Incidenti 

Kvalitativno određivanje proteina u urinu. Proteini u urinu (proteinurija). Određivanje proteina u urinu


Sadržaj [Prikaži]

Zdrava osoba dnevno izlučuje 1,0-1,5 litara urina. Sadržaj 8-10 mg / dl proteina u njemu je fiziološki fenomen. Dnevna norma proteina u urinu od 100-150 mg ne bi trebala izazvati sumnju. Globulin, mukoprotein i albumin čine ono što čini ukupni protein u urinu. Veliki odliv albumina ukazuje na kršenje procesa filtracije u bubrezima i naziva se proteinurija ili albuminurija.

Svaka supstanca u urinu ima „zdravu“ normu, a ako pokazatelj proteina varira, to može ukazivati ​​na patologiju bubrega.

Opća analiza urina uključuje upotrebu prvog (jutarnjeg) obroka ili se uzima dnevni uzorak. Ovo drugo je poželjno za procjenu nivoa proteinurije, jer sadržaj proteina ima izražene dnevne fluktuacije. Tokom dana urin se sakuplja u jednu posudu, mjeri se ukupna zapremina. Za laboratorij koji analizira mokraću na proteine ​​dovoljan je standardni uzorak (50 do 100 ml) iz ove posude, ostalo nije potrebno. Za dodatne informacije provodi se dodatni test prema Zimnitsky-u, koji pokazuje jesu li pokazatelji urina dnevno normalni.

Metode za određivanje proteina u urinu
Pogled Podvrste Karakteristike
Kvalitativno Gelerov test Ispitivanje urina na protein
Test na sulfosalicilnu kiselinu
Analiza vrenja
Kvantitativni Turbidimetrijska Protein iz urina stupa u interakciju s reagensom, što rezultira smanjenom topljivošću. Sulfosalicilna i trihlorocetna kiselina, benzetonijum hlorid koriste se kao reagensi.
Kolorimetrijski Sa nekim supstancama protein u urinu mijenja boju. To je osnova biuretske reakcije i Lowryjeve metode. Koriste se i drugi reagensi - briljantno plava, pirogalol crvena.
Polukvantitativni Dajte relativnu indikaciju količine proteina, a rezultat se tumači promjenom boje uzorka. Polukvantitativne metode uključuju test trake i metodu Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Povratak na sadržaj

Proteini u urinu obično kod odrasle osobe ne smiju prelaziti 0,033 g / l. Istovremeno, dnevna doza nije viša od 0,05 g / l. Za trudnice je norma proteina u dnevnom urinu veća - 0,3 g / l, a ujutro je ista - 0,033 g / l. Norme proteina razlikuju se u opštoj analizi urina i kod djece: 0,036 g / l za jutarnju porciju i 0,06 g / l dnevno. Najčešće se u laboratorijama analize provode na dvije metode, koje pokazuju koliko je frakcija proteina sadržana u urinu. Gore navedene normalne vrijednosti vrijede za analizu provedenu sa sulfosalicilnom kiselinom. Da se koristi pirogalol crvena, vrijednosti bi se razlikovale za faktor tri.


Povratak na sadržaj

  • filtracija u bubrežnim glomerulima ide pogrešnim putem;
  • apsorpcija proteina u tubulima je oslabljena;
  • neke bolesti opterećuju bubrege - kad je protein u krvi povišen, bubrezi jednostavno "nemaju vremena" da ga filtriraju.

Ostali uzroci smatraju se nerenalnim. Tako se razvija funkcionalna albuminurija. Protein u analizi urina pojavljuje se u slučaju alergijskih reakcija, epilepsije, zatajenja srca, leukemije, trovanja, mijeloma, hemoterapije, sistemskih bolesti. Najčešće će takav pokazatelj u pacijentovim analizama biti prvo zvono hipertenzije.

Povećanje proteina u urinu može biti posljedica faktora nepatološke prirode, pa će biti potrebni dodatni testovi.

Kvantitativne metode za određivanje proteina u mokraći daju pogreške, stoga se preporučuje izvršiti nekoliko analiza, a zatim pomoću formule izračunati tačnu vrijednost. Sadržaj proteina u urinu mjeri se u g / l ili mg / l. Ovi pokazatelji proteina omogućuju utvrđivanje nivoa proteinurije, sugeriranje uzroka, procjenu prognoze i određivanje strategije.

Povratak na sadržaj

Za potpuno funkcioniranje tijela neophodna je stalna razmjena krvi i tkiva. To je moguće samo ako u krvnim žilama postoji određeni osmotski pritisak. Proteini u plazmi održavaju takav nivo pritiska kada niskomolekularne supstance lako prelaze iz okoline s visokom koncentracijom u sredinu s nižom. Gubitak molekula proteina dovodi do ispuštanja krvi iz njegovog kreveta u tkivo, što je opterećeno jakim edemom. Tako se manifestuje umjerena i teška proteinurija.


Početne faze albuminurije su asimptomatske. Pacijent obraća pažnju samo na manifestacije osnovne bolesti, što je razlog pojave proteina u mokraći.

Trag proteinurija odnosi se na porast nivoa proteina u mokraći zbog upotrebe određene hrane.

Urin za analizu sakuplja se u čistu posudu bez masti. Prije sakupljanja prikazan je zahod perineuma, potrebno je da se operete sapunom. Ženama se savjetuje zatvoriti vaginu komadom vate ili tamponom, tako da iscjedak iz rodnice ne utječe na rezultat. Uoči je bolje ne piti alkohol, mineralnu vodu, kafu, začinjenu, slanu i hranu koja urinu daje boju (borovnice, cvekla). Snažni fizički napori, dugotrajno hodanje, stres, povišena temperatura i znojenje, prekomjerna konzumacija proteinske hrane ili lijekova prije mokraće izazivaju pojavu proteina u analizi urina potpuno zdrave osobe. Ovo je poznato kao proteinurija u tragovima.

