciklusa još jednom proizvodi oligosaharid, dva ciklusa formiraju dekasaharid, itd. Ako je akceptor prethodno bio vezan za drugu molekulu (kao što je lijek ili lijek), tada bi novi konjugat bio proširen kratkim GA, hondroitinom ili hibridnim lancem po želji.

Na primjer, u jednom aspektu, mješavina UDP-GlcNAc, UDP-GlcUA i akceptora stalno cirkulira kroz odvojene bioreaktore sa imobiliziranim mutantnim sintazama koje prenose samo jedan šećer. Sa svakim ciklusom inkubacije bioreaktora, još jedna grupa šećera se dodaje u akceptor kako bi se formirali mali HA-specifični oligosaharidi. Upotreba sličnog pmCA mutanta (na primjer, GalNAc-Tase) u jednom od koraka omogućila je stvaranje miješanih oligosaharida korištenjem UDP-GlcNAc. Biološka aktivnost i terapeutski potencijal malih HA oligosaharida je složeno područje istraživanja koje će zahtijevati specifične, monodisperzne šećere za jednoznačno tumačenje.

Zaključak

Očigledno, postoje dvije različite klase HA sintaza. Najdobro okarakterizirani enzim klase II Pasteurella spp. proširuje HA lanac ponovnim dodavanjem jednog šećera na nereducirajući kraj HA lanca. Smjer i način rada sintaza klase I (enzimi streptokoka, virusa i kičmenjaka) ostaju nejasni. U primijenjenim naukama, sposobnost pmGC-a da produži egzogeno locirane akceptorske molekule korisna je za dizajniranje novih molekula i/ili uređaja s potencijalnom medicinskom primjenom.

Struktura

Molekul hijaluronska kiselina izgleda kao duga traka izgrađena od naizmjeničnih šećera - D-glukuronske kiseline i N-acetilglukozamina. formirajući osnovnu disaharidnu jedinicu ( pirinač. jedan).

Fig.1. Hijaluronska kiselina se sastoji od naizmjeničnih disaharidnih jedinica

U jednom lancu može biti do 250 hiljada disaharidnih jedinica. Molekularna težina ovog prirodnog polisaharida dostiže 10 hiljada kDa. HA je dio sinovijalne tekućine, staklastog tijela, nalazi se u pupčanoj vrpci, rožnjači, kostima, srčanim zaliscima, membranama jajeta.

Od fundamentalnog značaja je imovina hijaluronska kiselina(HA) vežu i zadržavaju (zbog vodoničnih veza) veliku količinu vode: 1 molekul HA veže 200-500 molekula vode. Istovremeno ima i efekat "pelene" - ne odustaje od vode čak ni kada se njen sadržaj u okolini smanji. Visoka gustoća negativnih naboja nastalih tokom disocijacije karboksilnih (kiselih) grupa privlači mnogo kationa, poput Na+ jona, koji su osmotski aktivni i uzrokuju da još više vode uđe u matriks. Rezultat visokog pritiska bubrenja je ono što nazivamo turgorom. Turgor dermisa, određen sadržajem i svojstvima HA, daje turgor .

Budući da molekul sadrži i hidrofilne i hidrofobne regije, u otopinama HA visoke molekulske težine (M.m > 1000 kDa) poprima prostornu strukturu u obliku nasumično uvijene vrpce, koja formira labav zavojnicu u trodimenzionalnom prostoru. Takve spirale zauzimaju ogroman volumen (hiljade puta veći od volumena samih makromolekula!), tvoreći viskozni gel čak i pri vrlo niskoj koncentraciji.

Nastajuće prostorne mreže sa ćelijama određene veličine omogućavaju "prirodnu selekciju" cirkulirajućih molekula. Takvo prirodno "molekularno sito" slobodno propušta ione, šećere, aminokiseline, signalne molekule, ali zadržava (i akumulira) velike molekule, uključujući razne toksine.

