Dependențe nocive 

Sinteza acidului hialuronic. Structura și aplicarea în medicină a acidului hialuronic. Rolul fiziologic al polimerilor hialuronici

Acidul hialuronic [HA] se găsește în matricea extracelulară a țesuturilor vertebratelor, în învelișul de suprafață al anumitor specii de Streptococcus și a agenților patogeni bacterieni Pasteurella și pe suprafața unor alge parțial infectate cu virus. Sintazele acidului hialuronic [HAS] sunt enzime care polimerizează HA folosind precursori de zahăr UDP găsiți în membranele exterioare ale acestor organisme. Genele GCS au fost identificate din toate sursele de mai sus. Se pare că există două clase distincte de GCS bazate pe diferențele în secvența de aminoacizi, topologia prezisă în membrană și mecanismul de reacție propus.

Toate GCS au fost identificate ca sintaza de clasa I, cu excepția GCS la specia Pasteurella. A fost de asemenea explicat modul catalitic de funcționare al unui singur GCS de clasă II (pmGCS). Această enzimă extinde acceptorii externi de oligozaharide atașați de HA prin adăugarea de unități individuale de monozaharide la capătul care nu se micșorează pentru a forma polimeri lungi in vitro; nici un GCS Clasa I nu are această capacitate. Modul și direcția polimerizării HA catalizate de GCS clasa I rămân neclare. Enzima pmGCS a fost, de asemenea, analizată pentru cele două activități ale sale: GlcUA transferaza și GlcNAc transferaza. Astfel, două situsuri active există într-o polipeptidă pmGCs, respingând dogma larg acceptată a glicobiologilor: „o enzimă – un zahăr modificat”. Dovezile preliminare sugerează că enzimele de clasa I pot avea, de asemenea, două locuri de activitate.

Potențialul catalitic al enzimei pmGCs poate fi utilizat pentru a crea noi polizaharide sau pentru a proiecta oligozaharide. Datorită numeroaselor terapii medicale potențiale pe bază de HA, această tehnologie chimioenzimatică este promițătoare pentru căutarea noastră pentru o sănătate bună.

Cuvinte cheie

Acid hialuronic (HA), condroitină, glicoziltransferază, sintază, cataliză, mecanism, polizaharide himerice, oligozaharide monodisperse

Introducere

Hialuronanul [HA] este un glicozaminoglican foarte bogat la vertebrate, cu roluri atât structurale, cât și de semnalizare. Anumite bacterii patogene, și anume grupele A și C ale speciei Streptococcus și tipul A de Pasteurella multocida, produc o acoperire extracelulară de HA numită capsulă. În ambele tipuri de HA, capsula este factorul de virulență, care oferă bacteriilor rezistență la fagocite și complementaritate. Un alt organism care produce HA este algele marine Chlorella, care este infectată cu un anumit virus ADN dublu catenar mare, PBCV-1. Rolul HA în ciclul de viață al acestui virus nu este clar momentan.

Figura 1. Reacția biosintetică a HA.

Enzimele din clasa glicoziltransferazelor care polimerizează HA se numesc HA sintetaze (sau GCS), conform vechii terminologii, care include și sintetazele HA. Toate sintazele HA cunoscute sunt variante ale unei singure polipeptide responsabile de polimerizarea lanțului de HA. Precursorii de zahăr UDP, UDP GlcNAc și UDP GlcUA, sunt utilizați de HA sintetaza în prezența unui cation divalent (Mn și/sau Mg) la pH neutru (Fig. 1). Toate sintazele sunt proteine ​​legate de membrană în celula vie și se găsesc în fracțiunea de membrană după liza celulei.

Între 1993 și 1998, streptococul grup A și C HA sintetaze [spGCS și, respectiv, sEGCS], HA sintetaza de vertebrate [GCS 1,2,3], virusul algelor HA sintaza [svGCS] și, de asemenea, HA sintetaza tip A din specia Pasteurella multocida [pmGCS]. Primele trei tipuri de HA sintetaze par a fi foarte asemănătoare ca mărime, secvență de aminoacizi și topologia membranei prezisă. Sintaza Pasteurella HA, dimpotrivă, este mai mare și are o secvență semnificativ diferită și o topologie prezisă față de alte sintetaze. Prin urmare, am emis ipoteza existenței a două clase de HA sintetaze (Tabelul 1). Enzimele de clasa I includ proteine ​​streptococice, vertebrate și virale, în timp ce Pasteurella este în prezent singurul membru al clasei II. Avem, de asemenea, unele dovezi că procesele catalitice ale enzimelor de clasa I și clasa II sunt diferite.

Tabelul 1. Două clase de HA sintetaze:

Deși Pasteurella HA sintetaza a fost ultima enzimă descoperită, mai multe caracteristici ale pmGC au făcut din aceasta un progres semnificativ în studiul său, în comparație cu unii membri ai enzimelor de clasa I care au fost studiate timp de patru decenii. Caracteristica cheie a pmGC-urilor, care a făcut posibilă clarificarea direcției moleculare a polimerizării și identificarea celor două situsuri active ale sale, este capacitatea pmGC-urilor de a alungi oligozaharida acceptor situată extern. PMGC recombinant adaugă monozaharide individuale într-o manieră repetitivă la o oligozaharidă asociată cu HA in vitro. Caracteristica intrinsecă a fiecărui transfer de monozaharide este responsabilă pentru formarea unei repetări alternative a dizaharidelor în acel glicozaminoglican; nu este necesară formarea simultană a unității dizaharidice. Pe de altă parte, nu s-a dovedit o astfel de extindere a acceptoarelor externe pentru nicio enzimă de clasă I. Prin cercetări științifice de bază, am dezvoltat acum câteva aplicații biotehnologice ale remarcabilei proteine ​​din clasa Pasteurella HA sinttazei.

Materiale și metode

Reactivi

Toți reactivii de biologie moleculară nemarcați au fost de la Promega. Oligonucleotidele standard au fost de la Great American Gene Company. Toți ceilalți reactivi de puritate ridicată, cu excepția cazului în care se menționează altfel, au fost de la Sigma sau Fisher.

Trunchierea pmGC-urilor și a mutanților punctiformi

Un număr de polipeptide trunchiate au fost produse prin amplificarea inserției pPm7A prin reacția în lanț a polimerazei cu polimerază Taq (Fisher) și primeri oligonucleotidici sintetici corespunzători diferitelor părți ale pmGC, cu un cadru de citire deschis. Ampliconii au fost apoi donaţi în plasmida de expresie pKK223-3 (promotorul tac, Pharmacia). Construcțiile recombinante rezultate au fost transformate în celule ale tulpinii de Escherichia coli TOP 10F" (Invitrogen) și crescute pe mediu LB (Luria-Bertani) cu selecție de ampicilină. Mutațiile au fost făcute folosind metoda QuickChange de mutageneză direcționată (Stratagene) cu plasmida pKK /pmGCs ca probă de ADN.

