Varësitë 

Sinteza e acidit hialuronik. Struktura dhe përdorimi në mjekësi i acidit hialuronik. Roli fiziologjik i polimereve hialuronik

Acidi hialuronik [HA] gjendet në matricën jashtëqelizore të indeve vertebrale, në veshjen sipërfaqësore të llojeve të caktuara të Streptococcus dhe patogjenëve bakterial Pasteurella, dhe në sipërfaqen e disa algave deti të infektuara pjesërisht me viruse. Sintezat e acidit hialuronik [HAS] janë enzima që polimerizojnë HA duke përdorur prekursorët e sheqerit UDP që gjenden në membranat e jashtme të këtyre organizmave. U identifikuan gjenet GCS nga të gjitha burimet e sipërpërmendura. Duket se ekzistojnë dy klasa të veçanta të GCS bazuar në ndryshimet në sekuencën e aminoacideve, topologjinë e parashikuar të membranës dhe mekanizmin e propozuar të reagimit.

Të gjitha GCS u identifikuan si sintaza të klasës I, me përjashtim të GCS në speciet Pasteurella. Gjithashtu u shpjegua mënyra katalitike e funksionimit të GCS të vetme të klasës II (pmGCS). Kjo enzimë zgjeron pranuesit e jashtëm të oligosakarideve të lidhur me HA duke shtuar njësi individuale monosakaride në skajin joreduktues për të formuar polimere të gjatë in vitro; asnjë GCS e klasës I nuk e ka këtë aftësi. Mënyra dhe drejtimi i polimerizimit të HA të katalizuar nga GCS i klasës I mbeten të paqarta. Enzima PMGC u analizua gjithashtu për dy aktivitetet e saj: GlcUA transferaza dhe GlcNAc transferaza. Kështu, dy vende aktive ekzistojnë në një polipeptid PMGC, duke hedhur poshtë dogmën e pranuar gjerësisht të glikobiologjisë: "një enzimë, një sheqer i modifikuar". Provat paraprake sugjerojnë se enzimat e klasës I mund të kenë gjithashtu dy vende aktiviteti.

Potenciali katalitik i enzimës PMGC mund të përdoret për të krijuar polisaharide të reja ose oligosakaride inxhinierike. Me kaq shumë trajtime mjekësore të mundshme të bazuara në GC, kjo teknologji kemoenzimatike premton të përfitojë nga kërkimi ynë për shëndet të mirë.

Fjalë kyçe

Acidi hialuronik (HA), kondroitina, glikoziltransferaza, sintaza, katalizimi, mekanizmi, polisaharidet kimerike, oligosakaridet monodisperse

Prezantimi

Hyaluronan [HA] është një glikozaminoglikan shumë i pasur në vertebrorët, që ka edhe role strukturore dhe sinjalizuese. Disa baktere patogjene, përkatësisht grupet A dhe C të specieve Streptococcus dhe lloji A e Pasteurella multocida, prodhojnë një mbulesë jashtëqelizore të HA të quajtur kapsulë. Në të dyja llojet, kapsula HA është faktori i toksicitetit që i siguron baktereve rezistencë ndaj fagociteve dhe komplementaritet. Një organizëm tjetër që prodhon HA është alga deti Chlorella, e cila është e infektuar me një virus të madh të ADN-së me dy zinxhirë, PBCV-1. Roli i HA në ciklin jetësor të këtij virusi nuk është ende i qartë në këtë kohë.

Ilustrimi 1. Reaksioni i biosintezës së HA.

Enzimat e klasës së glikoziltransferazave që polimerizojnë HA quhen GC sintaza (ose GCS), sipas terminologjisë së vjetër që përfshin edhe GC sintetazat. Të gjitha sintazat e njohura HA janë variante të një polipeptidi të vetëm përgjegjës për polimerizimin e zinxhirit HA. Pararendësit e sheqerit UDP, UDP-GlcNAc dhe UDP-GlcUA përdoren nga sintazat GC në prani të një kationi dyvalent (Mn dhe/ose Mg) në pH neutral (Fig. 1). Të gjitha sintazat janë proteina të lidhura me membranën në qelizën e gjallë dhe gjenden në fraksionin e membranës pas lizës së qelizave.

Ndërmjet viteve 1993 dhe 1998, sintazat GK të grupeve A dhe C të Streptokokut [spGCS dhe seGCS, respektivisht], sintazat GK vertebrore [GCS 1,2,3], GK sintaza e virusit të algave [svGCS] dhe gjithashtu sintaza GK e tipit A të specie Pasteurella multocida [pmGKS]. Tre llojet e para të sintazave GK duket se janë shumë të ngjashme në madhësi, sekuencë aminoacide dhe topologji të parashikuar të membranës. Në të kundërt, sintaza GK nga speciet Pasteurella është më e madhe dhe ka një sekuencë të ndryshme dhe topologji të parashikuar nga sintazat e tjera. Prandaj, ne hipotezuam ekzistencën e dy klasave të sintazave HA (Tabela 1). Enzimat e klasës I përfshijnë proteinat streptokoke, vertebrore dhe virale, ndërsa proteina e specieve Pasteurella është aktualisht i vetmi anëtar i klasës II. Ne gjithashtu kemi disa dëshmi se proceset katalitike të enzimave të klasës I dhe klasës II janë të ndryshme.

Tabela 1. Dy klasa të sintazave GK:

Edhe pse Pasteurella spp GK sintaza ishte enzima e fundit që u zbulua, disa veçori të pmGXS kanë kontribuar në përparime të rëndësishme në studimin e tij krahasuar me disa anëtarë të enzimave të klasës I, të cilat janë studiuar për katër dekada. Tipari kryesor i pmGCS, i cili bëri të mundur sqarimin e drejtimit molekular të polimerizimit dhe identifikimin e dy vendeve aktive të tij, është aftësia e pmGCS për të zgjatur oligosakaridin pranues të vendosur jashtë. pmGCS rekombinante shton monosakaride të vetme në një mënyrë të përsëritur në një oligosakarid të lidhur me GC in vitro. Një tipar i brendshëm i çdo transferimi monosakarid është përgjegjës për formimin e një përsëritjeje alternative të disakarideve në atë glikozaminoglikan; nuk kërkohet formimi i njëkohshëm i njësisë disaharide. Nga ana tjetër, asnjë zgjerim i tillë i pranuesve të jashtëm nuk është demonstruar për asnjë enzimë të klasës I. Nëpërmjet kërkimit shkencor bazë, ne kemi zhvilluar tani disa aplikime bioteknologjike të një klase të shquar të proteinës GK sintaza nga speciet Pasteurella.

Materialet & Metodat

Reagentët

Të gjithë reagentët për studime të biologjisë molekulare pa markim të veçantë ishin nga Promega. Oligonukleotidet standarde ishin nga Great American Gene Company. Të gjithë reagentët e tjerë me pastërti të lartë, përveç rasteve kur shënohet ndryshe, ishin nga Sigma ose Fisher.

Shkurtimi i pmGCS dhe mutantëve pikë

Një seri polipeptidesh të cunguara u prodhuan nga amplifikimi i insertit pPm7A me reaksion zinxhir polimerazë me polimerazën Taq (Fisher) dhe abetare oligonukleotide sintetike që korrespondojnë me pjesë të ndryshme të PMGC-ve, me një kornizë të hapur leximi. Amplikonët u klonuan më pas në plazmidin shprehës pKK223-3 (promotor tac, Pharmacia). Konstruktet rekombinante që rezultuan u transformuan në qeliza të shtamit TOP 10F" të Escherichia coli (Invitrogen) dhe u rritën në mjedisin LB (Luria-Bertani) me përzgjedhje të ampicilinës. Mutacionet u bënë duke përdorur metodën QuickChange mutagjenezë të drejtuar nga vendi (Stratagene) me pKK/pmGCS plazmidi si mostër e ADN-së.