Metabolizam

Sinteza HA se odvija na unutrašnjoj površini plazma membrane fibroblasta. Molekuli monosaharida, od kojih je izgrađen polimerni lanac, nastaju iz glukoze, donor amino grupe je glutamin. Kako se makromolekula formira, ona se izvlači ( pirinač. 2).

Fig.2. Sinteza glikozaminoglikata fibroblastima (prema H. ​​Heineu, 1997.)

Sintezu HA katalizira enzim hijaluronat sintetaza (HAS), predstavljen sa tri varijante (Itano N.):

  • HASi - vrši sporu sintezu lanaca sa M.m oko 200-2000 kDa,
  • HAS2 - odgovoran je za brzu sintezu HA visoke molekularne težine sa M.m. više od 2000 kDa),
  • HAS3 je najaktivniji od enzima uključenih u sintezu HA sa M.m. oko 200-2000 kDa.

Hijaluronska kiselina u dermisu se sintetizira mnogo više nego što se katabolizira. Ispostavilo se da je značajan deo namenjen za drenažu kroz limfni sistem, što je važan mehanizam za detoksikaciju tkiva, jer se zajedno sa njim uklanjaju egzo- i endotoksini „upleteni” u 8 molekularnih „mreža”. Čak i veliki lanci HA sa M.m. mogu prodrijeti u limfne žile. oko 1000 kDa.

Katabolizam HA je stepenastog karaktera i pridaje mu se veliki značaj u regulaciji stanja matriksa. Trenutno se biotransformacija HA smatra najvažnijim faktorom u održavanju homeostaze i jednim od univerzalnih mehanizama za razvoj patoloških procesa (upale, tumorske invazije i metastaze), jer kako se dužina početnog lanca smanjuje, fragmenti sa svojim biološkim formiraju se aktivnosti ( tabela 2).

HA se katabolizira uz sudjelovanje hijaluronidaza (I i II tip), koje kataliziraju reakcije hidrolize i depolimerizacije (ekstracelularne degradacije). Makrofagi se djelimično fagocitiraju i podvrgavaju daljem katabolizmu uz učešće lizosomalnih enzima (3-glukuronidaza i (3-acetilglukozaminidaza (intracelularna degradacija). 90% HA koja je ušla u periferni limfni tok se uništava u limfnom toku). 9% u endoteliocitima jetre i 1% - u slezeni.

U tijelu odrasle osobe težine 70 kg, svi organi i tkiva sadrže ukupno oko 15 g hijaluronske kiseline, pri čemu 50% otpada na kožu.
Svaki dan se oko 5 g HA uništi i ponovo sintetiše, odnosno "život" ovog molekula je ograničen na nekoliko dana. HA je komponenta ekstracelularnog matriksa koja se najbrže obnavlja. Poređenja radi: "životni vijek" zrelog kolagenog vlakna je nekoliko mjeseci, vlakna elastina uglavnom pripadaju praktično neobnovljivim strukturama.

Tabela 2. Biološke funkcije molekula hijaluronske kiseline različitih molekulskih težina (Stern R et al, 2006.)

Dugi lanci sa M.m.
oko 500 kDa

Oni potiskuju angiogenezu, sprječavaju migraciju i diobu stanica, vjerovatno zbog promjena u međućelijskoj interakciji, inhibiraju proizvodnju citokina IL-1b, prostaglandina E2 i imaju imunosupresivni učinak.

Molekuli sa masom
20-100 kDa

Stimuliraju migraciju i diobu stanica, potiču zacjeljivanje rana, osiguravaju integritet epitela, učestvuju u ovulaciji i embriogenezi.

Kratki lanci HA sa M.m.
manje od 0,4-10 kDa

Stimuliraju angiogenezu, imaju imunomodulatorno i protuupalno djelovanje.

Tetrasaharidi

Imaju antiapoptotska svojstva, stimulišu sintezu proteina toplotnog šoka.