Prepararea enzimelor

Pentru a prepara o membrană care conține pmGCS recombinant de lungime completă, pmGK1-972 a fost izolat din E. coli așa cum este descris. Pentru proteinele pmGCs trunchiate solubile, pmGCs1-703, pmGCs1-650 și pmGCs1-703 care conțin mutanți, celulele au fost extrase folosind reactivul de extracție a proteinelor bacteriene B-PerTM II (Pieree) conform instrucțiunilor producătorului, cu excepția faptului că procedura a fost efectuată la 7 °C în prezența inhibitorilor de protează.

Căile enzimatice de polimerizare a HA. modificarea GlcNAc sau modificarea GlcUA

Au fost concepute trei variante pentru a detecta dacă (a) polimerizarea lanțurilor lungi de HA sau (b) adăugarea unui singur GlcNAc la o oligozaharidă acceptor HA GlcUA-terminal sau (c) adăugarea unui singur GlcUA la o oligozaharidă acceptor HA GlcNAc-terminal . Activitatea totală a GCS a fost evaluată pentru o soluție care conține 50 mM Tris, pH 7,2, 20 mM MnCl2, 0,1 M (NH4)2SO4, 1 M etilenglicol, 0,12 mM UDP-(14C)GlcUA (0,01 μCi; NEN), 0.3 mM. UDP-GlcNAc și un set diferit de oligozaharide HA obținute din testicule prin tratament cu hialuronidază [(GlcNAc-GlcUA)n, n= 4-10] la 30°C timp de 25 minute într-un volum de amestec de reacție de 50 μl. Activitatea GlcNAc-transferazei a fost evaluată timp de 4 minute în același sistem tampon cu un set diferit de oligozaharide GA, dar cu un singur zahăr ca precursor, 0,3 mM UDP-(3H)GlcUA (0,2 μCi; NEN). Activitatea GlcUA-transferazei a fost evaluată timp de 4 minute în același sistem tampon, dar cu doar 0,12 mM UDP-(14C)GlcUA (0,02 µCi) și un set ciudat de oligozaharide HA (3,5 µg acid uronic) preparat prin expunere la acetat de mercur pe Streptomyces HA-liaza. Reacțiile au fost încheiate prin adăugarea de SDS la 2% (g/v). Produșii de reacție au fost separați de substraturi prin cromatografie pe hârtie (Whatman 3M) ​​cu etanol/sulfat de amoniu 1 M, pH 5:5 ca solvent principal (65:35 pentru testul GCS și GlcUA-Tase; 75:25 pentru GlcNAc -Tază de tază). Pentru evaluarea GCS, o probă de bandă de hârtie a fost spălată cu apă și asocierea zaharurilor radioactive în polimerul HA a fost detectată prin scintilație fluidă calculată folosind cocktail-ul BioSafe II (RPI). Pentru reacțiile de jumătate de test, proba și benzile de 6 cm din aval au fost numărate în incremente de 2 cm. Toate experimentele de evaluare au fost calculate a fi liniare cu timpul de incubare și concentrația de proteine.

Cromatografie prin filtrare pe gel

Mărimea polimerilor HA a fost analizată cromatografic pe coloane Phenomenex PolySep-GFC-P 3000, eluând cu azotat de sodiu 0,2 M. Coloana a fost standardizată cu dextrani fluorescenți de diferite dimensiuni. Componentele radioactive au fost detectate folosind senzorul LB508 Radioflow (EG&G Berthold) și un cocktail Zinsser. În comparație cu evaluarea completă a GCS folosind cromatografia pe hârtie descrisă mai sus, aceste reacții de 3 minute au conținut de două ori concentrațiile de zahăr UDP, 0,06 μCi UDP-(14C)GlcUA și 0,25 ng din gama HA de oligozaharide. În plus, a fost utilizată adăugarea de etilendiamină acidului tetracilic la reflux (2 minute) (concentrație finală 22 mM) pentru a finaliza reacțiile în loc să se adauge SDS.

rezultate si discutii

Utilizarea și specificitatea acceptorului GCS

Mai multe oligozaharide au fost testate ca acceptori pentru pmGCS1-972 recombinant (Tabelul 2). Oligozaharidele HA au fost obținute din testicule prin scindarea hialuronidază și prelungite prin PMGC-uri cu zaharuri UDP adecvate. Reducerea cu borohidrat de sodiu nu perturbă activitatea acceptorului. Pe de altă parte, oligozaharidele derivate din HA prin scindarea lază nu suportă alungirea; reziduurile terminale deshidratate, nesaturate, nereduse ale GlcUA necesită grupări hidroxil pentru a atașa zahărul primit de la precursorul UDP. Prin urmare, alungirea catalizată de pmGC are loc în cazul grupurilor terminale nereduse. Într-un număr de experimente paralele, s-au găsit forme recombinante ale sintazelor de clasa I, spGCS și x1GCS, care nu alungesc acceptorii derivați de HA. Având în vedere direcția activității enzimelor de clasa I, au fost făcute rapoarte contradictorii și sunt necesare cercetări suplimentare.

Tabelul 2. Specificitatea acceptoarelor de oligozaharide pmGC:

Interesant, pentamerul de sulfat de condroitină este un bun acceptor pentru pmGCS. Alte oligozaharide înrudite structural, cum ar fi chitotetroza sau pentamerul heparosan, totuși, nu servesc ca acceptori PMGC. În general, pmGC-urile par să necesite oligozaharide acceptoare care conțin GlcUA legate β. Emitem ipoteza că locul de legare a oligozaharidelor este intermediar în lanțul de retenție a HA în timpul polimerizării.