Povratak na sadržaj

Bubrežna bolest koja dovodi do gubitka proteina:

  • Amiloidoza. Normalne ćelije u bubrezima zamenjuju amiloidi (protein-saharidni kompleks), što sprečava normalno funkcionisanje organa. U fazi proteinurije, amiloidi se talože u bubrežnim tkivima, uništavajući nefron i, kao rezultat, bubrežni filter. Tako protein prelazi iz krvi u urin. Ova faza može trajati više od 10 godina.
  • Dijabetička nefropatija. Zbog nepravilnog metabolizma ugljikohidrata i lipida dolazi do uništavanja krvnih žila, glomerula i tubula u bubregu. Proteini u mokraći prvi su znak predviđene komplikacije dijabetes melitusa.
  • Bolesti upalne geneze - nefritis. Lezije najčešće pogađaju krvne sudove, glomerule i čašicno-zdjelični sistem, narušavajući normalan tok sistema filtracije.
  • Glomerulonefritis je u većini slučajeva autoimuni. Pacijent se žali na smanjenje količine urina, bolove u leđima i povećan pritisak. Za liječenje glomerulonefritisa preporučuju se dijeta, režim i terapija lijekovima.
  • Pijelonefritis. U akutnom periodu prolazi sa simptomima bakterijske infekcije: hladnoćom, mučninom, glavoboljom. To je zarazna bolest.
  • Policistična bolest bubrega.

U zdravom tijelu, molekuli proteina (i oni su prilično velike veličine) ne mogu proći kroz filtracijski sustav bubrega. Zbog toga u urinu ne bi trebalo biti proteina. Ovaj pokazatelj je isti i za muškarce i za žene. Ako analiza ukazuje na proteinuriju, važno je posjetiti liječnika kako bi se utvrdili razlozi. Specijalista će procijeniti koliko je povećana razina proteina, postoji li istodobna patologija, kako uspostaviti normalno funkcioniranje tijela. Prema statistikama, žena ima veći rizik od genitourinarnih bolesti od muškarca.

Princip metode zasnovan na koagulaciji proteina u urinu u prisustvu azotne (ili 20% sulfosalicilne) kiseline.

Napredak: dodajte 1-2 kapi azotne (ili sulfosalicilne) kiseline u 5 kapi urina. Zamućenost se pojavljuje u urinu ako je prisutan protein.

Tabela. Otkrivanje patoloških komponenata urina .


Bilješka: u prisustvu glukoze i proteina u urinu određuje se njihov kvantitativni sadržaj.

Princip metode : kada protein u interakciji s pirogalol crvenim i natrijum molibdatom nastaje obojeni kompleks čiji je intenzitet boje proporcionalan koncentraciji proteina u uzorku.

Reagensi: Radni reagens - otopina pirogalol crvene boje u sukcinatnom puferu, otopina za kalibraciju proteina s koncentracijom od 0,50 g / l

Napredak:

Pomiješajte uzorke i pustite da odstoje 10 minuta. na sobnoj temperaturi (18 -25 ° C). Izmjerite optičku gustinu eksperimentalnih (Dop) i kalibracijskih uzoraka (Dc) prema kontrolnom uzorku na λ = 598 (578-610) nm. Boja je postojana 1 sat.

Plaćanje: koncentracija proteina u urinu (C) g / l izračunava se po formuli:

C = Dop / Dk × 0,50

gdje je: Dop = Dk = C = g / l.

Normalne vrijednosti: do 0,094 g / l, (0,141 g / dan)

Izlaz:

Princip metode : Kada se D-glukoza oksidira atmosferskim kisikom pod dejstvom glukoze oksidaze, nastaje ekvimolarna količina vodonik-peroksida. Pod dejstvom peroksidaze, vodonik-peroksid oksidira hromogene supstrate (smeša fenola i 4 aminoantipirina - 4AAP) formirajući obojeni proizvod. Intenzitet boje proporcionalan je sadržaju glukoze.

glukoza oksidaza


Glukoza + O2 + H2O glukonolakton + H2O2

peroksidaza

2H2O2 + fenol + 4AAP obojeni spoj + 4H2O

Napredak: u dvije epruvete dodajte 1 ml radne otopine i 0,5 ml fosfatnog pufera. U prvu epruvetu dodajte 0,02 ml urina, a u drugu 0,02 ml kalibratora (kalibracija, standardni rastvor glukoze, 10 mmol / L). Uzorci se miješaju, inkubiraju 15 minuta na temperaturi od 370 ° C u termostatu i mjeri se optička gustina eksperimentalnih (Dop) i kalibracijskih (Dc) uzoraka u odnosu na radni reagens na talasnoj dužini 500-546 nm.

Proračun: S = Dop / Dk  10 mmol / l Dop = Dk =

Izlaz:

Bilješka. Ako je sadržaj šećera u urinu veći od 1%, mora se razrijediti.

Trenutno biohemijske laboratorije koriste jedinstvenu ekspresnu metodu za analizu urina na glukozu pomoću reaktivnog papira za glukozu "Glucotest" ili kombinirane test trake za pH, proteine, glukozu, ketonska tijela i krv. Test trake su uronjene u posudu s urinom na 1 sekundu. i uporedite boju na skali.

Određivanje proteina pomoću indikatora pirogalol crvene boje

Princip metode zasnovan je na fotometrijskom mjerenju optičke gustine otopine obojenog kompleksa nastalog interakcijom molekula proteina s molekulama kompleksa boje Pyrogallol Red-Molybdate u kiselom mediju. Intenzitet boje otopine proporcionalan je sadržaju proteina u ispitivanom materijalu. Prisustvo deterdženata u reagensu omogućava ekvivalentno određivanje proteina različite prirode i strukture.

Reagensi. 1) 1,5 mmol / L pirogalol crvene (PGA) otopine: 60 mg PGA rastvori se u 100 ml metanola. Čuvati na temperaturi od 0–5 ° C; 2) 50 mmol / L sukcinatnog puferskog rastvora pH 2,5: 5,9 g jantarne kiseline (HOOC - CH2 - CH2 - COOH); 0,14 g natrijum-oksalata (Na2C2O4) i 0,5 g natrijum-benzoata (C6H5COONa) rastvori se u 900 ml destilovane vode; 3) 10 mmol / l rastvora natrijum molibdata kristalni hidrat (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg natrijum molibdata rastvara se u 100 ml destilovane vode; 4) Radni reagens: U 900 ml pufer rastvora sukcinata dodaje se 40 ml otopine PGC i 4 ml otopine natrijum molibdata. PH otopine se podesi na 2,5 sa 0,1 mol / l otopine klorovodične kiseline (HCl) i zapremina se prilagodi na 1 l. Reagens u ovom obliku spreman je za upotrebu i stabilan je kada se 6 meseci čuva na tamnom mestu na temperaturi od 2–25 ° C; 5) 0,5 g / l standardne otopine albumina.