HA u životu ćelijske zajednice

GC je uključen ne samo ali i mnogi drugi organi i tkiva. A na nivou cijelog organizma, regulaciju njegove biosinteze fibroblastima provodi neuroendokrini sistem. Važnu ulogu ima hormon prednje hipofize - somatotropin, koji stimuliše deobu i sintetičku aktivnost ćelija vezivnog tkiva. Kortikotropin i glukokortikoidi (kortizon, hidrokortizon) inhibiraju diobu fibroblasta, doprinose njihovom "ubrzanom starenju", što je praćeno smanjenjem sinteze kolagena i hijaluronske kiseline. Mineralokortikoidi (aldosteron, deoksikortikosteron), naprotiv, stimulišu stvaranje HA. Sličan učinak imaju i estrogeni (vidi Dodatak „HA u ljudskom tijelu: zanimljive činjenice“).

U dermisu održavanje nivoa HA osiguravaju mehanizmi autoregulacije zasnovane na principu povratne sprege ( šema 2).

Interakcija HA sa ćelijama odvija se uz učešće specifičnih proteina - hijaladherina, koji mogu biti i elementi receptorskog aparata ćelija (RHAMM, IHABP) i ekstracelularne strukture, koje uključuju verzikan, agrekan, fibrinogen, kolagen tipa VI (videti Dodatak "Interakcija HA sa receptorima - mehanizam za sprovođenje njegove biološke aktivnosti").

U ovom trenutku vrijedi stati i razmisliti. Koji je razlog za tako široku distribuciju HA u ljudskom tijelu? A u životinjskom carstvu općenito? Šta određuje raznolikost mehanizama regulacije njegovog metabolizma? Zašto biološka aktivnost ne nestaje kako se degradira, već se mijenja? Sumirajući sve gore navedeno i gledajući unaprijed, možemo pretpostaviti da odgovor leži u raznolikosti bioloških funkcija ovog jedinstvenog biopolimera ( tabela 3).

Tabela 3. Biološka uloga hijaluronske kiseline

To je osnova hidratiziranog međućelijskog matriksa - fiziološkog okruženja za migraciju, diobu i diferencijaciju stanica.

Reguliše sintetičku aktivnost fibroblasta, uključujući ekstracelularnu fazu sinteze kolagena.

Ima indirektno imunomodulatorno dejstvo (stimulira i potiskuje imuni sistem).

Osigurava transport hranjivih tvari i signalnih molekula iz krvnih žila do stanica, kao i izlučivanje otpadnih tvari.

Pospješuje drenažu i detoksikaciju vezivnog tkiva, "zamka" je za slobodne radikale.

Osigurava regeneraciju tkiva i popravak oštećenja (plastična funkcija).

Učestvuje u regulaciji angiogeneze.

Reguliše morfogenezu tkiva tokom embrionalnog razvoja.

HA i starenje

Pitanje da li se sadržaj HA u koži mijenja s godinama ostaje diskutabilno. Međutim, pouzdano se zna da kako tijelo stari, sve veća količina HA prelazi iz slobodnog stanja u vezano (sa proteinima). Istovremeno, delimično gubi svoje jedinstvene sposobnosti, a to su: da inhibira reakcije oksidacije slobodnih radikala, da se uključi u metabolički put i stimuliše fibroblaste, da privlači i zadržava vodu. Smanjenjem sadržaja vode koža gubi elastičnost, a njen glatki reljef se deformiše borama i naborima.

U kozmetologiji najveći uspjeh imaju injekcioni postupci - konturiranje, biorevitalizacija, bioreparacija. Aktivna komponenta preparata koji se koriste za njihovu primjenu je hijaluronska kiselina (HA). Unatoč kontroverznim izjavama u medijima, hijaluronska kiselina u kozmetologiji ne gubi svoju popularnost već oko dvije decenije.

Uloga HA u ljudskom tijelu

Svi sistemi i organi se sastoje od ćelija: krv - od formiranih elemenata, jetra - od hepatocita, nervni sistem - od neurona. Prostor između svih ćelija zauzima vezivno tkivo koje čini oko 85% cijelog tijela. Kao jedinstvena struktura, on stupa u interakciju sa svim ostalim tkivima (epitelnim, nervnim, mišićnim itd.) i vrši njihovu međusobnu povezanost.