Përgatitja e enzimës

Për të përgatitur membranën që përmban pmGKC rekombinante me gjatësi të plotë, pmGK1-972 u izolua nga E. coli siç përshkruhet. Për proteinat e tretshme të shkurtuara pmGKS, pmGKS1-703, pmGKS1-650 dhe pmGKS1-703 - që përmbajnë mutantë, qelizat u ekstraktuan duke përdorur reagentin e nxjerrjes së proteinave bakteriale B-PerTM II (Pieree) sipas udhëzimeve të prodhuesit, përveç që procedura u krye 7°C në prani të inhibitorëve të proteazës.

Rrugët enzimatike për polimerizimin e HA. Modifikimi GlcNAc ose modifikimi GlcUA

Tre variante u krijuan për të zbuluar nëse (a) ndodh polimerizimi i zinxhirëve të gjatë HA, ose (b) shtimi i një GlcNAc të vetëm në një oligosakarid HA pranues të terminalit GlcUA, ose (c) shtimi i një GlcUA të vetme në një HA të terminalit GlcNAc oligosakarid pranues. Aktiviteti total i GCS u vlerësua për një zgjidhje që përmban 50 mM Tris, pH 7.2, 20 mM MnCl2, 0.1 M (NH4) 2SO4, 1 M etilen glikol, 0.12 mM UDP-(14C)GlcUA (0.01 μCi; 3 NEN), mM UDP- GlcNAc dhe një grup i ndryshëm oligosakaridesh HA të marra nga testikujt me trajtim me hialuronidazë [(GlcNAc-GlcUA)n, n= 4-10] në 30°C për 25 minuta në një vëllim reaksioni prej 50 μl. Aktiviteti i GlcNAc-transferazës u vlerësua për 4 minuta në të njëjtin sistem buferik me një grup të ndryshëm oligosakaridësh GC, por me vetëm një sheqer si pararendës - 0.3 mM UDP-(3H)GlcUA (0.2 μCi; NEN). Aktiviteti i transferazës GlcUA u vlerësua për 4 minuta në të njëjtin sistem tampon, por me vetëm 0,12 mM UDP-(14C)GlcUA (0,02 μCi) dhe me një grup të çuditshëm oligosakaridesh GC (3,5 μg acid uronik) të përgatitur nga ekspozimi ndaj merkurit acetat në GK-liaza e Streptomyces. Reaksionet u ndërprenë duke shtuar SDS në 2% (w/v). Produktet e reaksionit u ndanë nga substratet me kromatografi letre (Whatman 3M) ​​me etanol/1 M sulfat amoni, pH 5 5, si tretësi kryesor (65:35 për vlerësimin GCS dhe GlcUA-Tase; 75:25 për GlcNAc-Tase. vlerësim). Për të vlerësuar HA, një mostër shirit letre u shpëla me ujë dhe lidhja e sheqernave radioaktive në polimerin HA u zbulua nga scintilimi i lëngshëm i llogaritur duke përdorur koktejin BioSafe II (RPI). Për reaksionet e gjysmë-testit, kampioni dhe shiritat e poshtëm 6 cm u numëruan në rritje prej 2 cm. Të gjitha eksperimentet e vlerësimit u shkallëzuan për të qenë lineare në lidhje me kohën e inkubacionit dhe përqendrimin e proteinave.

Kromatografia e filtrimit me xhel

Madhësia e polimereve HA u analizua në mënyrë kromatografike në kolonat Phenomenex PolySep-GFC-P 3000, elucioni u krye me nitrat natriumi 0.2 M. Kolona u standardizua me dekstra fluoreshente të madhësive të ndryshme. Komponentët radioaktivë u zbuluan duke përdorur një sensor LB508 Radioflow (EG&G Berthold) dhe një koktej Zinsser. Krahasuar me vlerësimin e plotë të GC duke përdorur kromatografinë letre të përshkruar më sipër, këto reaksione 3-minutëshe përmbanin dyfishin e përqendrimeve të sheqerit UDP, 0,06 μCi UDP-(14C) GlcUA dhe 0,25 nanogram të serisë GC të oligosakarideve. Për më tepër, shtimi i acidit tetracilik etilen diamine të zierjes (2 minuta) (përqendrimi përfundimtar 22 mM) u përdor për të përfunduar reaksionet në vend të shtimit të SDS.

Rezultate dhe diskutime

Përdorimi dhe specifika e pranuesit GCS

Disa oligosakaride janë testuar si pranues për PMGKS1-972 rekombinant (Tabela 2). Oligosakaridet HA u morën nga testikujt me ndarjen e hialuronidazës dhe u zgjatën nga pmGCS duke përdorur sheqerna të përshtatshme UDP të dorëzuara. Reduktimi me borohidrat natriumi nuk ndërhyn në aktivitetin e pranuesit. Nga ana tjetër, oligosakaridet e përftuara nga HA nga ndarja e liazës nuk mbështesin zgjatjen; mbetjet terminale të dehidratuara të pangopura të pareduktuara të GlcUA kërkojnë grupe hidroksil që mund të bashkojnë sheqerin në hyrje nga pararendësi UDP. Prandaj, shtrirja e katalizuar nga pmGX ndodh në rastin e grupeve fundore të pareduktuara. Në një numër eksperimentesh paralele, u zbuluan forma rekombinante të sintazave të klasës I, spGCS dhe x1GCS, të cilat nuk zgjerojnë pranuesit e derivuar nga GC. Duke marrë parasysh drejtimin e aktivitetit të enzimave të klasës I, janë bërë raporte kontradiktore dhe nevojiten kërkime të mëtejshme.

Tabela 2. Specifikimi i pranuesve të oligosakarideve PMGCS:

Interesante, pentameri i sulfatit të kondroitinës është një pranues i mirë për PMGC. Megjithatë, oligosakaride të tjera të lidhura me strukturën, si chitoteroza ose pentameri heparosan, nuk shërbejnë si pranues për pmGCS. Në përgjithësi, pmGCS duket se kërkon oligosakaride pranuese që përmbajnë GlcUA të lidhura me β. Ne supozojmë se vendi i lidhjes së oligosakaridit është i ndërmjetëm në zinxhirin e mbajtjes së HA gjatë polimerizimit.

Analiza molekulare e aktivitetit të transferazës PMGCS: dy vende aktive në një polipeptid

Aftësia për të matur dy komponentë të aktivitetit të glikoziltransferazës së GK sintazës, GlcNAc transferazës dhe GlcUA transferazës, u bë e mundur nga analiza molekulare e pmGCS. Ne vumë re se një motiv i shkurtër i sekuencës së dyfishuar: Asp-Gly-Ser (Aspartic k-ta-Glycine-Serine) ishte i pranishëm në pmGCS. Nga një analizë krahasuese e grupeve hidrofobike të shumë glikosiltransferazave të tjera që prodhojnë polisaharide ose oligosakaride të lidhura me β, është sugjeruar se, në përgjithësi, ekzistojnë dy lloje domenesh: rajonet "A" dhe "B". PmGKS, një sintazë e klasës II, është unike në atë që përmban dy domene "A" (komunikimi personal, B. Henrissat). Është propozuar që anëtarë të caktuar të sintezave GK të klasës I (spGCS) të përmbajnë rajone të vetme "A" dhe të vetme "B". Mutantë të ndryshëm të fshirjes ose pikës së pmGCS u vlerësuan për aftësinë e tyre për të polimerizuar zinxhirët GC ose aftësinë e tyre për të shtuar një sheqer të vetëm në një oligosakarid pranues GC (Tabela 3). Për ta përmbledhur, pmGCS përmban dy vende të ndryshme aktive. Mutagjeneza e motivit të aspartatit DGS (mbetja 196 ose 477) në të dy vendet rezultoi në humbjen e polimerizimit të HA, por aktiviteti i vendit tjetër mbeti relativisht i paprekur. Kështu, aktiviteti i dyfishtë i GC sintazës u shndërrua në dy aktivitete të ndryshme të vetme të glikosiltransferazës.