Napredak u određivanju. U prvu epruvetu se doda 0,05 ml test urina, u drugu epruvetu 0,05 ml standardne otopine albumina i u treću epruvetu 0,05 ml destilirane vode (kontrolni uzorak), a zatim se doda 3 ml radnog reagensa cijevi. Sadržaj epruveta se miješa i nakon 10 minuta uzorak i standard su fotometrijski naspram kontrolnog uzorka na talasnoj dužini od 596 nm u kiveti sa optičkom dužinom puta od 10 mm.


Proračun koncentracije proteina u uzorku urina koji se proučava vrši se prema formuli:

gdje je C koncentracija proteina u uzorku urina koji se proučava, g / l; Apr i Ast - izumiranje analiziranog uzorka urina i standardne otopine albumina, g / l; 0,5 - koncentracija standardne otopine albumina, g / l.

Napomene:

  • boja otopine (kompleks boja) je stabilna jedan sat;
  • direktno proporcionalni odnos između koncentracije proteina u testnom uzorku i apsorpcije otopine ovisi o vrsti fotometra;
  • ako je sadržaj proteina u urinu veći od 3 g / l, uzorak se razrijedi izotoničnom otopinom natrijevog klorida (9 g / l) i određivanje se ponavlja. Faktor razblaživanja uzima se u obzir pri određivanju koncentracije proteina.

Pogledajte takođe:

  • Određivanje proteina u urinu
  • Standardizirani uzorak sa sulfosalicilnom kiselinom
  • Objedinjena Brandberg - Roberts - Stolnikov metoda
  • Određivanje količine proteina u urinu reakcijom sa sulfosalicilnom kiselinom
  • Biuret metoda
  • Otkrivanje Bens-Jones proteina u urinu

Proteinurija je pojava kod koje se proteini određuju u mokraći, što ukazuje na mogućnost oštećenja bubrega, služi kao faktor u razvoju bolesti srca, krvi, limfnih žila.

Pronalaženje proteina u urinu ne ukazuje uvijek na bolest. Slična pojava tipična je čak i za apsolutno zdrave ljude u čijoj se mokraći mogu odrediti proteini. Hipotermija, fizička aktivnost, upotreba proteinske hrane dovodi do pojave proteina u urinu, koji nestaju bez ikakvog tretmana.

Tijekom skrininga protein se određuje kod 17% naizgled zdravih ljudi, ali samo 2% od ovog broja ljudi ima pozitivan rezultat testa koji je znak bolesti bubrega.

Molekuli proteina ne smiju ući u krvotok. Oni su vitalni za tijelo - oni su građevinski materijal za stanice, sudjeluju u reakcijama kao koenzimi, hormoni, antitijela. I za muškarce i za žene norma je potpuno odsustvo proteina u mokraći.

Funkciju sprečavanja gubitka molekula proteina u tijelu obavljaju bubrezi.

Postoje dva bubrežna sistema koja filtriraju urin:

  1. bubrežni glomeruli - ne propuštaju velike molekule, ali ne zadržavaju albumine, globuline - mali udio molekula proteina;
  2. bubrežni tubuli - adsorbiraju proteine ​​filtrirane glomerulima, vraćaju ih natrag u krvožilni sistem.

U urinu se nalaze albumini (oko 49%), mukoproteini, globulini, od kojih su oko 20% imunoglobulini.

Globulini su proteini sirutke velike molekularne težine koje proizvode imuni sistem i jetra. Većinu njih sintetizira imuni sistem, odnose se na imunoglobuline ili antitela.

Albumin je frakcija proteina koja se prva pojavljuje u mokraći čak i uz manja oštećenja bubrega. Određena količina albumina također je prisutna u zdravoj mokraći, ali je toliko beznačajna da se ne otkriva pomoću laboratorijske dijagnostike.

Donji prag koji se može otkriti laboratorijskom dijagnostikom je 0,033 g / l. Ako se dnevno izgubi više od 150 mg proteina, onda oni govore o proteinuriji.


Osnovni podaci o proteinima u urinu

Bolest sa blagim stepenom proteinurije je asimptomatska. Vizualno se mokraća bez proteina ne može razlikovati od urina koji sadrži malu količinu proteina. Pomalo pjenast urin postaje već s visokim stupnjem proteinurije.

Moguće je pretpostaviti aktivno izlučivanje proteina mokraćom pojavom pacijenta samo sa prosječnim ili teškim stepenom bolesti zbog pojave edema udova, lica, trbuha.

U ranim fazama bolesti, indirektni znakovi proteinurije mogu biti simptomi:

  • promjene u boji urina;
  • sve veća slabost;
  • nedostatak apetita;
  • mučnina, povraćanje;
  • bolovi u kostima;
  • pospanost, vrtoglavica;
  • povišena temperatura.

Pojava takvih znakova ne može se zanemariti, posebno tokom trudnoće. To može značiti blago odstupanje od norme ili može biti simptom razvoja preeklampsije, preeklampsije.

Kvantificiranje gubitka proteina nije lak zadatak; nekoliko laboratorijskih testova koristi se za postizanje potpunije slike o stanju pacijenta.

Poteškoće u odabiru metode za otkrivanje viška proteina u urinu objašnjavaju se:

  • niska koncentracija proteina, što zahtijeva prepoznavanje preciznih instrumenata;
  • sastav urina, što otežava zadatak, jer sadrži supstance koje narušavaju rezultat.

Najviše podataka može se dobiti iz analize prvog uzorka jutarnjeg urina, koji se uzima nakon buđenja.

Uoči analize moraju se ispuniti sljedeći uslovi:

  • ne konzumirajte začinjenu, prženu, proteinsku hranu, alkohol;
  • isključiti uzimanje diuretika 48 sati unaprijed;
  • ograničiti fizičku aktivnost;
  • pažljivo poštujte pravila lične higijene.

Jutarnji urin je najinformativniji, jer se dugo zadržava u mokraćnom mjehuru i manje ovisi o unosu hrane.

Količinu proteina u urinu moguće je analizirati slučajnim dijelom, koji se uzima u bilo kojem trenutku, ali takva analiza je manje informativna, vjerojatnost pogreške je veća.

Da bi se kvantificirao dnevni gubitak proteina, vrši se analiza ukupnog dnevnog urina. Da bi se to postiglo, sav urin izlučen tokom dana sakuplja se u posebnu plastičnu posudu. Možete početi sa prikupljanjem bilo kada. Glavni uvjet je tačno jedan dan sakupljanja.