Vezivno tkivo, zavisno od svog sastava, može biti u različitim agregatnim stanjima - u tečnom (krv, limfa, sinovijalna intraartikularna i likvor), čvrstom (kosti), u obliku gela (međućelijska tečnost i hrskavica, staklasto telo oka). Najpotpunije je prisutan u strukturama kože - dermisu, hipodermalnom i bazalnom sloju.

Vezivno tkivo se razlikuje od ostalih tkiva u tijelu po visokoj razvijenosti baze s relativno malim brojem ćelijskih struktura. Osnovu čine vlakna elastina i kolagena, kao i složeni molekularni proteini i jedinjenja aminokiselina sa amino šećerima. Najvažnija od njih je hijaluronska kiselina.

Jedan HA molekul je sposoban da veže oko 500 molekula vode. U ljudskom tijelu srednje dobi sintetizira se fibroblastima u količini od 15-17 g. Polovina se nalazi u ćelijama stratum corneuma kože, kao i između vlakana elastina i kolagena. Stimuliše proizvodnju ovih proteina, stvara uslove za njihovu fiksiranu lokaciju, dajući tako čvrstoću i elastičnost koži.

Video

Procesi starenja tkiva

Pod uticajem enzima hijaluronidaze dolazi do uništavanja hijaluronske kiseline. Procesi njegovog oporavka i cijepanja odvijaju se kontinuirano. Oko 70% je uništeno i obnovljeno u roku od jednog dana. Prevlast jednog ili drugog procesa zavisi od:

  • dnevni i sezonski bioritmovi;
  • Dob;
  • psihološko stanje;
  • loša prehrana;
  • trovanje nikotinom i prekomjerno izlaganje UV zračenju;
  • uzimanje određenih lijekova itd.

Ovi faktori utiču ne samo na sintezu HA (hijaluronata), već i na njegovu strukturu. Smanjenje njegove količine dovodi do smanjenja vezane vode u tkivima i pojave znakova njihovog starenja. Defektni molekuli zadržavaju sposobnost da vežu vodu, ali gube sposobnost da je odaju. Osim toga, prirodni procesi starenja dovode do koncentracije HA u dubokim slojevima kože, što uzrokuje edem međućelijskog tkiva na granici dermisa i hipoderme i dehidraciju više površinskih slojeva.

Svi ovi procesi sa starenjem i pod uticajem negativnih faktora povećavaju se i dovode do suhe kože uz istovremeno natečenost lica i otoka ispod očiju, smanjenje njene elastičnosti i čvrstoće, pojavu bora i pigmentacije.

Vrste HA u tijelu

Njegova jedinstvenost leži u prisustvu molekula sa različitim dužinama lanaca polisaharida. Svojstva hijaluronske kiseline i njen efekat na ćelije u velikoj meri zavise od dužine lanca:

  1. Molekule sa kratkim lancem, ili hijaluronska kiselina niske molekularne težine - imaju protuupalni učinak. Ova vrsta kiseline koristi se za liječenje opekotina, trofičnih čireva, akni, psorijaze i herpetičnih erupcija. Koristi se u kozmetologiji kao jedna od komponenti tonika i krema za vanjsku upotrebu, jer, ne gubeći svojstva, dugo prodire duboko u kožu.
  2. HA srednje molekularne težine, koji ima svojstvo suzbijanja migracije, reprodukcije ćelija itd. Koristi se u liječenju očiju i određenih vrsta artritisa.
  3. Visokomolekularni - stimuliše ćelijske procese u koži i ima sposobnost zadržavanja velikog broja molekula vode. Koži daje elastičnost i visoku otpornost na vanjske negativne faktore. Ova vrsta se koristi u oftalmologiji, hirurgiji, te u kozmetologiji - u pripremama za tehnike injektiranja.