Tabela 3. Aktiviteti i pmGCS me një rajon të fshirë ose një mutacion në pikë.

Heqja e 269 mbetjeve të fundit nga grupi karboksil terminal konvertoi një proteinë membranore të shprehur dobët në një të tretshme shumë të shprehur. Ekzaminimi i sekuencës së aminoacideve të proteinës PMGC në këtë rajon, megjithatë, nuk tregon tipare tipike të strukturës dytësore që do të siguronin ndërveprim të drejtpërdrejtë të enzimës me shtresën e dyfishtë lipidike. Ne supozojmë se grupi karboksil terminal i enzimës katalitike pmGCS lidhet me aparatin e transportit të polisaharidit të lidhur me membranë të qelizës bakteriale të gjallë.

Regjioni i parë "A" i pmGCS, A1, është një legen GlcNAc, ndërsa rajoni i dytë "A", A2, është një legen GlcUA (Fig. 2). Ky është identifikimi i parë i dy vendeve aktive për një enzimë që prodhon një heteropolisakarid, si dhe dëshmi e qartë se një enzimë mund të transferojë në të vërtetë dy sheqerna të ndryshëm. Një enzimë e ndryshme nga tipi F nga P. multocida, e quajtur PMCS, u gjet dhe u zbulua se katalizon formimin e një polimeri josulfuar të kondroitinës. HA dhe kondroitina janë identike në strukturë, me përjashtim të polimerit të përmendur më sipër, i cili përmban N-acetilglucosamine në vend të GlcNAc. Të dy pmGCS dhe pmCS janë 87% identike në nivelin e aminoacideve. Shumica e ndryshimeve në mbetje janë në rajonin A1, gjë që është në përputhje me hipotezën se ky rajon është përgjegjës për sinjalizimin e heksosaminës.

Ilustrimi 2. Paraqitja skematike e zonave pmGCS.
Dy fusha të pavarura të transferazës, A1 dhe A2, janë përgjegjëse për katalizimin e polimerizimit të zinxhirit HA. Shtesat e përsëritura, të njëpasnjëshme të sheqernave të vetme ndërtojnë shpejt zinxhirin HA. Duket se fundi karboksil i pmGCS ndërvepron në një farë mënyre me makinerinë e transportit të lidhur me membranën e qelizës bakteriale.

Figura 3. Modeli i biosintezës GC duke përdorur pmGCS.
Sheqernat e vetme shtohen në çdo domen "A" në mënyrë të përsëritur në skajin jo-reduktues të zinxhirit HA. Saktësia e brendshme e çdo hapi të aktivitetit të transferazës ruan përsëritjen e strukturës disakaride HA. Zinxhiri i sapolindur GC ka të ngjarë të mbahet nga pmGCs gjatë katalizimit nëpërmjet një vendi lidhës me oligosakaridet.

Ne kemi demonstruar sinjalizim efikas me një sheqer të vetëm nga pmGCS in vitro nga disa lloje eksperimentesh, dhe për këtë arsye, ne hipotezuam se zinxhirët GC formohen nga shtimi i shpejtë dhe i përsëritur i një sheqeri të vetëm nga sintaza e klasës II (Figura 3). Deri më sot, një linjë provash sugjeron se enzima e klasës I posedon gjithashtu dy vende transferaze. Mutacioni i mbetjes së leucinës 314 në valinë në mmGCS1, pjesë e pre-rajonit GlcUA-tase, u raportua se e shndërron këtë GCS vertebrore në një sintazë kito-oligosakaride. Asnjë vend me aktivitet përkatës të transferazës GlcNAc nuk është identifikuar.

Shartimi i polimerit me sintaza polisakaride: shtimi i HA në molekulat ose grimcat e ngurta

Kërkimet mbi PMGC-të në laboratorin e kërkimit kanë transformuar të kuptuarit e sintazave GC nga sfera e përbindëshave të vështirë dhe kokëfortë të ngjashëm me kafshët në kuajt e mundshëm bioteknologjikë. Molekula të reja mund të formohen duke përdorur aftësinë e PMGC-ve për të shartuar zinxhirë të gjatë HA në zinxhirë të shkurtër me prejardhje nga HA ose pranues me prejardhje nga kondroitina. Për shembull, pastruesit e dobishëm mund të përbëhen nga molekula të vogla ose ilaçe me zinxhirë oligosakaridësh HA ose kondroitin të lidhur në mënyrë kovalente (për shembull, 4 sheqerna të gjatë). Përndryshe, zinxhirët HA mund të shtohen në një primer oligosakarid të imobilizuar në një sipërfaqe të fortë (Tabela 4). Kështu, zinxhirët e gjatë HA mund të shtohen butësisht në substanca të ndjeshme ose pajisje delikate.

Në një aplikim tjetër, polisaharide të reja kimerike mund të formohen sepse përdorimi i pmGCS nga pranuesi i oligosakaridit nuk është aq i rreptë sa specifika e transferazës së saharidit. Kondroitina dhe sulfati i kondroitinës njihen si pranues të PMGC-ve dhe zgjerohen nga zinxhirë HA me gjatësi të ndryshme (Fig. 4). Përkundrazi, PMCS është shumë homolog me sintazën e kondroitinës dhe njeh dhe zgjeron pranuesit e GC me zinxhirë kondroitin. Molekulat kimerike të glikozaminoglikanit formohen duke përmbajtur komponime lidhjesh natyrore, specifike. Këto polisaharide shartimi mund të shërbejnë për t'u bashkuar me një qelizë ose ind që lidh HA me një qelizë ose ind tjetër që lidh kondroitinën ose sulfatin e kondroitinës. Në disa aspekte, glikozaminoglikanet e shartuara ngjajnë me proteoglikanet, të cilat janë përbërës thelbësorë të matricës në indet e vertebrorëve. Por meqenëse nuk ka lidhës proteinash të pranishëm në polimeret kimerikë, problemet e antigjenitetit dhe proteolizës që lindin rreth përdorimit mjekësor të proteoglikaneve eliminohen. Rreziku i transmetimit të agjentëve infektivë nga indet e nxjerra nga kafshët te një pacient njerëzor gjithashtu zvogëlohet kur përdoren polimere kimerike.

Tabela 4. Shartimi i HA i inicuar nga PMGC në rruaza poliakrilamide. Përzierja e reaksionit përmban UDP-(14C)GlcUA dhe UDP-(3H)GlcNAc të radioetiketuar me PMGC, si dhe u prezantuan abetare të ndryshme sheqeri të imobilizuar (pranues të lidhur me aminim reduktues në rruaza amino). Rruazat u lanë dhe u inkorporuan në mënyrë radioaktive në rruaza të tjera, të matura nga llogaritjet e scintilimit të lëngshëm. Zinxhirët GC u shartuan në rruaza plastike duke përdorur një primer të përshtatshëm dhe pmGC.

Figura 4. Paraqitja skematike e strukturave polisakaride të shartuara. Pasteurella spp GC sintaza ose kondroitin sintaza do të zgjerojë disa polimere të tjerë në fundin joreduktues in vitro për të formuar glikozaminoglikane të reja kimerike. Janë paraqitur disa shembuj.