Kvalitativna definicija proteinurije zasniva se na svojstvu proteina da denaturira pod uticajem fizičkih ili hemijskih faktora. Kvalitativne metode odnose se na metode probira koje omogućavaju utvrđivanje prisustva proteina u urinu, ali ne omogućavaju preciznu procjenu stepena proteinurije.

Uzorci koji se koriste:

  • ključanje;
  • sulfosalicilna kiselina;
  • dušična kiselina, Larionov reagens sa Gellerovim prstenastim testom.

Test sa sulfosalicilnom kiselinom vrši se upoređivanjem kontrolnog uzorka urina sa eksperimentalnim, u koji se u urin dodaje 7-8 kapi 20% sulfosalicilne kiseline. Zaključak o prisustvu proteina donosi intenzitet opalescentne zamućenosti koja se pojavljuje u epruveti tokom reakcije.

Češće se koristi Geller-ov test koji koristi 50% azotne kiseline. Osetljivost metode je 0,033 g / l. Pri takvoj koncentraciji proteina, 2-3 minute nakon početka eksperimenta u epruveti se pojavljuje bijeli prsten nalik niti, s uzorkom urina i reagensom, čije stvaranje ukazuje na prisustvo proteina.

Gelerov test

Polukvantitativne metode uključuju:

  • metoda za određivanje proteina u urinu pomoću test traka;
  • Brandberg-Roberts-Stolnikov metoda.

Metoda određivanja metodom Brandberg-Roberts-Stolnikov temelji se na metodi Geller prstena, ali omogućava precizniju procjenu količine proteina. Pri izvođenju testa prema ovoj tehnici, nekoliko razrjeđenja urina postiže izgled nitastih proteinskih prstena u vremenskom intervalu između 2 - 3 minute od početka ispitivanja.

U praksi se koristi metoda test traka presvučenih bromofenol plavom bojom kao indikator. Nedostatak test traka je selektivna osjetljivost na albumin, što dovodi do iskrivljenja rezultata u slučaju povećanja koncentracije globulina ili drugih proteina u urinu.

Mane metode uključuju i relativno nisku osetljivost testa na protein. Test trake počinju reagirati na prisustvo proteina u urinu kada koncentracija proteina pređe 0,15 g / L.

Kvantitativne metode procjene mogu se grubo podijeliti na:

  1. turbidimetrijska;
  2. kolorimetrijski.

Metode se temelje na svojstvu proteina da smanjuju topljivost pod dejstvom vezivnog sredstva uz stvaranje slabo topljivog jedinjenja.

Sredstva za vezivanje proteina mogu biti:

  • sulfosalicilna kiselina;
  • triklorooctena kiselina;
  • benzetonijum hlorid.

Rezultati ispitivanja izrađeni su na osnovu stepena slabljenja svjetlosnog toka u uzorku sa suspenzijom u odnosu na kontrolu. Rezultate ove metode nije uvijek moguće pripisati pouzdanim zbog razlika u uvjetima provođenja: brzine miješanja reagensa, temperature, kiselosti medija.

Uticati na procjenu uzimanja lijekova dan prije, prije provođenja testova pomoću ovih metoda, ne možete uzeti:

  • antibiotici;
  • sulfonamidi;
  • preparati koji sadrže jod.

Metoda je pristupačna, što omogućava široku upotrebu za skrining. Ali tačniji rezultati mogu se dobiti korištenjem skupljih kolorimetrijskih tehnika.

Kolorimetrijske tehnike su osjetljive metode koje precizno određuju koncentraciju proteina u urinu.

To se može učiniti s velikom preciznošću:

  • biuretna reakcija;
  • Lowryjeva tehnika;
  • tehnike bojenja koje koriste boje koje sa proteinima urina tvore komplekse koji se vizuelno razlikuju od uzorka.

Kolorimetrijske metode za otkrivanje proteina u urinu

Metoda je pouzdana, vrlo osjetljiva, omogućava određivanje albumina, globulina, paraproteina u urinu. Koristi se kao glavni način za razjašnjavanje kontroverznih rezultata ispitivanja, kao i dnevnih proteina u urinu kod pacijenata sa nefrološkim odjelima bolnica.

Još precizniji rezultati mogu se postići Lowryjevom metodom koja se temelji na biuretskoj reakciji, kao i Folinovom reakcijom koja prepoznaje triptofan i tirozin u molekulama proteina.

Da bi se isključile moguće greške, uzorak urina pročišćava se dijalizom od aminokiselina i mokraćne kiseline. Moguće su greške kada se koriste salicilati, tetraciklini, hlorpromazin.

Najtočnija metoda za određivanje proteina temelji se na njegovoj sposobnosti vezivanja za boje, od kojih se koriste:

  • ponceau;
  • Coomassie briljantno plava;
  • pyrogall crvena.

Tijekom dana mijenja se količina proteina koji se izlučuje mokraćom. Kako bi se objektivnije procijenio gubitak proteina u mokraći, uveden je pojam dnevnih proteina u mokraći. Ova vrijednost se mjeri u g / dan.

Za brzu procjenu dnevnog proteina u urinu, količina proteina i kreatinina određuje se u jednom obroku urina, a zatim se koristi odnos proteina / kreatinina da bi se zaključilo da gubitak proteina dnevno.

Metoda se temelji na činjenici da je brzina izlučivanja kreatinina u urinu konstantna vrijednost, ne mijenja se tokom dana. U zdrave osobe normalan odnos proteina: kreatinina u urinu je 0,2.

Ovom metodom uklanjaju se moguće greške koje se mogu pojaviti pri sakupljanju dnevnog urina.

Kvalitativni testovi vjerovatnije će od kvantitativnih testova dati lažno pozitivne ili lažno negativne rezultate. Greške nastaju u vezi sa uzimanjem lijekova, prehrambenim navikama, tjelesnom aktivnošću uoči testa.

Dekodiranje ovog kvalitativnog testa daje se vizuelnom procjenom zamućenja u epruveti u usporedbi s rezultatom testa s kontrolom:

  1. slabo pozitivna reakcija se ocjenjuje kao +;
  2. pozitivno ++;
  3. oštro pozitivno +++.

Test Gellerov prsten preciznije mjeri prisustvo proteina u urinu, ali ne kvantificira protein u urinu. Poput testa sulfosalicilne kiseline, Geller test daje samo približnu ideju o sadržaju proteina u mokraći.

Metoda vam omogućuje kvantitativnu procjenu stupnja proteinurije, ali je previše mukotrpna, neprecizna, jer se s jakim razrjeđivanjem tačnost procjene smanjuje.