industrijski pogledi

U zavisnosti od tehnologije proizvodnje, natrijum hijaluronat se deli na dve vrste:

  1. Dugo su se koristili preparati sa hijaluronskom kiselinom životinjskog porijekla. Dobiven je enzimskim cijepanjem zgnječenih dijelova životinja (oči i hrskavice goveda, pijetlovi saćuši, sinovijalna intraartikularna tekućina, pupčane vrpce) kao rezultat posebnog dvostepenog prečišćavanja i precipitacije. Tehnologija je podrazumevala upotrebu destilovane vode i visoke temperature (85-100 stepeni). Značajan dio frakcije visoke molekulske mase je uništen, pretvarajući se u frakciju niske molekulske mase. Osim toga, bilo je proteina životinjskog porijekla.

    Učinak nakon injekcija takvih lijekova u svrhu kozmetičke korekcije lica nije dugo trajao, ponekad je pridonio stvaranju dermalnih čvorova. Ali lijek je bio posebno opasan jer je često izazivao izražene upalne i alergijske reakcije zbog prisustva životinjskih proteina. Stoga se ova tehnologija gotovo nikada ne koristi.

  2. Nedavno se HA proizvodi u farmaceutskoj industriji biotehnološkom sintezom. U te svrhe koriste se mikroorganizmi (streptokoki) uzgojeni u pšeničnom bujonu. Oni proizvode hijaluronsku kiselinu, koja se u narednim fazama pročišćava, suši i podvrgava ponovljenim bakteriološkim i hemijskim studijama. Takav lijek gotovo u potpunosti odgovara kiselini proizvedenoj u ljudskom tijelu. Gotovo da ne izaziva alergijske i upalne reakcije.

Primjena u kozmetologiji

Hijaluronska kiselina se koristi za injekcije u kožu i potkožne slojeve različitim metodama:

  1. Injekciono.
  2. Bez injekcije.

Postupci injekcije hijaluronske kiseline koriste se u metodama kao što su:

  • i - unošenje lijeka u srednje slojeve kože; koristi se kod starosnih promjena, isušivanja kože i povećanja njene elastičnosti, tonusa i boje, eliminacije akni, strija itd.; trajanje očuvanja hijaluronske kiseline u dermisu - do 14 dana;
  • - punjenje potkožnih struktura supstancom u cilju zaglađivanja bora i korekcije kontura lica; lijek se čuva pod kožom 1-2 sedmice;
  • i - primjena modificirane hijaluronske kiseline koja ostaje u koži do 3 sedmice.

Pitanja

Šta je bolje: botoks ili HA?

S obzirom na višesmjerne mehanizme djelovanja botoksa i hijaluronske kiseline, koriste se za postizanje različitih efekata. Možda njihova kombinacija. Međutim, treba imati na umu da nakon uvođenja moraju proći najmanje dvije sedmice.

Da li je moguće kombinirati uvođenje kolagenskih filera i HA?

Fileri na bazi kolagena i HA su dobro kombinovani. Prvi daje koži gustinu i strukturu i traje u prosjeku 4 mjeseca, drugi pruža prirodnu hidrataciju i snagu 6-9 mjeseci.

Bilo kakvu primjenu injekcija hijaluronske kiseline smije provoditi samo kozmetolog.

Hijaluronska kiselina otkrivena 1934. godine, njena prva detaljna istraživanja počela su da se provode 1949-1950. Ova supstanca je izolovana iz različitih životinjskih tkiva - zglobne tečnosti, pupčane vrpce i tkiva pijetovog češlja. Osim toga, 1937. godine, hijaluronska kiselina je dobijena iz kapsula streptokoka. Prve studije fizičkih i hemijskih svojstava hijaluronske kiseline sprovedene su rendgenskom kristalografijom.

Problemi pri dobijanju GC

Glavni problem u proučavanju hijaluronske kiseline, na koji su se naučnici susreli, bila je poteškoća da se ona izoluje u svom čistom obliku, pročišćenoj od proteina i drugih komponenti. Poteškoća je nastala jer je uvijek postojao rizik od uništenja polimerne strukture hijaluronske kiseline tokom procesa prečišćavanja. Istovremeno, naučnici su isprobali različite metode fizičkog, hemijskog i enzimskog prečišćavanja.