Analiza moleculară a activității transferazei pmGC: două situsuri active într-o polipeptidă

Capacitatea de a măsura cele două componente ale activității glicoziltransferazei HA sintetazei, GlcNAc-transferaza și GlcUA-transferaza, a permis analiza moleculară a PMGC. Am observat că un scurt motiv de secvență duplicat: Asp-Gly-Ser (Acid aspartic-ta-Glycine-Serine) a fost prezent în pmGCS. Dintr-o analiză comparativă a grupărilor hidrofobe ale multor alte glicoziltransferaze care produc polizaharide sau oligozaharide legate de p, s-a sugerat că, în general, există două tipuri de domenii: regiunile „A” și „B”. PMGC, o sintază de clasa II, este unică prin faptul că conține două domenii „A” (comunicare personală, B. Henrissat). S-a propus ca anumiți membri ai HA sintetazei de clasa I (spGCS) să conțină regiuni unice „A” și unice „B”. Diferiți mutanți de ștergere sau punctuali ai pmGC au fost evaluați pentru capacitatea lor de a polimeriza lanțurile de HA sau capacitatea lor de a adăuga un singur zahăr la o oligozaharidă acceptor de HA (Tabelul 3). Rezumând cele de mai sus, pmGCS conține două site-uri active distincte. Mutageneza motivului DGS aspartat (reziduul 196 sau 477) la ambele locuri a dus la o pierdere a polimerizării HA, dar activitatea celuilalt situs a rămas relativ neafectată. Astfel, activitatea duală a HA sintetazei a fost transformată în două acțiuni individuale diferite ale glicoziltransferazei.

Tabelul 3. Activitatea pmGCS cu o mutație punctiformă sau un loc șters.

Îndepărtarea ultimelor 269 de reziduuri din gruparea carboxil terminală a transformat proteina de membrană slab exprimată într-o proteină solubilă bine exprimată. Cu toate acestea, luarea în considerare a secvenței de aminoacizi a proteinei pmGCs în această regiune nu arată caracteristici tipice ale structurii secundare care ar asigura interacțiunea directă a enzimei cu stratul dublu lipidic. Am înaintat o ipoteză că gruparea carboxil terminală a enzimei catalitice pmGCs se acoperă cu aparatul de transport polizaharid legat de membrană de direcție al celulei bacteriene vii.

Prima regiune „A” a pmGC-urilor, A1, este o GlcNAc-tază, în timp ce a doua regiune „A”, A2, este o GlcUA-tază (Fig. 2). Aceasta este prima identificare a două situsuri active pentru o enzimă care produce o heteropolizaharidă, precum și o dovadă clară că o enzimă poate transmite într-adevăr două zaharuri diferite. S-a găsit o enzimă de tip non-F din specia P. multocida, numită pmCS, care catalizează formarea polimerului de condroitină nesulfatant. HA și condroitina sunt identice ca structură, cu excepția polimerului menționat mai sus, care conține N-acetilglucozamină în loc de GlcNAc. Atât pmGC cât și pmCS sunt 87% identice la nivel de aminoacizi. Majoritatea modificărilor reziduurilor sunt în regiunea A1, ceea ce este destul de consistent cu ipoteza că această regiune este responsabilă pentru transferul de hexozamină.

Figura 2. Reprezentarea schematică a regiunilor pmGCS.
Două domenii independente de transferază, A1 și A2, sunt responsabile pentru catalizarea polimerizării lanțului de HA. Adăugările succesive repetate de zaharuri individuale construiesc rapid lanțul de HA. Se pare că capătul carboxil al pmGC interacționează într-un fel cu aparatul de transport legat de membrană al celulei bacteriene.

Figura 3. Modelul biosintezei HA folosind pmGC.
Zaharuri simple sunt adăugate la fiecare domeniu "A" în mod repetat la capătul nereducător al lanțului de HA. Precizia internă a fiecărei etape a activității transferazei menține repetarea structurii dizaharidei HA. Lanțul HA în curs de dezvoltare este probabil reținut de PMGC-uri în timpul catalizei prin situsul de legare a oligozaharidelor.

Am demonstrat un transfer eficient de zahăr cu pmGC in vitro în mai multe tipuri de experimente, așa că am emis ipoteza că lanțurile de HA sunt formate prin adăugarea rapidă și repetitivă a unui singur zahăr de către sintaza de clasa II (Fig. 3). Până acum, o linie de dovezi sugerează că enzima de clasa I posedă și două situsuri de transferaze. S-a raportat că mutația reziduului de leucină 314 la valină în mmGCS1, în parte a pre-situtului tazei GlcUA, a transformat acest GCS de vertebrat în chito-oligozaharid sintază. Nu a fost identificat niciun loc cu activitate GlcNAc-transferaza corespunzătoare.

Grefarea polimerilor cu polizaharide sintetaze: adăugarea de HA la molecule sau particule solide

Studiul pmGC într-un laborator de cercetare a transformat conceptul de sintetaze HA dintr-un tărâm de monștri dificili și tenace asemănătoare animalelor în potențiali cai de bătaie biotehnologic. Pot fi formate noi molecule folosind capacitatea pmGC de a grefa lanțuri lungi de HA pe lanțuri scurte derivate de HA sau acceptori derivați de condroitină. De exemplu, acceptori utili pot consta din molecule mici sau medicamente cu lanțuri de HA sau condroitină-oligozaharide legate covalent (lungime de 4 zaharuri, de exemplu). Alternativ, lanțurile HA pot fi adăugate la un primer oligozaharid imobilizat pe o suprafață solidă (Tabelul 4). Astfel, lanțurile lungi de HA pot fi adăugate ușor substanțelor sensibile sau dispozitivelor delicate.

Într-o altă aplicație, pot fi formate noi polizaharide himerice deoarece utilizarea pmGC de către un acceptor de oligozaharide nu este la fel de strictă ca specificitatea transferazei zaharide. Condroitina și sulfatul de condroitin sunt recunoscuți ca acceptori ai pmGC și sunt alungite de GC cu un lanț de diferite lungimi (Fig. 4). În schimb, pmCS, care este foarte omolog cu condroitin sintaza, recunoaște și alungește acceptorii de HA cu lanțuri de condroitină. Moleculele himerice de glicozaminoglican sunt formate care conțin compuși de legătură specifici naturali. Aceste polizaharide grefate pot servi pentru a se atașa de o celulă sau țesut care leagă HA de o altă celulă sau țesut care leagă condroitina sau sulfatul de condroitin. În anumite aspecte, glicozaminoglicanii grefați seamănă cu proteoglicanii, care sunt componente esențiale ale matricei în țesuturile vertebrate. Dar din moment ce nu sunt prezenți linkeri proteici în polimerii himeri, problemele de antigenicitate și proteoliză din jurul utilizării medicale a proteoglicanilor sunt eliminate. Riscul de transmitere a agenților infecțioși din țesuturile extrase din animale la pacientul uman este, de asemenea, redus prin utilizarea polimerilor himerici.

Tabelul 4. Grefarea HA inițiată de PMGC pe margele de poliacrilamidă. Amestecul de reacție conține pmGC purtând marcajul radioactiv UDP-(14C)GlcUA și UDP-(3H)GlcNAc, precum și diverși primeri de zahăr imobilizați (acceptori cuplati prin aminare reductivă în perle amino). Granulele au fost spălate și încorporate radioactiv în alte perle măsurate prin metoda de calcul a scintilației lichide. Lanțurile de HA au fost grefate pe margele de plastic folosind un primer adecvat și pmGC.