Sinteza e HA monodisperse dhe oligosakarideve të lidhura me HA

Përveç shtimit të një zinxhiri të madh polimerik HA në molekulat pranuese, PMGC-të sintetizojnë disa oligosakaride më të vogla HA që variojnë nga 5 deri në 24 sheqerna. Duke përdorur një enzimë të llojit të egër dhe kushte të ndryshme reagimi, një oligosakarid HA që përmban 4 ose 5 monosakaride të shtrirë me disa sheqerna në versione më të gjata, të cilat janë shumë shpesh të vështira për t'u marrë në sasi të mëdha, përgatitej relativisht lehtë. Ne zbuluam se kombinimi i një mutant të tretshëm GlcUA-Tase dhe një mutant të tretshëm GlcNAc-Tase në të njëjtën përzierje reaksioni lejon formimin e një polimeri HA nëse sistemi është i pajisur me një pranues. Brenda 3 minutave u krijua një zinxhir prej afërsisht 150 sheqernash (-30 kDa). Çdo mutant i vetëm i sintazës nuk do të rezultojë në një zinxhir HA. Prandaj, nëse kontrolli i mëtejshëm i reaksionit bëhet duke kombinuar në mënyrë selektive enzima të ndryshme, sheqerna UDP dhe pranues, atëherë mund të fitohen disa oligosakaride monodisperse (Fig. 5).

Figura 5. Përgatitja e oligosakarideve të caktuara.
Në këtë shembull, një tetrasakarid pranues GC zgjerohet nga një njësi e vetme disakaride kondroitine duke përdorur dy hapa me një mutant sintaza të imobilizuar të llojit Pasteurella (treguar me shigjeta të bardha). Produkti i paraqitur është një heksasakarid i ri. Përsëritja e ciklit edhe një herë prodhon një oligosakarid, dy cikle prodhojnë një dekasakarid, etj. Nëse pranuesi ishte konjuguar më parë me një molekulë tjetër (p.sh. një medikament ose ilaç), atëherë konjugati i ri do të zgjerohej me një zinxhir të shkurtër HA, kondroitinë ose hibrid sipas dëshirës.

Për shembull, në një mishërim, një përzierje e UDP-GlcNAc, UDP-GlcUA dhe pranuesit qarkullon vazhdimisht përmes bioreaktorëve të veçantë me sintaza mutant të imobilizuara që transferojnë vetëm një sheqer të vetëm. Me çdo cikël inkubimi të bioreaktorit, një grup i ndryshëm sheqeri i shtohet pranuesit për të formuar oligosakaride të vogla specifike për HA. Përdorimi i një mutanti të ngjashëm pmCS (p.sh. GalNAc-Tase) në një nga hapat lejoi formimin e oligosakarideve të përziera kur përdoret UDP-GlcNAc. Aktiviteti biologjik dhe potenciali terapeutik i oligosakarideve të vogla HA është një fushë sfiduese e kërkimit që do të kërkojë sheqerna specifike, monodisperse për interpretim të paqartë.

konkluzioni

Me sa duket, ekzistojnë dy klasa të ndryshme të sintazave GC. Enzima e klasës II e karakterizuar më mirë nga speciet Pasteurella zgjeron zinxhirin HA me shtimin e përsëritur të një sheqeri të vetëm në skajin joreduktues të zinxhirit HA. Drejtimi dhe mënyra e funksionimit të sintezave të klasës I (enzimat streptokoke, virale dhe vertebrore) mbeten të paqarta. Lidhur me shkencat e aplikuara, aftësia e pmGCS për të shtrirë molekulat pranuese të vendosura ekzogjenisht është e dobishme për projektimin e molekulave dhe/ose pajisjeve të reja me aplikime të mundshme mjekësore.

Struktura

Molekula acidi hialuronik duket si një fjongo e gjatë e ndërtuar nga sheqerna të alternuara - acidi D-glukuronik dhe N-acetilglukozamina. duke formuar njësinë bazë disaharide ( oriz. 1).

Fig.1. Acidi hialuronik përbëhet nga njësi disakaride të alternuara

Një zinxhir mund të përmbajë deri në 250 mijë njësi disakaride. Pesha molekulare e këtij polisaharidi natyral arrin 10 mijë kDa. HA është pjesë e lëngut sinovial, trupit qelqor dhe gjendet në kordonin e kërthizës, kornesë, kockave, valvulave të zemrës dhe membranave të vezëve.

Prona thelbësisht e rëndësishme acidi hialuronik(HA) lidh dhe mban (për shkak të lidhjeve hidrogjenore) një sasi të madhe uji: 1 molekulë HA lidh 200-500 molekula uji. Në të njëjtën kohë, ai ka një efekt "pelenë" - nuk lëshon ujë edhe kur përmbajtja e tij në mjedis zvogëlohet. Dendësia e lartë e ngarkesave negative të formuara gjatë shpërbërjes së grupeve karboksile (acidike) tërheq një masë kationesh, si jonet Na +, të cilët janë osmotikisht aktivë dhe bëjnë që edhe më shumë ujë të hyjë në matricë. Presioni i lartë i ënjtjes që krijohet në këtë rast është ajo që ne e quajmë turgor. Turgori i dermës, i përcaktuar nga përmbajtja dhe vetitë e HA, siguron turgor .

Meqenëse molekula përmban rajone hidrofile dhe hidrofobike, në tretësira HA me molekulare të lartë (M.m > 1000 kDa) fiton një strukturë hapësinore në formën e një shiriti të përdredhur në mënyrë kaotike, i cili formon një top të lirshëm në hapësirën tre-dimensionale. Bobina të tilla zënë një vëllim të madh (mijëra herë më të madh se vëllimi i vetë makromolekulave!), duke formuar një xhel viskoz edhe në përqendrime shumë të ulëta.

Rrjetet hapësinore në zhvillim me qeliza të një madhësie të caktuar sigurojnë "përzgjedhje natyrale" të molekulave qarkulluese. Kjo "sitë molekulare" natyrore lejon lirshëm kalimin e joneve, sheqernave, aminoacideve dhe molekulave të sinjalit, por ruan (dhe grumbullon) molekula të mëdha, duke përfshirë toksina të ndryshme.

Metabolizmi

Sinteza e HA ndodh në sipërfaqen e brendshme të membranës plazmatike të fibroblasteve. Molekulat e monosakarideve nga të cilat është ndërtuar zinxhiri polimer formohen nga glukoza; dhuruesi i grupit amino është glutamina. Ndërsa makromolekula formohet, ajo nxirret jashtë ( oriz. 2).

Fig.2. Sinteza e glikozaminoglikateve nga fibroblastet (sipas H. Heine, 1997)

Sinteza e HA katalizohet nga enzima hialuronate sintetazë (HAS), e përfaqësuar nga tre varietete (Itano N.):

  • HASi - kryen sintezë të ngadaltë të zinxhirëve me një M prej rreth 200-2000 kDa,
  • HAS2 - është përgjegjës për sintezën e shpejtë të HA me peshë të lartë molekulare me M.m. më shumë se 2000 kDa),
  • HAS3 është më aktive nga enzimat e përfshira në sintezën e HA me M.m. rreth 200-2000 kDa.

Shumë më tepër acid hialuronik sintetizohet në dermë sesa katabolizohet. Rezulton se një pjesë e konsiderueshme e saj është e destinuar për kullimin përmes sistemit limfatik, i cili është një mekanizëm i rëndësishëm për detoksifikimin e indeve, sepse së bashku me të hiqen ekzo- dhe endotoksinat e "ngatërruara" në 8 "rrjete" molekulare. Edhe zinxhirët e mëdhenj të HA me M.m mund të depërtojnë në enët limfatike. rreth 1000 kDa.