Nešto kasnije počela su istraživanja o mogućnosti biosinteze hijaluronske kiseline. 1955. prvi put je pronađena takva metoda. Grupa naučnika izolovala je molekule hijaluronske kiseline iz ekstrakta streptokoka. Zahvaljujući ovom otkriću, postalo je moguće sintetizirati hijaluronsku kiselinu - koristeći enzimsku frakciju uzetu iz streptokoka.

Hijaluronska kiselina - Primjena

Veliki napredak u upotrebi hijaluronske kiseline dogodio se 1950-ih. Zahvaljujući otkriću ove supstance za upotrebu u medicini, započela je njena industrijska proizvodnja i popularizacija kao lijeka.

Godine 1970. hijaluronska kiselina je odobrena kao dokazano efikasan tretman za artritis nakon pozitivnih rezultata testiranja na životinjama. Kao rezultat eksperimenta, zabilježen je izražen klinički učinak sa smanjenjem simptoma.

Nekoliko godina kasnije, hijaluronska kiselina je počela da se koristi kao deo implantabilnih intraokularnih sočiva, što ju je brzo učinilo jednom od najčešće korišćenih komponenti u oftalmološkoj hirurgiji. Od tog trenutka počele su se predlagati i testirati različite metode i primjene hijaluronske kiseline.

GC danas

90-ih godina hijaluronska kiselina našla je široku primenu u estetskoj medicini i kozmetologiji, zbog svog jedinstvenog zadržavanja vlage, kao i antiseptičkih i antioksidativnih svojstava. Do danas se koristi u različite kozmetičke svrhe, a istraživanja o njegovim svojstvima i mogućim primjenama se nastavljaju.

Danas su spominjanja hijaluronske kiseline prepuna i sjajnih publikacija i stranica običnih medija. Proteklih godina nam stalno govore da je “otkrivena tajna vječne mladosti kože” i nude korištenje ovog “eliksira”. Pokušajmo shvatiti što je više u ovoj nezdravoj reklami - istinitih informacija, tačne komercijalne računice ili banalnih filistarskih zabluda.

Otkrića prošlosti koja nisu opravdala očekivanja

Ako pogledate u nedavnu prošlost, možete se sjetiti da je već bilo sličnih situacija u povijesti medicine:

  • Otkriće penicilina predstavljeno je kao potpuna pobeda nad mikroorganizmima (što se, nažalost, nije dogodilo, uprkos trenutnom spektru).
  • Za proizvedeni inzulin je prorečena pobeda (lek za dijabetičare je vitalan i bitan, ali je potpuna pobeda nad dijabetesom još uvek veoma daleko).
  • Upotreba prvih neuroleptika je reklamirana kao prilika za izliječenje određenih psihičkih poremećaja, ali i ovdje je sve daleko od idealnih očekivanja.

Općenito, prava slika nakon nekog vremena još uvijek se razlikuje od prognoza i početnih procjena. Stoga je vrlo važno da se prema svemu odnosimo kritički i što objektivnije.

Razotkrivanje mitova o hijaluronskoj kiselini

Niko od doktora neće tvrditi da je hijaluronska kiselina važna za ljudski organizam, ali količina informacija koja se danas može pronaći u medijima i koja se provlači kao istina, nažalost, ne dolazi nam od profesionalaca. Najčešće inovativne misli ljudima donose razni stručnjaci za ljepotu, samouki blogeri i drugi ljudi bez specijaliziranog medicinskog, farmaceutskog ili biološkog obrazovanja. Oni govore o drogi na osnovu vlastitih evaluacijskih utisaka, informacija iz sumnjivih izvora ili informacija izvučenih iz konteksta.

Tako se rađaju zablude. Pokušajmo odvojiti žito od kukolja i detaljnije razumjeti ovo pitanje.