Figura 4. Reprezentarea schematică a structurilor polizaharide grefate. Pasteurella HA sintetaza sau condroitin sintaza vor alungi anumiți alți polimeri la capătul nereducător in vitro pentru a forma noi glicozaminoglicani himeri. Sunt prezentate câteva exemple.

Sinteza HA monodispersă și oligozaharide legate de HA

Pe lângă adăugarea unui lanț polimeric mare de HA la moleculele acceptoare, PMGC-urile sintetizează anumite oligozaharide HA mai mici, variind de la 5 la 24 de zaharuri. Folosind enzima de tip sălbatic și diferite condiții de reacție, s-a obținut relativ ușor o oligozaharidă HA care conține 4 sau 5 monoaharide extinse cu câteva zaharuri la versiuni mai lungi, care sunt foarte adesea greu de obținut în cantități mari. Am descoperit că prin combinarea unui mutant GlcUA-Tază solubil și a unui mutant GlcNAc-Tază solubil în același amestec, reacția permite formarea unui polimer HA dacă sistemul este prevăzut cu un acceptor. În 3 minute, s-a realizat un lanț de aproximativ 150 de zaharuri (-30 kDa). Orice mutant de sintetază nu va avea ca rezultat un lanț HA. Prin urmare, dacă se realizează un control suplimentar al reacției prin combinarea selectivă a diferitelor enzime, zaharuri UDP și acceptori, atunci pot fi obținute anumite oligozaharide monodisperse (Fig. 5).

Figura 5. Prepararea anumitor oligozaharide.
În acest exemplu, tetrasaharida acceptor HA este extinsă printr-o singură unitate dizaharidă de condroitină utilizând două etape cu un mutant imobilizat de sintetază din specia Pasteurella (indicat prin săgeți albe). Produsul prezentat este o nouă hexazaharidă. Repetarea ciclului încă o dată produce o oligozaharidă, două cicluri formează o decasaharidă și așa mai departe. Dacă acceptorul a fost legat anterior de o altă moleculă (cum ar fi un medicament sau un medicament), atunci noul conjugat ar fi extins cu un lanț scurt GA, condroitină sau hibrid, după cum se dorește.

De exemplu, într-o variantă de realizare, un amestec de UDP-GlcNAc, UDP-GlcUA și un acceptor este circulat în mod constant prin bioreactoare separate cu sintetaze mutante imobilizate care transferă doar un singur zahăr. Cu fiecare ciclu de incubare al bioreactorului, o altă grupare de zahăr este adăugată la acceptor pentru a forma oligozaharide mici specifice HA. Utilizarea unui mutant pmCA similar (de exemplu, GalNAc-Tază) într-una dintre etape a permis formarea de oligozaharide mixte utilizând UDP-GlcNAc. Activitatea biologică și potențialul terapeutic al oligozaharidelor mici de HA este un domeniu complex de cercetare care va necesita zaharuri specifice, monodisperse pentru interpretare fără ambiguitate.

Concluzie

Evident, există două clase diferite de HA sintetaze. Cea mai bine caracterizată enzimă de clasă II a Pasteurella spp. extinde lanțul HA prin adăugarea repetată a unui singur zahăr la capătul nereducător al lanțului HA. Direcția și modul de funcționare a sintazelor de clasa I (enzime streptococice, virale și vertebrate) rămân neclare. În științele aplicate, capacitatea pmGC-urilor de a alungi moleculele acceptoare situate exogen este utilă pentru proiectarea de noi molecule și/sau dispozitive cu potențiale aplicații medicale.

Structura

Moleculă acid hialuronic arată ca o panglică lungă construită din zaharuri alternative - acid D-glucuronic și N-acetilglucozamină. formând unitatea de bază de dizaharidă ( orez. unu).

Fig.1. Acidul hialuronic este compus din unități alternante de dizaharide

Pot exista până la 250 de mii de unități de dizaharide într-un lanț. Greutatea moleculară a acestei polizaharide naturale ajunge la 10 mii kDa. HA face parte din lichidul sinovial, corpul vitros, se găsește în cordonul ombilical, cornee, oase, valve cardiace, membrane de ou.

De o importanță fundamentală este proprietatea acid hialuronic(HA) leagă și rețin (datorită legăturilor de hidrogen) o cantitate mare de apă: 1 moleculă de HA leagă 200-500 de molecule de apă. Totodata, are efect de „scutec” – nu renunta la apa nici atunci cand continutul acesteia in mediu scade. Densitatea mare a sarcinilor negative formate în timpul disocierii grupărilor carboxil (acide) atrage o mulțime de cationi, cum ar fi ionii Na+, care sunt activi osmotic și provoacă pătrunderea și mai multă apă în matrice. Presiunea mare de umflare care rezultă este ceea ce numim turg. Turgența dermei, determinată de conținutul și proprietățile HA, oferă turgență .

Deoarece molecula conține atât regiuni hidrofile, cât și hidrofobe, în soluții HA cu greutate moleculară mare (M.m > 1000 kDa) capătă o structură spațială sub forma unei panglici răsucite aleator, care formează o bobină liberă în spațiul tridimensional. Astfel de bobine ocupă un volum uriaș (de mii de ori mai mare decât volumul macromoleculelor în sine!), formând un gel vâscos chiar și la o concentrație foarte mică.

Rețelele spațiale emergente cu celule de o anumită dimensiune oferă o „selecție naturală” a moleculelor circulante. O astfel de „sită moleculară” naturală trece liber ionii, zaharurile, aminoacizii, moleculele semnal, dar reține (și acumulează) molecule mari, inclusiv diverse toxine.

Metabolism

Sinteza HA are loc pe suprafața interioară a membranei plasmatice a fibroblastelor. Moleculele de monozaharide, din care este construit lanțul polimeric, sunt formate din glucoză, donorul grupării amino este glutamina. Pe măsură ce se formează macromolecula, aceasta este scoasă ( orez. 2).

Fig.2. Sinteza glicozaminoglicaților de către fibroblaste (conform H. Heine, 1997)

Sinteza HA este catalizată de enzima hialuronat sintetaza (HAS), reprezentată de trei varietăți (Itano N.):

  • HASi - realizează sinteza lentă a lanțurilor cu M.m aproximativ 200-2000 kDa,
  • HAS2 - este responsabil pentru sinteza rapidă a HA cu greutate moleculară mare cu M.m. peste 2000 kDa),
  • HAS3 este cea mai activă dintre enzimele implicate în sinteza HA cu M.m. aproximativ 200-2000 kDa.