Da biste izračunali protein, morate pomnožiti brzinu razrjeđivanja urina s 0,033 g / l:

1 1 1: 2 0,066
1 2 1: 3 0,099
1 3 1: 4 0,132
1 4 1: 5 0,165
1 5 1: 6 0,198
1 6 1: 7 0,231
1 7 1: 8 0,264
1 8 1: 9 0,297
1 9 1: 10 0,33

Test ne zahtijeva posebne uvjete, ovaj postupak je lako obaviti kod kuće. Da biste to učinili, umočite test traku u urin na 2 minute.

Rezultati će se izraziti brojem pluseva na traci, čije je dekodiranje sadržano u tabeli:

  1. Rezultati ispitivanja koji odgovaraju vrijednostima do 30 mg / 100 ml odgovaraju fiziološkoj proteinuriji.
  2. Očitavanja test traka 1+ i 2 ++ ukazuju na značajnu proteinuriju.
  3. Vrijednosti 3 +++, 4 ++++ zabilježene su u patološkoj proteinuriji uzrokovanoj bubrežnom bolešću.

Test trake daju samo približni pokazatelj povećanog proteina u urinu. Ne koriste se za preciznu dijagnostiku, a još više ne mogu reći šta to znači.

Ne dozvolite test trakama da adekvatno procijene količinu proteina u urinu trudnica. Pouzdanija metoda procjene je određivanje proteina u dnevnom urinu.

Određivanje proteina u urinu pomoću test trake:

Dnevni protein u urinu služi kao preciznija dijagnoza procjene funkcionalnog stanja bubrega. Da biste to učinili, potrebno je sakupljati sav urin koji se izlučuje bubrezima dnevno.

Prihvatljive vrijednosti za odnos protein / kreatinin su podaci dati u tabeli:

Ako izgubite više od 3,5 g proteina dnevno, stanje se naziva masivna proteinurija.

Ako u mokraći ima puno proteina, potrebno je ponovno ispitivanje nakon 1 mjeseca, a zatim nakon 3 mjeseca, prema čijim rezultatima se utvrđuje zašto je norma prekoračena.

Uzroci povećane količine proteina u mokraći su njegova povećana proizvodnja u tijelu i oštećena bubrežna funkcija, a proteinurija se razlikuje:

  • fiziološki - manja odstupanja od norme uzrokovana su fiziološkim procesima, rješavaju se spontano;
  • patološki - promjene nastaju kao rezultat patološkog procesa u bubrezima ili drugim tijelima, on napreduje bez liječenja.

Lagani porast proteina može se primijetiti kod obilne proteinske prehrane, mehaničkih opekotina, povreda, praćenih povećanjem proizvodnje imunoglobulina.

Lagani stepen proteinurije može biti uzrokovan fizičkim naporima, psihoemocionalnim stresom, uzimanjem određenih lijekova.

Fiziološka proteinurija odnosi se na povećanje proteina u urinu djece u prvim danima nakon rođenja. Ali nakon sedmice života, sadržaj proteina u djetetovoj mokraći smatra se odstupanjem od norme i ukazuje na patologiju u razvoju.

Bolesti bubrega, zarazne bolesti takođe su ponekad praćene pojavom proteina u urinu.

Takva stanja obično odgovaraju blagom stupnju proteinurije, privremeni su fenomeni, brzo prolaze sami, bez potrebe za posebnim liječenjem.

Teža stanja, ozbiljna proteinurija je zabilježena u slučaju:

  • glomerulonefritis;
  • dijabetes;
  • srčana bolest;
  • rak mokraćne bešike;
  • multipli mijelom;
  • infekcije, lezije drogom, policistična bolest bubrega;
  • visok krvni pritisak;
  • sistemski eritematozni lupus;
  • Goodpasture sindrom.

Crijevna opstrukcija, zatajenje srca, hipertireoza mogu uzrokovati tragove proteina u mokraći.

Vrste proteinurije klasificirane su na nekoliko načina. Za kvalitativnu procjenu proteina možete koristiti klasifikaciju Yaroshevsky.

Prema taksonomiji Jaroševskog, stvorenoj 1971. godine, razlikuje se proteinurija:

  1. bubrežni - koji uključuje oštećenu glomerularnu filtraciju, tubularno izlučivanje proteina, nedovoljnu ponovnu adsorpciju proteina u tubulama;
  2. prerenalni - javlja se izvan bubrega, izlučivanjem iz tijela hemoglobina, proteina koji se javljaju u prekomjernoj količini u krvi kao rezultat multiplog mijeloma;
  3. postrenalni - javlja se u području urinarnog trakta nakon bubrega, izlučivanje proteina tokom uništavanja mokraćnih organa.

Za kvantitativnu procjenu onoga što se događa, uslovno se izolira stepen proteinurije. Mora se imati na umu da oni bez liječenja lako mogu preći u teži oblik.

Najteža faza proteinurije razvija se sa gubitkom više od 3 g proteina dnevno. Gubitak proteina od 30 mg do 300 mg dnevno odgovara umjerenoj fazi ili mikroalbumnuriji. Do 30 mg proteina u dnevnom urinu znači blagu proteinuriju.

Koliko proteina ima u urinu?

  1. Obično u urinu praktički nema proteina (manje od 0,002 g / l). Međutim, u nekim uvjetima, mala količina proteina može se pojaviti u mokraći zdravih osoba nakon što pojedu veliku količinu proteinske hrane, što je rezultat hlađenja, tokom emocionalnog stresa, dugotrajnog fizičkog napora (tzv. Martovska proteinurija).

    Pojava značajne količine proteina u urinu (proteinurija) je patologija. Proteinurija može biti uzrokovana bolestima bubrega (akutni i hronični glomerulonefritis, pijelonefritis, nefropatija trudnica itd.) Ili bolestima mokraćnog sustava (upala mokraćnog mjehura, prostate, mokraćovoda). Bubrežna proteinurija može biti organska (glomerularna, tubularna i suvišna) i funkcionalna (febrilna proteinurija, ortostatska kod adolescenata, prekomjerne hranjenosti novorođenčadi). Funkcionalna proteinurija nije povezana sa bubrežnom bolešću. Dnevna količina proteina kod pacijenata varira od 0,1 do 3,0 g ili više. Sastav proteina u urinu određuje se pomoću elektroforeze. Pojava Bens-Jones proteina u urinu karakteristična je za mijelom i Waldenstromovu makroglobulinemiju, br. 223; 2 mikroglobulina s oštećenjem bubrežnih tubula.