Tačno

Glavna zabluda je da se lijek naziva u jednini, a ispravno je nazvati ga u množini - kiseline, budući da je to jedno od jedinjenja grupe kiselih mukopolisaharida, koja uključuje i druga jedinjenja sličnog sastava i svojstava, a njihova masa može znatno varirati. Budući da se velika većina lijekova koji izlaze pod nazivom "hijaluronska kiselina" proizvode od bioloških sirovina bez posebnog odvajanja frakcija, potpuno je netačno smatrati lijek jednim, čistim spojem.

Hijaluronska kiselina je rezultat otkrića kozmetičkih laboratorija u protekle dvije do tri decenije.

Sama supstanca je otkrivena daleke 1930. godine, a proučavanje njenih svojstava, funkcija, kao i mogućnosti primjene pristupilo se skoro odmah nakon otkrića. Sama istraživanja nisu prestala, a počevši od 70-ih godina prošlog vijeka njihov intenzitet je počeo da raste.

Ova tvar se koristi u kozmetičkim i kozmetološkim proizvodima.

Pored ovog razvijenog pravca, hijaluronska kiselina se kao lek koristi i kod raznih oboljenja drugih organa i sistema.

U kozmetičkim proizvodima poboljšava prodiranje hranjivih tvari u kožu

Ne utiče na nivo ćelijske i međućelijske permeabilnosti za različite supstance

Starenje kože povezano je sa gubitkom tečnosti usled smanjenja nivoa supstanci ove grupe u svim slojevima kože.

Ako se smanjenje sadržaja hijaluronata događa s godinama, onda to nije toliko značajno, a starenje, uključujući kožu, je najsloženiji višestruki opći biološki proces i jednostavno je glupo svesti njegove manifestacije na tako banalne razloge.

Istina o hijaluronskoj kiselini

Sva svojstva i karakteristike i karakteristične osobine hijaluronske kiseline detaljno su opisane u naučnoj i medicinskoj literaturi. Međutim, on je prezasićen mnogim pojmovima, zbog čega prosječnom laiku dostupne informacije nisu uvijek jasne.

Ako pokušamo sve malo pojednostaviti, ispada da:


Svaka frakcija ima svoj skup svojstava i karakteristika. Dakle sorte niske molekularne težine tvari imaju odlično protuupalno djelovanje, što je osiguralo njihovu primjenu kod opekotina, trofičnih čireva, herpetičnih erupcija, psorijaze . Hijaluronska kiselina srednje molekularne težine može inhibirati reprodukciju i migraciju stanica. Zbog ovih svojstava koristi se u liječenju određenih artritisa i očnih bolesti. Frakcije velike molekularne težine drže ogroman broj molekula vode oko sebe i stimulišu ćelijske procese u samoj koži. Ova vrsta hijaluronske kiseline našla je svoju primenu u hirurgiji, oftalmologiji i kozmetologiji.

Važno je znati! Kategorično je nemoguće koristiti lijek s neodređenom veličinom molekula aktivne tvari, jer ne samo da ne možete postići željeni rezultat, već i pogoršati stanje.

Glavne indikacije za upotrebu hijaluronske kiseline

Uvijek treba imati na umu da je unošenje lijekova u tijelo injekcija hijaluronske kiseline je prvenstveno medicinska manipulacija. Postoje prilično strogi medicinski kriteriji za korištenje različitih tehnika i postupaka.

Dakle, glavne indikacije za upotrebu hijaluronske kiseline su:

  • pojava bora (smanjenje turgora kože) zbog gubitka vlage;
  • povećanje jačine postojećih bora;
  • izražene mimičke bore;
  • potreba za normalizacijom reljefa kože;
  • potreba za poboljšanjem turgora i konture crvene ivice usana.