Acidul hialuronic din dermă este sintetizat mult mai mult decât este catabolizat. Se pare că o parte semnificativă a acestuia este destinată drenajului prin sistemul limfatic, care este un mecanism important pentru detoxifierea țesuturilor, deoarece exo- și endotoxinele „încurcate” în 8 „rețele” moleculare sunt îndepărtate odată cu acesta. Chiar și lanțurile mari de HA cu M.m. sunt capabile să pătrundă în vasele limfatice. aproximativ 1000 kDa.

Catabolismul HA este de natură treptat și îi este acordată o mare importanță în reglarea stării matricei. În prezent, biotransformarea HA este considerată cel mai important factor în menținerea homeostaziei și unul dintre mecanismele universale de dezvoltare a proceselor patologice (inflamație, invazie tumorală și metastaze), deoarece pe măsură ce lungimea lanțului inițial scade, fragmentele cu proprietăți biologice. se formează activitatea ( masa 2).

HA este catabolizată cu participarea hialuronidazelor (tipurile I și II), care catalizează reacțiile de hidroliză și depolimerizare (degradare extracelulară). Fragmentele mici sunt parțial fagocitate de macrofage și sunt supuse unui catabolism suplimentar cu participarea enzimelor lizozomale (3-glucuronidază și (3-acetilglucozaminidază (degradare intracelulară). 90% din HA care a intrat în fluxul limfatic periferic este distrus în ganglionii limfatici), 9% în endoteliocite hepatice și 1% - în splină.

În corpul unui adult care cântărește 70 kg, toate organele și țesuturile conțin în total aproximativ 15 g de acid hialuronic, cu 50% căzând pe piele.
În fiecare zi, aproximativ 5 g de HA sunt distruse și resintetizate, adică „viața” acestei molecule este limitată la câteva zile. HA este componenta cel mai rapid reînnoită a matricei extracelulare. Spre comparație: „durata de viață” a unei fibre de colagen matur este de câteva luni, fibrele de elastină aparțin în general unor structuri practic neregenerabile.

Masa 2. Funcțiile biologice ale moleculelor de acid hialuronic cu greutăți moleculare diferite (Stern R și colab., 2006)

Lanțuri lungi cu M.m.
aproximativ 500 kDa

Ele suprimă angiogeneza, previn migrarea și diviziunea celulară, posibil din cauza modificărilor interacțiunii intercelulare, inhibă producția de citokină IL-1b, prostaglandina E2 și au un efect imunosupresor.

Molecule cu masă
20-100 kDa

Ele stimulează migrarea și diviziunea celulară, promovează vindecarea rănilor, asigură integritatea epiteliului, participă la ovulație și embriogeneză.

Lanțuri scurte de HA cu M.m.
mai puțin de 0,4-10 kDa

Stimulează angiogeneza, au efect imunomodulator și antiinflamator.

Tetrazaharide

Au proprietăți anti-apoptotice, stimulează sinteza proteinelor de șoc termic.

HA în viața comunității celulare

GC este inclus nu numai dar şi multe alte organe şi ţesuturi. Și la nivelul întregului organism, reglarea biosintezei acestuia de către fibroblaste este realizată de sistemul neuroendocrin. Un rol important revine hormonului glandei pituitare anterioare - somatotropina, care stimulează diviziunea și activitatea sintetică a celulelor țesutului conjunctiv. Corticotropina și glucocorticoizii (cortizon, hidrocortizon) inhibă diviziunea fibroblastelor, contribuie la „îmbătrânirea accelerată” a acestora, care este însoțită de o scădere a sintezei de colagen și acid hialuronic. Mineralocorticoizii (aldosteron, deoxicorticosteron), dimpotrivă, stimulează formarea HA. Estrogenii au un efect similar (vezi Anexa „HA în corpul uman: fapte interesante”).

În derm, menținerea nivelului de HA este asigurată de mecanisme de autoreglare bazate pe principiul feedback-ului ( schema 2).

Interacțiunea HA cu celulele are loc cu participarea unor proteine ​​specifice - hialaderine, care pot fi atât elemente ale aparatului receptor al celulelor (RHAMM, IHABP), cât și structuri extracelulare, care includ versican, agrecan, fibrinogen, colagen de tip VI (vezi Anexa). „Interacțiunea HA cu receptorii – mecanismul de implementare a activității sale biologice”).

În acest moment, merită să te oprești și să te gândești. Care este motivul pentru o distribuție atât de largă a HA în corpul uman? Și în regnul animal în general? Ce determină varietatea mecanismelor de reglare a metabolismului său? De ce activitatea biologică nu dispare pe măsură ce se degradează, ci se schimbă? Rezumând toate cele de mai sus și privind în viitor, putem presupune că răspunsul constă în diversitatea funcțiilor biologice ale acestui biopolimer unic ( tabelul 3).

Tabelul 3. Rolul biologic al acidului hialuronic

Este baza unei matrice intercelulare hidratate - un mediu fiziologic pentru migrarea, diviziunea și diferențierea celulelor.

Reglează activitatea sintetică a fibroblastelor, inclusiv stadiul extracelular al sintezei de colagen.

Are un efect imunomodulator indirect (atât de stimulare, cât și de suprimare a sistemului imunitar).

Oferă transportul nutrienților și moleculelor de semnalizare de la vasele de sânge la celule, precum și excreția deșeurilor.

Promovează drenajul și detoxifierea țesutului conjunctiv, este o „capcană” pentru radicalii liberi.

Oferă regenerarea țesuturilor și repararea daunelor (funcția plastică).

Participă la reglarea angiogenezei.

Reglează morfogeneza țesuturilor în timpul dezvoltării embrionare.

HA și îmbătrânirea

Întrebarea dacă conținutul de HA din piele se modifică odată cu vârsta rămâne discutabilă. Cu toate acestea, se știe cu siguranță că pe măsură ce organismul îmbătrânește, o cantitate tot mai mare de HA trece de la o stare liberă la una legată (cu proteine). În același timp, își pierde parțial abilitățile unice și anume: de a inhiba reacțiile de oxidare a radicalilor liberi, de a fi implicat în calea metabolică și de a stimula fibroblastele, de a atrage și reține apa. Prin reducerea conținutului de apă, pielea își pierde elasticitatea, iar relieful său neted este deformat de riduri și pliuri.

În cosmetologie, procedurile de injectare au cel mai mare succes - conturarea, biorevitalizarea, biorepararea. Componenta activă a preparatelor utilizate pentru implementarea lor este acidul hialuronic (HA). În ciuda declarațiilor controversate din mass-media, acidul hialuronic în cosmetologie nu și-a pierdut popularitatea de aproximativ două decenii.