  2. Obično u urinu praktički nema proteina (manje od 0,002 g / l).
  3. Glavni znakovi bolesti otkriveni proučavanjem urina.

    SG Specifična težina. Smanjenje specifične težine ukazuje na smanjenje sposobnosti bubrega da koncentrišu urin i uklanjaju toksine iz tijela, što se događa s bubrežnom insuficijencijom. Povećanje specifične težine povezano je s velikom količinom šećera i soli u urinu. Treba napomenuti da je nemoguće procijeniti specifičnu težinu iz samo jednog testa urina, može doći do slučajnih promjena, analizu urina potrebno je ponoviti 1-2 puta.

    Proteini Proteini u urinu - proteinurija. Proteinurija može nastati oštećenjem samih bubrega kod nefritisa, amiloidoze i otrovnih oštećenja. Proteini u mokraći mogu se pojaviti i zbog bolesti mokraćnog sustava (pijelonefritis, cistitis, prostatitis).

    Glukoza Glukozu (šećer) u mokraći - glukozuriju - najčešće uzrokuje dijabetes melitus. Rijetkiji uzrok je oštećenje bubrežnih tubula. Vrlo je alarmantno ako se ketonska tijela određuju zajedno sa šećerom u urinu. To se događa kod teškog, neregulisanog dijabetesa melitusa i navještaj je najteže komplikacije dijabetesa - dijabetičke kome.

    Bilirubin, urobilinogen Bilirubin i urobilin se određuju u urinu u različitim oblicima žutice.

    Eritrociti Eritrociti u urinu - hematurija. To se događa ili kod oštećenja samih bubrega, najčešće kod njihove upale, ili kod pacijenata s bolestima mokraćnog sustava. Ako se, na primjer, kamen kreće duž njih, može ozlijediti sluznicu, u urinu će biti crvenih krvnih zrnaca. Raspadljivi tumor bubrega takođe može dovesti do hematurije.

    Leukociti Leukociti u urinu - leukociturija, najčešće posljedica upalnih promjena na mokraćnom sustavu kod pacijenata s pijelonefritisom, cistitisom. Leukociti se često određuju kod upale ženskih spoljašnjih spolnih organa, kod muškaraca - kod upale prostate.

    Cilindri Cilindri su posebne mikroskopske formacije. Odlivci hijalina u količini od 1-2 mogu se naći kod zdrave osobe. Nastaju u bubrežnim tubulima, to su čestice proteina zalijepljene. Ali povećanje njihovog broja, cilindri drugih vrsta (zrnasti, eritrocitni, masni) uvijek ukazuju na oštećenje samog bubrežnog tkiva. Postoje cilindri kod upalnih bolesti bubrega, metaboličkih lezija, na primjer, dijabetes melitusa.

    Informativnost metode i njene granice. Informativna vrijednost općeg testa urina za prepoznavanje specifičnih bolesti bubrega je mala; obično su potrebne dodatne, tačnije studije. Ali ovo je istraživanje vrlo važno, posebno kada se provode preventivne studije, jer vam omogućava prepoznavanje ranih znakova bolesti bubrega. Također je poznato da su bolesti bubrega često latentne, a samo analiza urina omogućava sumnju na njih i daljnje potrebno ispitivanje.

  4. U većini laboratorija, prilikom ispitivanja mokraće na proteine, prvo koriste kvalitativne reakcije koje ne otkrivaju proteine ​​u urinu zdrave osobe. Ako se protein u mokraći otkrije kvalitativnim reakcijama, provodi se njegovo kvantitativno (ili polukvantitativno) određivanje. U ovom su slučaju značajne karakteristike korištenih metoda koje pokrivaju različit spektar uroproteina. Dakle, kada se određuje protein pomoću 3% sulfosalicilne kiseline, količina proteina do 0,03 g / l smatra se normalnom, dok se kod upotrebe metode pirogalola granica normalnih vrijednosti proteina penje na 0,1 g / l. S tim u vezi, u obrascu za analizu potrebno je navesti normalnu vrijednost proteina za metodu koju koristi laboratorija.

    Pri određivanju minimalnih količina proteina, preporučuje se ponoviti analizu; u sumnjivim slučajevima treba utvrditi dnevni gubitak proteina u mokraći. Obično dnevni urin sadrži male količine proteina. U fiziološkim uvjetima, filtrirani protein gotovo u potpunosti resorbira epitel proksimalnih tubula, a njegov sadržaj u dnevnoj količini urina varira, prema različitim autorima, od tragova do 20 50, 80 100 mg, pa čak i do 150 200 mg. Neki autori smatraju da je dnevno izlučivanje proteina u količini od 30-50 mg / dan fiziološka norma za odraslu osobu. Drugi smatraju da izlučivanje proteina mokraćom ne bi trebalo prelaziti 60 mg / m2 tjelesne površine dnevno, isključujući prvi mjesec života, kada količina fiziološke proteinurije može biti četiri puta veća od naznačenih vrijednosti.

    Opći uslov za pojavu bjelančevina u mokraći zdrave osobe je dovoljno visoka koncentracija bjelančevina u krvi i molekulska masa ne veća od 100-200 kDa.

  5. to nije norma, s vašom dijagnozom je to moguće, druga stvar je da je za nefrotski sindrom ovo zapravo mali pokazatelj .. pogledajte kliniku - otok, pritisak itd. i dalje uzimajte propisani tretman ..
  6. a opet ću reći: NE bi trebalo biti normalno!

Normalni pokazatelji: protein se obično nalazi u urinu u minimalnim količinama koje se ne otkrivaju normalnim kvalitativnim reakcijama. Gornja granica norme proteina u urinu je 0,033 g / l. Ako je sadržaj proteina veći od ove vrijednosti, testovi kvaliteta proteina postaju pozitivni.

Klinički značaj definicije:

Pojava proteina u urinu naziva se proteinurija. Proteinurija može biti lažna i bubrežna. Ekstrarenalna proteinurija može biti u prisustvu nečistoća proteinskog porekla iz genitalija (vaginitis, uretritis, itd.), Dok je količina proteina beznačajna - do 0,01 g / l. Bubrežna proteinurija može biti funkcionalna (s hipotermijom, vježbanjem, vrućicom) i organska - s glomerulonefritisom, pijelonefritisom, nefritisom, nefrozom, bubrežnom insuficijencijom. U bubrežnoj proteinuriji, sadržaj proteina može biti od 0,033 do 10-15 g / l, ponekad i veći.