Preparati hijaluronske kiseline u estetskoj medicini

U modernoj kozmetologiji potražnja za hijaluronskom kiselinom u obliku injekcija ili drugih oblika lijeka objašnjava se:


Moderno farmakološko tržište nudi hijaluronsku kiselinu u obliku injekcija. U ovom slučaju može biti u obliku:

  • Mezokoktel, koji uključuje glavnu supstancu, dopunjenu pantenolom, vitaminima, koenzimima, faktorima rasta ćelija, peptidima, itd.
  • Fillerov- dermalni filer napravljen od umreženog HA, koji se vremenom biorazgradi - apsorbira se u tijelu. Dostupan u obliku gela različitog stepena viskoznosti. Što je supstanca viskoznija, to je s više problema dizajnirana da se nosi.
  • Redermalizanti i biorevitalizanti. Trenutno se na policama ljekarni mogu naći 3 generacije ovih lijekova. Potonje se baziraju na nukleinskim kiselinama koje stvaraju komplekse s HA ​​koji mogu obnoviti ćelijski DNK i ubrzati proizvodnju vlastite hijaluronske kiseline, kao i elastina i kolagena.
  • Bioreparanti- preparati koji sadrže izmijenjenu HA, za čiji lanac su vezani peptidi, vitamini, aminokiseline. Imaju produženo i pojačano dejstvo.

Bilješka: masti, kreme, gelovi, losioni za vanjsku upotrebu mogu se koristiti u industriji ljepote, ali je njihova efikasnost mnogo niža od hijaluronske kiseline za injekcije.

Glavne vrste postupaka za poboljšanje stanja kože lica

Najpopularniji postupci ubrizgavanja hijaluronske kiseline su:


Glavne kontraindikacije za upotrebu hijaluronske kiseline

Ako vas trgovci pokušavaju uvjeriti da su injekcije hijaluronske kiseline, gdje god da se rade, što sigurnije, treba da znate: ovo je laž! U pozadini određenih postupaka, oni su zaista sigurniji, međutim, ovaj lijek ima i svoje kontraindikacije.

Među glavnim su:

  1. Bilo kakve alergijske reakcije na aktivnu tvar ili njene komponente.
  2. Bilo koje zarazne bolesti u akutnom periodu.
  3. Trudnoća, porođaj i kasnija laktacija.
  4. Patologija vezivnog tkiva.
  5. Opće i sistemske bolesti, kao što su autoimune lezije, onkološka patologija bilo kojeg organa i sistema, šećer, patologija sistema zgrušavanja krvi.

Osim toga, na mjestu ubrizgavanja ne smiju se nalaziti madeži, madeži, ožiljci i upalni procesi. Ako se ove kontraindikacije ne poštuju, rezultati mogu biti katastrofalni.

Efikasnost krema sa hijaluronskom kiselinom

Posebna grupa lijekova, i prilično česta, su kreme s hijaluronskom kiselinom. Nanose se nanošenjem na površinu kože, gdje postižu trenutni učinak.

Za površinske promjene, zaštitu kože koriste se proizvodi koji sadrže visokomolekularne frakcije, koji stvaraju zaštitni sloj i ne prodiru u kožu.

Za korekciju dubokih promjena vezanih za starenje, bolje su prikladna sredstva s niskim molekularnim udjelom aktivne tvari, jer ona može djelomično prodrijeti do određene dubine u unutrašnje slojeve, gdje se ostvaruje njihov biološki učinak.

U posljednje vrijeme sve su popularnije neinjekcione metode, koje uključuju nanošenje gela na kožu, nakon čega slijedi izlaganje mikrostrujama, laseru i ultrazvuku.

Završio bih savjetom: sve ima svoje vrijeme i svoje razloge, a glavno pravilo zdravog života, dobrog raspoloženja i lijepog izgleda je umjerenost. U potrazi za ljepotom, pokušajte koristiti čak i takav proizvod kao što je hijaluronska kiselina, bez nabora, a vaša koža će izgledati dobro čak i u dubokoj starosti.

Za više informacija o upotrebi preparata hijaluronske kiseline za lice, dobićete gledajući video recenziju:

Sovinskaya Elena Nikolaevna, terapeut.