Katabolizmi i GC është hap pas hapi dhe i kushtohet rëndësi e madhe në rregullimin e gjendjes së matricës. Aktualisht, biotransformimi i HA konsiderohet si faktori më i rëndësishëm në ruajtjen e homeostazës dhe një nga mekanizmat universalë për zhvillimin e proceseve patologjike (inflamacion, pushtim tumoral dhe metastazë), sepse me zvogëlimin e gjatësisë së zinxhirit origjinal, fragmente me formohet aktiviteti i vet biologjik ( tabela 2).

HA katabolizohet me pjesëmarrjen e hialuronidazave (tipi I dhe II), duke katalizuar reaksionet e hidrolizës dhe depolimerizimit (degradimi jashtëqelizor). Fragmentet e vogla fagocitohen pjesërisht nga makrofagët dhe i nënshtrohen katabolizmit të mëtejshëm me pjesëmarrjen e enzimave lizozomale (3-glukuronidaza dhe (3-acetilglukozaminidaza (degradimi ndërqelizor). 90% e HA që hyn në rrjedhën limfatike periferike shkatërrohet në nyjet 9% limfatike, - në qelizat endoteliale të mëlçisë dhe 1% - në shpretkë.

Në trupin e një të rrituri që peshon 70 kg, të gjitha organet dhe indet përmbajnë gjithsej rreth 15 g acid hialuronik, me 50% që vjen nga lëkura.
Çdo ditë, rreth 5 g HA shkatërrohet dhe sintetizohet përsëri, domethënë "jeta" e kësaj molekule është e kufizuar në disa ditë. HA është komponenti i rinovuar më shpejt i matricës jashtëqelizore. Për krahasim: "jetëgjatësia" e fibrave të pjekura të kolagjenit është disa muaj; fibrat e elastinës në përgjithësi i përkasin strukturave praktikisht jo të rinovueshme.

Tabela 2. Funksionet biologjike të molekulave të acidit hialuronik me pesha të ndryshme molekulare (Stern R et al, 2006)

Zinxhirë të gjatë me M.m.
rreth 500 kDa

Ata shtypin angiogjenezën, parandalojnë migrimin dhe ndarjen e qelizave, ndoshta për shkak të ndryshimeve në ndërveprimin ndërqelizor, pengojnë prodhimin e citokinës IL-1b, prostaglandinës E2 dhe kanë një efekt imunosupresiv.

Molekulat me masë
20-100 kDa

Ato stimulojnë migrimin dhe ndarjen e qelizave, nxisin shërimin e plagëve, sigurojnë integritetin e epitelit dhe marrin pjesë në ovulim dhe embriogjenezë.

Zinxhirët e shkurtër të HA me M.m.
më pak se 0,4-10 kDa

Stimulojnë angiogjenezën, kanë efekte imunomoduluese dhe anti-inflamatore.

Tetrasakaridet

Kanë veti antiapoptotike dhe stimulojnë sintezën e proteinave të goditjes nga nxehtësia.

HA në jetën e bashkësisë qelizore

GC është pjesë e jo vetëm , por edhe shumë organe dhe inde të tjera. Dhe në nivelin e të gjithë organizmit, rregullimi i biosintezës së tij nga fibroblastet kryhet nga sistemi neuroendokrin. Një rol të rëndësishëm i takon hormonit të gjëndrrës së përparme të hipofizës - somatotropinës, e cila stimulon ndarjen dhe aktivitetin sintetik të qelizave të indit lidhës. Kortikotropina dhe glukokortikoidet (kortizoni, hidrokortizoni) pengojnë ndarjen e fibroblasteve dhe nxisin "plakjen e përshpejtuar" të tyre, e cila shoqërohet me një ulje të sintezës së kolagjenit dhe acidit hialuronik. Mineralokortikoidet (aldosteroni, deoksikortikosteroni), përkundrazi, stimulojnë formimin e GC. Estrogjenet kanë një efekt të ngjashëm (shih Shtojcën “HA në trupin e njeriut: fakte interesante”).

Në dermë, ruajtja e niveleve të HA sigurohet nga mekanizmat e autorregullimit bazuar në parimin e reagimit ( skema 2).

Ndërveprimi i HA me qelizat ndodh me pjesëmarrjen e proteinave specifike - hialadherinave, të cilat mund të jenë elementë të aparatit të receptorit qelizor (RHAMM, IHABP) dhe strukturave jashtëqelizore, të cilat përfshijnë versican, aggrecan, fibrinogjen, kolagjenin e tipit VI (shih Shtojcën " Ndërveprimi i HA me receptorët - një mekanizëm për realizimin e aktivitetit të tij biologjik").

Pikërisht në këtë pikë, ndoshta ia vlen të ndalosh dhe të mendosh. Cila është arsyeja për një shpërndarje kaq të gjerë të HA në trupin e njeriut? Dhe në botën e kafshëve në përgjithësi? Çfarë përcakton shumëllojshmërinë e mekanizmave që rregullojnë metabolizmin e tij? Pse aktiviteti biologjik nuk zhduket ndërsa degradohet, por modifikohet? Duke përmbledhur të gjitha sa më sipër dhe duke parë përpara, mund të supozojmë: përgjigja qëndron në shumëllojshmërinë e funksioneve biologjike të këtij biopolimeri unik ( tabela 3).

Tabela 3. Roli biologjik i acidit hialuronik

Është baza e matricës ndërqelizore të hidratuar - mjedisi fiziologjik për migrimin, ndarjen dhe diferencimin e qelizave.

Rregullon aktivitetin sintetik të fibroblasteve, duke përfshirë fazën jashtëqelizore të sintezës së kolagjenit.

Ka një efekt imunomodulues indirekt (si stimulues ashtu edhe duke shtypur imunitetin).

Siguron transportin e lëndëve ushqyese dhe molekulave sinjalizuese nga enët e gjakut në qeliza, si dhe nxjerrjen e produkteve të mbeturinave.

Promovon kullimin dhe detoksifikimin e indit lidhor, është një "kurth" për radikalet e lira.

Ofron rigjenerimin e indeve dhe riparimin e dëmtimit (funksioni plastik).

Merr pjesë në rregullimin e angiogjenezës.

Rregullon morfogjenezën e indeve gjatë zhvillimit embrional.

HA dhe plakja

Pyetja nëse përmbajtja e HA në lëkurë ndryshon me moshën mbetet e diskutueshme. Megjithatë, dihet me siguri se ndërsa trupi plaket, një sasi në rritje e HA kalon nga një gjendje e lirë në një gjendje të lidhur (me proteina). Në të njëjtën kohë, humbet pjesërisht aftësitë e tij unike, përkatësisht: të frenojë reaksionet e oksidimit të radikaleve të lira, të përfshihet në rrugën metabolike dhe të stimulojë fibroblastet, të tërheqë dhe të mbajë ujin. Për shkak të uljes së përmbajtjes së ujit, lëkura humbet elasticitetin e saj dhe struktura e saj e lëmuar deformohet nga rrudhat dhe palosjet.

Në kozmetologji, procedurat e injektimit kanë suksesin më të madh - konturimi, biorevitalizimi, bioreparimi. Përbërësi aktiv i barnave që përdoren për kryerjen e tyre është acidi hialuronik (HA). Pavarësisht deklaratave të diskutueshme në media, acidi hialuronik në kozmetologji nuk e ka humbur popullaritetin e tij për rreth dy dekada.