Rolul HA în corpul uman

Toate sistemele și organele sunt alcătuite din celule: sânge - din elementele formate, ficatul - din hepatocite, sistemul nervos - din neuroni. Spațiul dintre toate celulele este ocupat de țesut conjunctiv, care reprezintă aproximativ 85% din întregul corp. Fiind o structură unică, interacționează cu toate celelalte țesuturi (epiteliale, nervoase, musculare etc.) și realizează interconexiunea acestora între ele.

Țesutul conjunctiv, în funcție de compoziția sa, poate fi în diferite stări fizice - în lichid (sânge, limfa, lichid intraarticular sinovial și lichid cefalorahidian), solid (os), sub formă de gel (lichid intercelular și cartilaj, corp vitros). a ochiului). Este prezent pe deplin în structurile pielii - derm, straturile hipodermice și bazale.

Țesutul conjunctiv se distinge de alte țesuturi ale corpului prin dezvoltarea ridicată a bazei sale cu un număr relativ mic de structuri celulare. Baza este formată din fibre de elastină și colagen, precum și compuși complexi de proteine ​​moleculare și aminoacizi cu aminozaharuri. Cel mai important dintre acestea este acidul hialuronic.

O moleculă de HA este capabilă să lege aproximativ 500 de molecule de apă. În corpul uman de vârstă mijlocie, este sintetizat de fibroblaste în cantitate de 15-17 g. Jumătate din aceasta este conținută în celulele stratului cornos al pielii, precum și între fibrele de elastină și colagen. Stimulează producerea acestor proteine, creează condiții pentru localizarea lor fixă, dând astfel fermitate și elasticitate pielii.

Video

Procese de îmbătrânire a țesuturilor

Sub influența enzimei hialuronidază, acidul hialuronic este distrus. Procesele de recuperare și scindare au loc continuu. Aproximativ 70% este distrus și restaurat într-o zi. Predominanța unuia sau altuia depinde de:

  • bioritmuri zilnice și sezoniere;
  • vârstă;
  • starea psihologică;
  • alimentație proastă;
  • intoxicație cu nicotină și expunere excesivă la UV;
  • luarea anumitor medicamente etc.

Acești factori afectează nu numai sinteza HA (hialuronat), ci și structura acestuia. O scădere a cantității sale duce la scăderea apei legate în țesuturi și la apariția semnelor de îmbătrânire a acestora. Moleculele defecte își păstrează capacitatea de a lega apa, dar își pierd capacitatea de a o da. În plus, procesele naturale de îmbătrânire duc la concentrarea HA în straturile profunde ale pielii, ceea ce provoacă edem tisular intercelular la marginea dermului și hipodermului și deshidratarea straturilor mai superficiale.

Toate aceste procese odată cu înaintarea în vârstă și sub influența factorilor negativi cresc și duc la piele uscată cu umflarea simultană a feței și umflarea sub ochi, scăderea elasticității și fermității acesteia, apariția ridurilor și a pigmentării.

Tipuri de HA în organism

Unicitatea sa constă în prezența moleculelor cu diferite lungimi de lanț de polizaharide. Proprietățile acidului hialuronic și efectul său asupra celulelor depind în mare măsură de lungimea lanțului:

  1. Molecule cu lanț scurt sau acid hialuronic cu greutate moleculară mică - are un efect antiinflamator. Acest tip de acid este utilizat pentru tratarea arsurilor, ulcerelor trofice, acneei, psoriazisului și erupțiilor herpetice. Este folosit în cosmetologie ca una dintre componentele tonicelor și cremelor de uz extern, deoarece, fără a-și pierde proprietățile, pătrunde profund în piele pentru o lungă perioadă de timp.
  2. HA cu greutate moleculară medie, care are proprietatea de a suprima migrația, reproducerea celulară etc. Este utilizat în tratamentul ochilor și al anumitor tipuri de artrită.
  3. High-molecular - stimulează procesele celulare din piele și are capacitatea de a reține un număr mare de molecule de apă. Oferă pielii elasticitate și rezistență ridicată la factorii negativi externi. Acest tip este utilizat în oftalmologie, chirurgie și în cosmetologie - în preparate pentru tehnici de injectare.

vederi industriale

În funcție de tehnologia de producție, hialuronatul de sodiu este împărțit în două tipuri:

  1. Multă vreme s-au folosit preparate cu acid hialuronic de origine animală. A fost obținut prin scindarea enzimatică a părților zdrobite ale animalelor (ochi și cartilaje de bovine, faguri de cocos, lichid intraarticular sinovial, cordon ombilical) ca urmare a unei epurări și precipitații speciale în două etape. Tehnologia a implicat utilizarea apei distilate și a temperaturii ridicate (85-100 de grade). O parte semnificativă a fracției cu greutate moleculară mare a fost distrusă, transformându-se într-o fracție cu greutate moleculară mică. În plus, au existat proteine ​​de origine animală.

    Efectul după injecțiile cu astfel de medicamente în scopul corectării cosmetice a feței nu a durat mult, uneori a contribuit la formarea nodurilor dermice. Dar medicamentul a fost deosebit de periculos pentru că deseori provoca reacții inflamatorii și alergice pronunțate din cauza prezenței proteinelor animale. Prin urmare, această tehnologie nu este aproape niciodată folosită.

  2. Recent, HA a fost produs în industria farmaceutică prin sinteză biotehnologică. În aceste scopuri se folosesc microorganisme (streptococi) cultivate în bulion de grâu. Acestea produc acid hialuronic, care în etapele ulterioare este purificat, uscat și supus unor studii bacteriologice și chimice repetate. Un astfel de medicament corespunde aproape complet acidului produs în corpul uman. Aproape că nu provoacă reacții alergice și inflamatorii.

Aplicație în cosmetologie

Acidul hialuronic este utilizat pentru injectare în piele și în straturile subcutanate folosind diferite metode:

  1. Injectabil.
  2. Neinjectare.

Procedurile de injectare cu acid hialuronic sunt utilizate în metode precum:

  • și - introducerea medicamentului în straturile medii ale pielii; este folosit pentru modificări legate de vârstă, uscăciune a pielii și pentru a-i crește elasticitatea, tonusul și culoarea, pentru a elimina acneea, vergeturile etc.; durata de conservare a acidului hialuronic în derm - până la 14 zile;
  • - umplerea structurilor subcutanate cu o substanta pentru a netezi ridurile si a corecta contururile fetei; medicamentul este păstrat sub piele timp de 1-2 săptămâni;
  • și - administrarea de acid hialuronic modificat, care rămâne în piele până la 3 săptămâni.