Kvalitativna definicija.

Princip metode: zasnovan na činjenici da se protein koagulira (postaje vidljiv) pod dejstvom anorganskih kiselina. Stupanj zamućenosti ovisi o količini proteina.

Otkrivanje proteina u urinu sa 20% sulfosalicilne kiseline.

Reagensi: 20% otopina sulfosalicilne kiseline. Oprema: tamna podloga.

Napredak istraživanja:

2. Ulijte 2 ml pripremljenog urina u 2 epruvete istog promjera. 1 epruveta - kontrola, 2 - eksperiment. U epruvetu se dodaju 4 kapi 20% sulfosalicilne kiseline.

3. Rezultat je označen na tamnoj pozadini.

4. U prisustvu proteina, mokraća u epruveti postaje mutna.

Kvalitativno određivanje proteina u testu urina - trake.

Za otkrivanje proteinurije koriste se različiti monotestovi - trake: Albufan, Albustix, Biofan E i politestovi: Triscan, Nonafan itd.

Kvantitacija.

Otkrivanje proteina u urinu Roberts-Stolnikov metodom.

Princip metode: zasnovan na činjenici da se protein koagulira (postaje vidljiv) pod dejstvom anorganskih kiselina. Stupanj maglice ovisi o količini proteina (tj. Test Gellerovog prstena). S koncentracijom proteina u urinu od 0,033 g / l, na kraju 3 minute nakon naslage urina, pojavljuje se tanki bijeli prsten nalik niti.

Reagensi: 50% otopina dušične kiseline ili Robertsov reagens (98 dijelova zasićene otopine natrijum klorida i 2 dijela koncentrirane solne kiseline) ili Larionov reagens (98 dijelova zasićene otopine natrijum klorida i 2 dijela koncentrirane azotne kiseline).

Oprema: tamna podloga.

Napredak istraživanja:

1. Zahtjevi za urin: urin mora biti kiselog (ili blago kiselog) pH, mora biti proziran, jer se ovaj urin centrifugira. Alkalni urin se zakiseli do blago kisele reakcije medija, koristeći indikatorski papir za kontrolu.

2. U epruvetu ulijte 2 ml 50% otopine dušične kiseline ili jednog od reagensa, a zatim pipetom pažljivo položite istu količinu pripremljenog urina duž zida epruvete

3. Uzorak se ostavlja 3 minute.

4. Nakon 3 minute očitajte rezultat. Rezultat se bilježi na tamnoj pozadini u propuštenom svjetlu. Ako je prsten širok, kompaktan, tada se urin razrijedi destiliranom vodom i ponovo sloji na reagens.

5. Urin se razrjeđuje sve dok se nakon 3 minute ne stvori tanki konac poput prstena.

C = 0,033g / l x brzina razblaživanja.

Za kliniku je važno i kvalitativno i kvantitativno određivanje proteina u urinu.

Kvalitativni uzorci za određivanje proteina u urinu
Predloženo je više od 100 reakcija za kvalitativno određivanje proteina u urinu. Većina se zasniva na taloženju proteina fizičkim (zagrevanjem) ili hemijskim sredstvima. Prisustvo proteina dokazuje se pojavom zamućenosti.

Kolorimetrijski suvi uzorci su također zanimljivi.

U nastavku će biti opisani samo najvažniji uzorci za praksu.

Test na sulfosalicilnu kiselinu... U nekoliko mililitara urina dodajte 2-4 kapi 20% otopine sulfosalicilne kiseline. Uz pozitivnu reakciju pojavljuje se zamućenost. Rezultat označavaju izrazi: opalescencija, slabo pozitivna, pozitivna ili jako pozitivna reakcija. Test sulfosalicilne kiseline jedan je od najosjetljivijih testova za određivanje proteina u urinu. Otkriva i najmanja patološka povećanja proteina u urinu. Zahvaljujući jednostavnoj tehnici, ovaj test je našao široku upotrebu.

Aseptol test... Aseptol je zamjena za sulfosalicilnu kiselinu. Može se pripremiti od materijala dostupnih u bilo kojoj laboratoriji (fenol i sumporna kiselina). Kao reagens koristi se 20% otopina aseptola. Test se provodi na sljedeći način: u epruvetu koja sadrži 2-3 ml urina na dno se doda 0,5-1 ml otopine aseptola. Ako se na granici između dviju tekućina formira bijeli prsten zgrušanog proteina, uzorak je pozitivan.

Gelerov test... U nekoliko mililitara urina doda se 1-2 ml 30% dušične kiseline (specifična težina 1,20). Ako se na granici obje tekućine formira bijeli prsten, uzorak je pozitivan. Reakcija postaje pozitivna ako je protein veći od 3,3 mg%. Ponekad se dobije bijeli prsten kada su prisutne velike količine urata. Za razliku od proteinskog prstena, uratni prsten se ne pojavljuje na površini između dviju tekućina, već nešto veći. Larionova predlaže upotrebu 1% rastvora azotne kiseline u zasićenoj otopini natrijum klorida umesto 30% dušične kiseline kao reagensa; ovo daje velike uštede u azotnoj kiselini.

Uzorak sa željeznim cijanidom kalijumom i octenom kiselinom... Ova reakcija omogućava razlikovanje serumskih proteina od nukleoalbumina.

Jednake količine urina sipaju se u dvije epruvete. Nekoliko kapi 30% otopine sirćetne kiseline dodaju se u jednu od njih. Ako je mutno u odnosu na kontrolnu epruvetu, urin sadrži nukleoalbumin. Ako se oblačnost ne pojavi, sadržaj obje epruvete se pomiješa i ponovo podijeli na dva dijela. Nekoliko kapi se doda u jednu od dvije epruvete (višak može pozitivan uzorak pretvoriti u negativni) 10% otopine žute soli krvi (kalijum željezni cijanid). U prisustvu proteina sirutke dolazi do zamućenja.

Uz koncentrirani urin koji sadrži velike količine mokraćne kiseline i urata, treba izvršiti uzorak željeznog cijanida kalijuma i octene kiseline nakon prethodnog razrjeđivanja (2-3 puta) urina vodom. U suprotnom može doći do zamućenja uzrokovanog taloženjem mokraćne kiseline.

To je posebno važno kod ispitivanja mokraće novorođenčadi koja sadrži puno mokraćne kiseline i urata.