Roli i HA në trupin e njeriut

Të gjitha sistemet dhe organet përbëhen nga qeliza: gjaku - nga elementët e formuar, mëlçia - nga hepatocitet, sistemi nervor - nga neuronet. Hapësira midis të gjitha qelizave është e zënë nga indi lidhor, i cili përbën rreth 85% të të gjithë trupit. Duke qenë një strukturë e vetme, ajo ndërvepron me të gjitha indet e tjera (epiteliale, nervore, muskulore etj.) dhe kryen ndërlidhjen e tyre me njëri-tjetrin.

Indi lidhor, në varësi të përbërjes së tij, mund të jetë në gjendje të ndryshme fizike - të lëngshme (gjaku, limfa, lëngu sinovial intra-artikular dhe cerebrospinal), i ngurtë (kockë), në formën e një xheli (lëngu ndërqelizor dhe kërc, trupi qelqor i Syri). Është plotësisht i pranishëm në strukturat e lëkurës - dermis, shtresat hipodermale dhe bazale.

Indi lidhor dallohet nga indet e tjera të trupit nga zhvillimi i lartë i bazës së tij me një numër relativisht të vogël strukturash qelizore. Baza përbëhet nga fibra elastine dhe kolagjeni, si dhe proteina komplekse molekulare dhe komponime aminoacide me amino sheqerna. Më i rëndësishmi prej tyre është acidi hialuronik.

Një molekulë HA është e aftë të lidhë rreth 500 molekula uji. Në trupin e një personi të moshës së mesme, ai sintetizohet nga fibroblastet në një sasi prej 15-17 g. Gjysma e tij gjendet në qelizat e shtresës së korneumit të lëkurës, si dhe midis fibrave të elastinës dhe kolagjenit. Ai stimulon prodhimin e këtyre proteinave, krijon kushte për vendndodhjen e tyre fikse, duke i dhënë kështu qëndrueshmëri dhe elasticitet lëkurës.

Video

Proceset e plakjes së indeve

Acidi hialuronik shkatërrohet nga enzima hialuronidazë. Proceset e restaurimit dhe ndarjes së tij ndodhin vazhdimisht. Rreth 70% shkatërrohet dhe restaurohet brenda 24 orëve. Mbizotërimi i një procesi ose një tjetër varet nga:

  • bioritmet ditore dhe sezonale;
  • mosha;
  • gjendje psikologjike;
  • të ushqyerit e dobët;
  • intoksikimi nga nikotina dhe rrezatimi i tepërt UV;
  • duke marrë medikamente të caktuara, etj.

Këta faktorë ndikojnë jo vetëm në sintezën e HA (hialuronat), por edhe në strukturën e tij. Një rënie në sasinë e tij çon në një ulje të ujit të lidhur në inde dhe shfaqjen e shenjave të plakjes. Molekulat me defekt ruajnë aftësinë për të lidhur ujin, por humbasin aftësinë për ta çliruar atë. Për më tepër, proceset natyrore të lidhura me moshën çojnë në përqendrimin e HA në shtresat e thella të lëkurës, gjë që shkakton edemë të indeve ndërqelizore në kufirin e dermës dhe hipodermës dhe dehidratim të shtresave më sipërfaqësore.

Të gjitha këto procese rriten me rritjen e moshës dhe nën ndikimin e faktorëve negativë dhe çojnë në tharje të lëkurës me fryrje të njëkohshme të fytyrës dhe ënjtje poshtë syve, ulje të elasticitetit dhe qëndrueshmërisë së saj, shfaqjen e rrudhave dhe pigmentimit.

Llojet e HA në trup

Veçantia e tij qëndron në praninë e molekulave me gjatësi të ndryshme zinxhirësh polisakaride. Vetitë e acidit hialuronik dhe efekti i tij në qeliza varen kryesisht nga gjatësia e zinxhirit:

  1. Molekulat me zinxhir të shkurtër, ose acidi hialuronik me peshë të ulët molekulare, kanë një efekt anti-inflamator. Ky lloj acidi përdoret për të trajtuar djegiet, ulcerat trofike, aknet, psoriasis dhe skuqjet herpetike. Përdoret në kozmetologji si një nga përbërësit e tonikëve dhe kremrave për përdorim të jashtëm, pasi pa humbur vetitë e tij depërton thellë në lëkurë për një kohë të gjatë.
  2. HA me molekulare mesatare, e cila ka veti të shtypë migrimin, përhapjen e qelizave, etj. Përdoret në trajtimin e syve dhe disa lloje të artritit.
  3. Pesha e lartë molekulare - stimulon proceset qelizore në lëkurë dhe ka aftësinë të mbajë një numër të madh të molekulave të ujit. I jep lëkurës elasticitet dhe rezistencë të lartë ndaj faktorëve të jashtëm negativ. Ky lloj përdoret në oftalmologji, kirurgji dhe në kozmetologji - në përgatitjet për teknikat e injektimit.

Llojet industriale

Në varësi të teknologjisë së prodhimit, hialuronati i natriumit ndahet në dy lloje:

  1. Preparatet me acid hialuronik me origjinë shtazore janë përdorur për një kohë të gjatë. Është marrë nga tretja enzimatike e pjesëve të grimcuara të kafshëve (sytë dhe kërci i bagëtive, krehja e gjelit, lëngu sinovial intra-artikular, litarët e kërthizës) si rezultat i një pastrimi dhe reshjeje të veçantë me dy faza. Teknologjia përfshinte përdorimin e ujit të distiluar dhe temperaturës së lartë (85-100 gradë). Një pjesë e konsiderueshme e fraksionit me peshë të lartë molekulare u shkatërrua, duke u shndërruar në peshë molekulare të ulët. Përveç kësaj, proteinat shtazore mbetën.

    Efekti pas injektimit të barnave të tilla për korrigjimin kozmetik të fytyrës nuk zgjati shumë dhe ndonjëherë kontribuoi në formimin e nyjeve të lëkurës. Por ilaçi ishte veçanërisht i rrezikshëm sepse shpesh shkaktonte reaksione të rënda inflamatore dhe alergjike për shkak të pranisë së proteinave shtazore. Prandaj, kjo teknologji pothuajse nuk përdoret kurrë.

  2. Kohët e fundit, në industrinë farmaceutike, HA janë prodhuar me sintezë bioteknologjike. Për këto qëllime përdoren mikroorganizmat (streptokokët) të rritur në lëngun e grurit. Ato prodhojnë acid hialuronik, i cili në fazat e mëvonshme pastrohet, thahet dhe i nënshtrohet studimeve të përsëritura bakteriologjike dhe kimike. Ky ilaç pothuajse plotësisht korrespondon me acidin e prodhuar në trupin e njeriut. Pothuajse nuk shkakton reaksione alergjike dhe inflamatore.

Aplikimi në kozmetologji

Acidi hialuronik përdoret për injeksion në lëkurë dhe shtresa nënlëkurore duke përdorur metoda të ndryshme:

  1. E injektueshme.
  2. Jo-injektues.

Procedurat e injektimit me acid hialuronik përdoren në teknika të tilla si:

  • , dhe - futja e barit në shtresat e mesme të lëkurës; përdoret për ndryshimet e lidhura me moshën, lëkurën e thatë dhe për të rritur elasticitetin, tonin dhe ngjyrën e saj, eliminimin e akneve, strijave etj.; kohëzgjatja e ruajtjes së acidit hialuronik në dermë është deri në 14 ditë;
  • - mbushja e strukturave nënlëkurore me një substancë për të zbutur rrudhat dhe për të korrigjuar konturet e fytyrës; ilaçi qëndron nën lëkurë për 1-2 javë;
  • dhe - futja e acidit hialuronik të modifikuar, i cili qëndron në lëkurë deri në 3 javë.

Pyetje

Cili është më i mirë: Botox apo HA?