Întrebări

Care este mai bine: Botox sau HA?

Având în vedere mecanismele de acțiune multidirecționale ale Botoxului și acidului hialuronic, acestea sunt utilizate pentru a obține efecte diferite. Poate combinația lor. Totuși, trebuie amintit că după introducere trebuie să treacă cel puțin două săptămâni.

Este posibil să combinați introducerea de umpluturi de colagen și HA?

Fillerele pe bază de colagen și HA sunt bine combinate. Primul oferă pielii densitate și structură și durează în medie 4 luni, al doilea asigură hidratare naturală și rezistență timp de 6-9 luni.

Orice aplicare a injecțiilor cu acid hialuronic trebuie efectuată numai de un cosmetolog.

Acid hialuronic a fost descoperit în 1934, primele sale studii detaliate au început să fie efectuate în 1949-1950. Această substanță a fost izolată din diferite țesuturi animale - lichid articular, cordon ombilical și țesuturi de cremă de cocos. În plus, în 1937, acidul hialuronic a fost obținut din capsulele de streptococi. Primele studii ale proprietăților fizice și chimice ale acidului hialuronic au fost efectuate prin cristalografie cu raze X.

Probleme de obținere a unui GC

Principala problemă în studiul acidului hialuronic, pe care oamenii de știință au întâlnit-o, a fost dificultatea de a-l izola în forma sa pură, purificată din proteine ​​și alte componente. Dificultatea a apărut deoarece a existat întotdeauna un risc de distrugere a structurii polimerice a acidului hialuronic în timpul procesului de purificare. În același timp, oamenii de știință au încercat o varietate de metode de purificare fizică, chimică și enzimatică.

Puțin mai târziu, au început cercetările privind posibilitatea biosintezei acidului hialuronic. În 1955, o astfel de metodă a fost găsită pentru prima dată. Un grup de oameni de știință a izolat molecule de acid hialuronic dintr-un extract de streptococ. Datorită acestei descoperiri, a devenit posibilă sinteza acidului hialuronic - folosind o fracție enzimatică prelevată din streptococi.

Acid hialuronic - Aplicare

Descoperirea majoră în utilizarea acidului hialuronic a avut loc în anii 1950. Datorită descoperirii acestei substanțe pentru utilizare în medicină, a început producția sa industrială și popularizarea ca medicament.

În 1970, acidul hialuronic a fost aprobat ca tratament eficace dovedit pentru artrită, după ce a primit rezultate pozitive la testele pe animale. Ca rezultat al experimentului, a fost observat un efect clinic pronunțat cu o scădere a simptomelor.

Câțiva ani mai târziu, acidul hialuronic a început să fie folosit ca parte a lentilelor intraoculare implantabile, ceea ce l-a transformat rapid într-una dintre cele mai utilizate componente în chirurgia oftalmică. Din acel moment au început să fie propuse și testate diverse metode și aplicații ale acidului hialuronic.

GC astăzi

În anii 90 acid hialuronic a găsit o largă aplicație în medicina estetică și cosmetologie, datorită proprietăților sale unice de reținere a umidității, precum și proprietăților antiseptice și antioxidante. Până în prezent, este folosit în diverse scopuri cosmetice, iar cercetările asupra proprietăților sale și posibilelor aplicații continuă.

Astăzi, mențiunile despre acidul hialuronic sunt pline atât de publicații lucioase, cât și de pagini de media obișnuite. În ultimii ani, ni s-a spus constant că „secretul tinereții eterne a pielii a fost dezvăluit” și se oferă să folosească acest „elixir”. Să încercăm să ne dăm seama ce este mai mult în acest hype nesănătos - informații veridice, calcul comercial precis sau banale iluzii filistene.

Descoperiri din trecut care nu s-au ridicat la nivelul așteptărilor

Dacă vă uitați în trecutul foarte recent, vă puteți aminti că au existat deja situații similare în istoria medicinei:

  • Descoperirea penicilinei a fost prezentată ca o victorie completă asupra microorganismelor (ceea ce, din păcate, nu s-a întâmplat, în ciuda spectrului actual).
  • Insulina produsă a fost profețită victorie asupra (un medicament pentru diabetici este vital și esențial, dar victoria completă asupra diabetului este încă foarte departe).
  • Utilizarea primelor neuroleptice a fost prezentată ca o oportunitate de a vindeca anumite tulburări mintale, dar chiar și aici totul este departe de așteptările ideale.

În general, imaginea adevărată după ceva timp încă diferă de previziunile și estimările inițiale. Prin urmare, este foarte important să tratăm totul critic și cât mai obiectiv posibil.

Dezmind miturile despre acidul hialuronic

Niciunul dintre medici nu va susține că acidul hialuronic este important pentru corpul uman, dar cantitatea de informații care se găsesc astăzi în mass-media și care se dau drept adevăr, din păcate, nu ne vine de la profesioniști. Cel mai adesea, gândurile inovatoare sunt aduse oamenilor de diverse tipuri de experți în frumusețe, bloggeri autodidacți și alte persoane fără o educație medicală, farmaceutică sau biologică de specialitate. Ei vorbesc despre un medicament pe baza propriilor impresii evaluative, informații din surse dubioase sau informații scoase din context.

Așa se nasc amăgirile. Să încercăm să separăm grâul de pleavă și să înțelegem această problemă mai detaliat.

Adevărat

Principala concepție greșită este că medicamentul este numit la singular și este corect să-l numim la plural - acizi, deoarece este unul dintre compușii grupului de mucopolizaharide acide, care include alți compuși cu compoziție și proprietăți similare, iar masa lor poate varia mult. Deoarece marea majoritate a medicamentelor care apar sub denumirea de „acid hialuronic” sunt produse din materii prime biologice fără o separare specială a fracțiilor, este complet incorect să considerăm medicamentul ca fiind un singur compus, pur.

Acidul hialuronic este rezultatul descoperirilor laboratoarelor de frumusețe din ultimele două-trei decenii.

Substanța în sine a fost descoperită în 1930, iar studiul proprietăților, funcțiilor și posibilităților de aplicare a acesteia a fost preluat aproape imediat după descoperire. Cercetările în sine nu s-au oprit și, începând cu anii 70 ai secolului trecut, intensitatea lor a început să crească.

Această substanță este utilizată în produsele cosmetice și cosmetologice.

Pe lângă această direcție dezvoltată, acidul hialuronic este utilizat în diferite boli ale altor organe și sisteme ca medicament.