Duke pasur parasysh mekanizmat shumëdrejtues të veprimit të Botox-it dhe acidit hialuronik, ato përdoren për të arritur efekte të ndryshme. Një kombinim i tyre është i mundur. Megjithatë, duhet mbajtur mend se duhet të kalojnë të paktën dy javë pas administrimit.

A është e mundur kombinimi i injektimit të mbushësve të kolagjenit dhe HA?

Mbushësit e bazuar në kolagjen dhe HA shkojnë mirë së bashku. E para i siguron lëkurës densitet dhe strukturë dhe zgjat mesatarisht 4 muaj, e dyta siguron hidratim dhe forcë natyrale për 6-9 muaj.

Çdo përdorim i injeksioneve të acidit hialuronik duhet të kryhet vetëm nga një kozmetolog.

Acidi hialuronik u zbulua në 1934, studimet e para të detajuara të tij filluan të kryheshin në 1949 - 1950. Kjo substancë është izoluar nga inde të ndryshme shtazore - lëngu i kyçeve, kordoni i kërthizës dhe indi i krehrit. Përveç kësaj, në vitin 1937, acidi hialuronik u mor nga kapsulat streptokoke. Studimet e para të vetive fizike dhe kimike të acidit hialuronik u kryen duke përdorur kristalografinë me rreze X.

Probleme me marrjen e HA

Problemi kryesor me të cilin u përballën shkencëtarët gjatë studimit të acidit hialuronik ishte vështirësia e izolimit të tij në formën e tij të pastër, të pastruar nga proteinat dhe përbërësit e tjerë. Vështirësia lindi sepse ekzistonte gjithmonë rreziku i shkatërrimit të strukturës polimer të acidit hialuronik gjatë procesit të pastrimit. Në të njëjtën kohë, shkencëtarët provuan një sërë metodash të pastrimit fizik, kimik dhe enzimatik.

Pak më vonë, filloi kërkimi mbi mundësinë e biosintezës së acidit hialuronik. Në vitin 1955, kjo metodë u gjet për herë të parë. Një grup shkencëtarësh izoluan molekulat e acidit hialuronik nga ekstrakti i streptokokut. Falë këtij zbulimi, u bë e mundur sintetizimi i acidit hialuronik - duke përdorur një fraksion enzimatik të marrë nga streptokokët.

Acidi hialuronik - Aplikimi

Zbulimi kryesor në përdorimin e acidit hialuronik ndodhi në vitet '50. Falë zbulimit të kësaj lënde për përdorim në mjekësi, filloi prodhimi industrial dhe popullarizimi i saj si ilaç.

Në vitin 1970, acidi hialuronik u miratua si një trajtim i provuar për artritin pas rezultateve pozitive nga testimi i kafshëve. Si rezultat i eksperimentit, u vu re një efekt klinik i theksuar me një ulje të simptomave.

Disa vite më vonë, acidi hialuronik filloi të përdoret në thjerrëzat intraokulare të implantueshme, të cilat shpejt e bënë atë një nga komponentët më të përdorur në oftalmologjinë kirurgjikale. Që nga ai moment filluan të propozohen dhe testohen metoda dhe aplikime të ndryshme të acidit hialuronik.

GC për sot

Në vitet '90 acidi hialuronik ka gjetur aplikim të gjerë në mjekësinë estetike dhe kozmetologjinë, falë vetive unike ruajtëse të lagështirës, ​​si dhe vetive antiseptike dhe antioksiduese. Deri më sot, ai përdoret për qëllime të ndryshme kozmetike dhe kërkimet mbi vetitë e tij dhe fushat e mundshme të aplikimit vazhdojnë.

Sot, si botimet me shkëlqim ashtu edhe faqet e mediave të rregullta janë plot me referenca për acidin hialuronik. Gjatë viteve të fundit, ata na kanë thënë se “sekret i lëkurës së përjetshme rinore është zbuluar” dhe na sugjerojnë që ta përdorim këtë “eliksir”. Le të përpiqemi të kuptojmë se çfarë ka më shumë në këtë zhurmë të pashëndetshme - informacione të vërteta, llogaritje të sakta tregtare ose keqkuptime banale filiste.

Zbulime të së shkuarës që nuk i përmbushën pritshmëritë

Nëse shikoni të kaluarën shumë të afërt, mund të mbani mend se situata të ngjashme kanë ndodhur tashmë në historinë e mjekësisë:

  • Zbulimi i penicilinës u prezantua si një fitore e plotë ndaj mikroorganizmave (gjë që, për fat të keq, nuk ndodhi, pavarësisht spektrit aktual).
  • Insulina e prodhuar ishte parashikuar të ishte një fitore ndaj (ilaçi për diabetikët është jetik dhe jashtëzakonisht i nevojshëm, por një fitore e plotë mbi diabetin është ende shumë larg).
  • Përdorimi i antipsikotikëve të parë u prezantua si një kurë e mundshme për disa çrregullime mendore, por edhe këtu gjithçka është larg pritshmërive ideale.

Në përgjithësi, pamja e vërtetë pas disa kohësh ende ndryshon nga parashikimet dhe vlerësimet fillestare. Prandaj, është shumë e rëndësishme që gjithçka të trajtohet në mënyrë kritike dhe sa më objektive.

Heqja e miteve rreth acidit hialuronik

Asnjë nga mjekët nuk do të argumentojë se acidi hialuronik është i rëndësishëm për trupin e njeriut, por pasuria e informacionit që mund të gjendet sot në media dhe që paraqitet si e vërtetë, mjerisht, nuk na vjen nga profesionistët. Më shpesh, mendimet novatore u sjellin njerëzve nga lloje të ndryshme ekspertësh bukurie, blogerë autodidakt dhe njerëz të tjerë pa arsim të specializuar mjekësor, farmaceutik ose biologjik. Ata flasin për një drogë bazuar në përshtypjet e tyre gjykuese, informacione nga burime të dyshimta ose informacione të nxjerra jashtë kontekstit

Kështu lindin keqkuptimet. Le të përpiqemi të ndajmë grurin nga byku dhe ta kuptojmë këtë çështje në mënyrë më të detajuar.

E vërtetë

Keqkuptimi kryesor është se ilaçi quhet në njëjës, por është e saktë ta quajmë atë në shumës - acide, pasi është një nga përbërjet e grupit të mukopolisakarideve acidike, i cili përfshin komponime të tjera me përbërje dhe veti të ngjashme, dhe masa e tyre mund të ndryshojë shumë. Meqenëse shumica dërrmuese e barnave të tregtuara nën emrin "acidi hialuronik" prodhohen nga lëndë të para biologjike pa ndarje të veçantë të fraksioneve, është krejtësisht e gabuar të konsiderohet ilaçi vetëm si një përbërës i pastër.

Acidi hialuronik është rezultat i zbulimeve në laboratorët e bukurisë gjatë dy ose tre dekadave të fundit.

Vetë substanca u zbulua në vitin 1930 dhe studimi i vetive, funksioneve dhe mundësive të aplikimit të saj filloi pothuajse menjëherë pas zbulimit të saj. Vetë kërkimi nuk u ndal dhe duke filluar nga vitet 70 të shekullit të kaluar, intensiteti i tij filloi të rritet.

Kjo substancë përdoret në kozmetikë dhe produkte bukurie

Përveç kësaj zone të zhvilluar, acidi hialuronik përdoret si ilaç për sëmundje të ndryshme të organeve dhe sistemeve të tjera.

Në produktet kozmetike, përmirëson depërtimin e substancave të dobishme në lëkurë

Nuk ndikon në nivelin e përshkueshmërisë qelizore dhe ndërqelizore për substanca të ndryshme

Plakja e lëkurës shoqërohet me humbje të lëngjeve për shkak të uljes së nivelit të substancave të këtij grupi në të gjitha shtresat e lëkurës.

Nëse një rënie në përmbajtjen e hialuronateve ndodh me moshën, nuk është aq e rëndësishme, dhe plakja, përfshirë lëkurën, është një proces i përgjithshëm biologjik kompleks, i shumëanshëm, dhe reduktimi i manifestimeve të tij në arsye të tilla banale është thjesht marrëzi.

E vërteta për acidin hialuronik

Të gjitha vetitë dhe karakteristikat dhe veçoritë dalluese të acidit hialuronik përshkruhen në detaje në literaturën shkencore dhe mjekësore. Megjithatë, ai është i mbingopur me shumë terma, gjë që e bën informacionin e disponueshëm jo gjithmonë të kuptueshëm për personin mesatar.

Nëse përpiqemi të thjeshtojmë pak gjithçka, rezulton se:


Çdo fraksion ka grupin e vet të vetive dhe karakteristikave. Kështu që specie me peshë të ulët molekulare substancat kanë efekte të shkëlqyera anti-inflamatore, të cilat siguruan përdorimin e tyre për djegiet, ulcerat trofike, skuqjet herpetike, psoriasis . Acidi hialuronik me peshë molekulare mesatare të aftë për të shtypur riprodhimin dhe migrimin e qelizave. Për shkak të këtyre vetive, përdoret në trajtimin e disa sëmundjeve të artritit dhe syve. Fraksionet me peshë të lartë molekulare ruajnë një numër të madh molekulash uji rreth tyre dhe stimulojnë proceset qelizore në vetë lëkurën. Ky lloj acidi hialuronik ka gjetur përdorim në kirurgji, oftalmologji dhe kozmetologji.

Është e rëndësishme të dini! Është rreptësisht e ndaluar të përdorni një ilaç me një madhësi molekulare të paspecifikuar të substancës aktive, pasi jo vetëm që mund të mos arrini rezultatin e dëshiruar, por edhe të përkeqësoni gjendjen.

Indikacionet kryesore për përdorimin e acidit hialuronik

Duhet mbajtur mend gjithmonë se futja e barnave në trup injeksion i acidit hialuronikështë kryesisht një procedurë mjekësore. Ekzistojnë kritere mjaft strikte mjekësore për përdorimin e teknikave dhe procedurave të ndryshme.

Kështu, indikacionet kryesore për përdorimin e acidit hialuronik janë:

  • shfaqja e rrudhave (ulja e turgorit të lëkurës) për shkak të humbjes së lagështirës;
  • rritja e ashpërsisë së rrudhave ekzistuese;
  • rrudha të shprehura të theksuara;
  • nevoja për të normalizuar strukturën e lëkurës;
  • nevoja për të përmirësuar turgorin dhe konturin e kufirit të kuq të buzëve.

Preparate të acidit hialuronik në mjekësinë estetike

Në kozmetologjinë moderne, kërkesa për acid hialuronik në formën e injeksioneve ose formave të tjera të ilaçit shpjegohet me:


Tregu modern farmakologjik ofron acidin hialuronik në formën e injeksioneve. Në këtë rast, mund të jetë në formën:

  • Mesokoktej, e cila përfshin substancën kryesore, të plotësuar me pantenol, vitamina, koenzima, faktorë të rritjes së qelizave, peptide dhe substanca të tjera
  • Mbushëse- një mbushës dermal i bërë nga HA me lidhje të kryqëzuara, i cili biodegradohet me kalimin e kohës - absorbohet në trup. E disponueshme në formën e një xhel me shkallë të ndryshme viskoziteti. Sa më viskoze të jetë substanca, aq më të mëdha janë problemet me të cilat është krijuar.
  • Ridermalizues dhe biorevitalizues. Aktualisht, 3 gjenerata të këtyre barnave mund të gjenden në raftet e farmacive. Këto të fundit bazohen në acidet nukleike që krijojnë komplekse me HA që mund të rivendosin ADN-në e qelizave dhe të përshpejtojnë prodhimin e acidit të tyre hialuronik, si dhe elastinës dhe kolagjenit.
  • Agjentët bioremediatues– barna që përmbajnë HA të modifikuar, në zinxhirin e të cilave janë ngjitur peptide, vitamina dhe aminoacide. Ata kanë një efekt të zgjatur dhe të zgjeruar.

Shënim: në industrinë e bukurisë mund të përdoren pomada, kremra, xhel dhe locione për përdorim të jashtëm, por efektiviteti i tyre është shumë më i ulët se ai i acidit hialuronik për injeksion.

Llojet kryesore të procedurave për të përmirësuar gjendjen e lëkurës së fytyrës

Procedurat më të njohura të injektimit me acid hialuronik janë:


Kundërindikimet kryesore për përdorimin e acidit hialuronik

Nëse tregtarët po përpiqen t'ju sigurojnë se injeksionet e acidit hialuronik, kudo që ato administrohen, janë sa më të sigurta, dijeni: kjo është një gënjeshtër! Në sfondin e disa procedurave, ato janë me të vërtetë më të sigurta, megjithatë, ky ilaç ka gjithashtu kundërindikacionet e veta.

Ato kryesore përfshijnë:

  1. Çdo reaksion alergjik ndaj substancës aktive ose përbërësve të tij.
  2. Çdo sëmundje infektive në periudhën akute.
  3. Shtatzënia, lindja e fëmijës dhe laktacioni pasues.
  4. Patologjia e indit lidhor.
  5. Sëmundjet e përgjithshme dhe sistemike, të tilla si lezione autoimune, patologji onkologjike të çdo organi dhe sistemi, diabeti, patologjia e sistemit të koagulimit të gjakut.

Përveç kësaj, shenjat e lindjes, nishanet, plagët dhe proceset inflamatore nuk duhet të vendosen në vendin e injektimit. Nëse këto kundërindikacione nuk respektohen, rezultatet mund të jenë katastrofike.

Efektiviteti i kremrave me acid hialuronik

Një grup i veçantë i barnave dhe mjaft të zakonshme janë kremrat me acid hialuronik. Ato përdoren duke i aplikuar në sipërfaqen e lëkurës, ku prodhojnë një efekt të menjëhershëm.

Për ndryshime sipërfaqësore dhe mbrojtje të lëkurës përdoren produkte që përmbajnë fraksione me peshë të lartë molekulare, të cilat krijojnë një shtresë mbrojtëse dhe nuk depërtojnë në lëkurë.

Për të korrigjuar ndryshimet e thella, të lidhura me moshën, produktet me fraksione me peshë molekulare të ulët të substancës aktive janë më të përshtatshme, pasi ajo mund të depërtojë pjesërisht në një thellësi të caktuar në shtresat e brendshme, ku ndodh efekti i tyre biologjik.

Kohët e fundit, metodat jo-injektuese janë bërë gjithnjë e më popullore, duke përfshirë aplikimin e një xheli në lëkurë të ndjekur nga ekspozimi ndaj mikrorrymave, lazerit dhe ultrazërit.

Do të doja ta mbyllja me këshilla: ka një kohë dhe një arsye për gjithçka, dhe rregulli kryesor i një jete të shëndetshme, humor të shkëlqyer dhe pamje të bukur është moderimi. Në kërkim të bukurisë, përpiquni të përdorni edhe një produkt të tillë si acidi hialuronik pa tepricë dhe lëkura juaj do të duket e mirë edhe në pleqëri.

Do të merrni informacion më të detajuar në lidhje me përdorimin e preparateve të acidit hialuronik për fytyrën duke shikuar rishikimin e videos:

Sovinskaya Elena Nikolaevna, terapiste.