În produsele cosmetice, îmbunătățește pătrunderea nutrienților în piele

Nu afectează nivelul de permeabilitate celulară și intercelulară pentru diferite substanțe

Îmbătrânirea pielii este asociată cu pierderea de lichide din cauza scăderii nivelului de substanțe din acest grup în toate straturile pielii.

Dacă scăderea conținutului de hialuronați are loc odată cu vârsta, atunci nu este atât de semnificativă, iar îmbătrânirea, inclusiv pielea, este cel mai complex proces biologic general cu mai multe fațete și este pur și simplu stupid să-și reducă manifestările la astfel de motive banale.

Adevărul despre acidul hialuronic

Toate proprietățile și caracteristicile și trăsăturile distinctive ale acidului hialuronic sunt descrise în detaliu în literatura științifică și medicală. Cu toate acestea, este suprasaturat cu o mulțime de termeni, ceea ce face ca informațiile disponibile să nu fie întotdeauna clare pentru profanul obișnuit.

Dacă încercăm să simplificăm totul puțin, se dovedește că:


Fiecare facțiune are propriul său set de proprietăți și caracteristici. Asa de soiuri cu greutate moleculară mică substanțele au un efect antiinflamator excelent, care a asigurat utilizarea lor în arsuri, ulcere trofice, erupții herpetice, psoriazis . Acid hialuronic cu greutate moleculară medie capabil să inhibe reproducerea și migrarea celulelor. Datorită acestor proprietăți, este utilizat în tratamentul anumitor artrite și boli oculare. Fracții cu greutate moleculară mare rețin un număr mare de molecule de apă în jurul lor și stimulează procesele celulare din piele. Acest tip de acid hialuronic și-a găsit aplicația în chirurgie, oftalmologie și cosmetologie.

Este important de știut! Este categoric imposibil să utilizați un medicament cu o dimensiune nespecificată a moleculelor substanței active, deoarece nu numai că nu puteți obține rezultatul dorit, ci puteți și înrăutăți starea.

Principalele indicații pentru utilizarea acidului hialuronic

Trebuie amintit întotdeauna că introducerea medicamentelor în organism injecție cu acid hialuronic este în primul rând o manipulare medicală. Există criterii medicale destul de stricte pentru utilizarea diferitelor tehnici și proceduri.

Deci, principalele indicații pentru utilizarea acidului hialuronic sunt:

  • apariția ridurilor (scăderea turgenței pielii) din cauza pierderii umidității;
  • creșterea severității ridurilor existente;
  • riduri mimice pronunțate;
  • necesitatea de a normaliza ușurarea pielii;
  • nevoia de a îmbunătăți turgența și conturul marginii roșii a buzelor.

Preparate cu acid hialuronic în medicina estetică

În cosmetologia modernă, cererea de acid hialuronic sub formă de injecții sau alte forme de medicament este explicată prin:


Piața farmacologică modernă oferă acid hialuronic sub formă de injecții. În acest caz, poate fi sub forma:

  • Mezococktail, care include substanța principală, suplimentată cu pantenol, vitamine, coenzime, factori de creștere celulară, peptide etc.
  • Fillerov- un filler dermic format din HA reticulat, care se biodegradează în timp - este absorbit în organism. Disponibil sub formă de gel cu diferite grade de vâscozitate. Cu cât substanța este mai vâscoasă, cu atât mai multe probleme este concepută pentru a face față.
  • Redermalizante și biorevitalizante. În prezent, 3 generații din aceste medicamente pot fi găsite pe rafturile farmaciilor. Acestea din urmă se bazează pe acizi nucleici care creează complexe cu HA care pot restabili ADN-ul celular și pot accelera producerea propriului acid hialuronic, precum și a elastinei și a colagenului.
  • Bioreparanți- preparate care conțin HA alterat, de lanțul cărora sunt atașate peptide, vitamine, aminoacizi. Au un efect prelungit și îmbunătățit.

Notă: unguentele, cremele, gelurile, lotiunile de uz extern pot fi folosite in industria frumusetii, dar eficacitatea lor este mult mai mica decat cea a acidului hialuronic pentru preparate injectabile.

Principalele tipuri de proceduri pentru a îmbunătăți starea pielii feței

Cele mai populare proceduri de injectare cu acid hialuronic sunt:


Principalele contraindicații ale utilizării acidului hialuronic

Dacă marketerii încearcă să vă convingă că injecțiile cu acid hialuronic, oriunde sunt efectuate, sunt cât mai sigure posibil, trebuie să știți: aceasta este o minciună! Pe fondul anumitor proceduri, acestea sunt cu adevărat mai sigure, cu toate acestea, acest medicament are și propriile sale contraindicații.

Cele principale includ:

  1. Orice reacție alergică la substanța activă sau componentele acesteia.
  2. Orice boli infecțioase în perioada acută.
  3. Sarcina, nașterea și alăptarea ulterioară.
  4. Patologia țesutului conjunctiv.
  5. Boli generale și sistemice, cum ar fi leziuni autoimune, patologia oncologică a oricăror organe și sisteme, zahăr, patologia sistemului de coagulare a sângelui.

În plus, semnele din naștere, alunițele, cicatricile și procesele inflamatorii nu ar trebui să fie localizate la locul injectării. Dacă aceste contraindicații nu sunt respectate, rezultatele pot fi dezastruoase.

Eficacitatea cremelor cu acid hialuronic

Un grup separat de medicamente și destul de frecvente sunt cremele cu acid hialuronic. Se aplică prin aplicarea pe suprafața pielii, unde produc un efect imediat.

Pentru modificări superficiale, protecția pielii, se folosesc produse care conțin fracții moleculare mari, care creează un strat protector și nu pătrund în piele.

Pentru a corecta modificările profunde legate de vârstă, agenții cu fracțiuni cu greutate moleculară mică ale substanței active sunt mai potriviți, deoarece pot pătrunde parțial la o anumită adâncime în straturile interioare, unde se realizează efectul lor biologic.

Recent, metodele non-injectabile au devenit din ce în ce mai populare, implicând aplicarea unui gel pe piele, urmată de expunerea la microcurenți, laser și ultrasunete.

Aș dori să închei cu un sfat: totul are timpul și motivele lui, iar principala regulă a unei vieți sănătoase, bună dispoziție și aspect frumos este moderația. În căutarea frumuseții, încearcă să folosești chiar și un astfel de produs precum acidul hialuronic, fără bibelouri, iar pielea ta va arăta bine chiar și la bătrânețe extremă.

Pentru mai multe informații despre utilizarea preparatelor cu acid hialuronic pentru față, veți primi vizionând recenzia video:

Sovinskaya Elena Nikolaevna, terapeut.