Od ostatka kvalitativnih testova na protein u mokraći, na osnovu precipitacije proteina, korišteni su: test ključanja, Esbach, Perdy, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann-Suzanne, Jollet , Exton, Kamlet, uzorci Kobuladzea, Liliendhal-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya itd.

Pri proizvodnji visokokvalitetnih uzoraka za proteine ​​u urinu, na osnovu precipitacije proteina, moraju se poštovati sljedeća opća pravila, čije kršenje dovodi do značajnih grešaka u istraživanju.

1. Urin koji se pregleda mora imati kiselu reakciju. Alkalnom reakcijom urin se blago zakiseli octenom kiselinom. Proizvodnja uzorka s alkalnim urinom u slučajevima kada se kiselina koristi kao reagens može dovesti do neutralizacije kiseline i do negativnog rezultata ako je reakcija pozitivna. To se posebno odnosi na uzorak sulfosalicilne kiseline, jer se kiselina dodaje u vrlo malim količinama i može se lako neutralizirati.

2. Analizirani urin mora biti proziran.

3. Uzorci za određivanje proteina u urinu trebaju se uvijek provoditi u dvije epruvete, od kojih jedna služi kao kontrola. Bez kontrolne cijevi možda nećete primijetiti blagu zamućenost u reakcijama.

4. Količina kiseline dodane tijekom uzoraka ne smije biti prevelika. Velika količina kiseline može dovesti do stvaranja topljivih kiselih albumina i do konverzije pozitivnog uzorka u negativni.

Kolorimetrijski suhi uzorci zaslužuju veliku pažnju zbog svoje jednostavne tehnike. Ovi testovi koriste učinak koji protein ima na boju indikatora u puferskoj otopini (takozvana greška indikatora proteina). Traka filtarskog papira natopljena kiselim citratnim puferom i bromofenol plavom kao indikator na kratko je uronjena u urin. Uzorak je pozitivan ako se dobije plavo-zelena boja. Upoređujući intenzitet boje sa standardima obojenog papira, možete izvesti grube i kvantitativne zaključke. Ispitni radovi se prodaju u pakovanjima sa odgovarajućim standardima u boji, slično kao višenamjenski ispitni radovi.

Metode za kvantificiranje proteina u urinu
Mnogo je metoda predloženo za kvantitativno određivanje proteina u urinu. Tačne kvantitativne metode za određivanje proteina u biološkom materijalu nisu pronašle široku primenu u određivanju proteina u urinu zbog složene i mukotrpne tehnike. Volumetrijske metode postale su široko rasprostranjene, posebno Esbach metoda. Vrlo su jednostavni, ali, nažalost, nisu baš precizni. Metode grupe Brandberg-Stolnikov također su prikladne za kliniku, dajući preciznije rezultate od volumetrijskih metoda, s relativno jednostavnom tehnikom. Uz fotometar ili nefelometar, nefelometrijske metode su takođe prikladne.

Esbach metoda... Predložio ga je pariski liječnik Esbach 1874. Urin i reagens ulivaju se u posebnu epruvetu (Esbachov albuminometar). Cjevčica se zatvori gumenim čepom, temeljito promiješa (bez udaranja!) I ostavi u uspravnom položaju do sljedećeg dana. Očitati podjelu do koje seže stupac proteina. Pronađeni broj pokazuje sadržaj proteina. Kod Esbach metode vrlo je važno da mokraća bude kisela. Alkalni urin može neutralizirati kisele sastojke reagensa i spriječiti taloženje proteina.

Prednosti metode: jednostavna je i praktična u praksi.

Mane: metoda je neprecizna, rezultat se dobiva nakon 24 - 48 sati.

Brandberg-Stolnikov metoda... Zasnovan je na Gellerovom testu kvaliteta. Gelerov test se može koristiti za kvantitativno određivanje, jer daje pozitivan rezultat sa sadržajem proteina iznad 3,3 mg%. Ovo je granična koncentracija proteina ispod koje uzorak postaje negativan.

Ehrlichova i Althausenova modifikacija... Sovjetski naučnici S. L. Erlikh i A. Ya. Altgauzen modificirali su metodu Brandberg-Stolnikov, ukazujući na mogućnosti pojednostavljenja istraživanja i uštede vremena u njegovoj proizvodnji.

Prvo pojednostavljenje odnosi se na vrijeme kada se prsten pojavio. Određuje se tačno vrijeme njegovog pojavljivanja, bez pridržavanja 2. i 3. minute.

Drugo pojednostavljenje omogućava utvrđivanje oplemenjivanja. Autori su dokazali da se pojavom rezultirajućeg prstena može približno utvrditi potrebno razrjeđenje. Razlikuju nitaste, široke
i kompaktan prsten.

Od nefelometrijskih metoda zaslužuje napomenuti Kingsbarryjeva i Clarkova metoda... 2,5 ml filtriranog urina ulije se u mali graduirani cilindar, napunjen 3% vodenom otopinom sulfosalicilne kiseline do 10 ml. Temeljito promiješajte i nakon 5 minuta fotometrije u kiveti od 1 cm sa žutim filterom, koristeći vodu kao kompenzacijsku tečnost. Pulfrich fotometrom pronađeno izumiranje pomnoženo sa 2,5 daje količinu proteina u% o. U slučaju kada je stopa izumiranja veća od 1,0, urin se prethodno razrijedi 2 puta, 4 puta ili čak više.

Da bismo imali jasnu predstavu o količini proteina koji se izlučuju urinom, potrebno je odrediti ne samo njihovu koncentraciju u odvojenom dijelu urina, već i njihovu ukupnu dnevnu količinu. Da biste to učinili, sakupljajte pacijentov urin tokom 24 sata, izmjerite njegov volumen u mililitrima i odredite koncentraciju proteina u dijelu dnevnog urina u g%. Količina proteina koji se izlučuje urinom za 24 sata određuje se ovisno o dnevnoj količini urina u gramima.

Klinički značaj proteina u urinu

Ljudski urin obično sadrži minimalne količine proteina koje se ne mogu odrediti uobičajenim kvalitativnim uzorcima proteina u urinu. Otpuštanje velike količine proteina, u kojem uobičajeni kvalitativni testovi na protein u urinu postaju pozitivni, nenormalan je fenomen koji se naziva proteinurija. Proteinurija je fiziološka samo u novorođenčeta, u prvih 4-10 dana nakon rođenja. Uobičajeno ime albuminurija je netačno, jer se ne samo albumin izlučuje urinom, već i druge vrste proteina (globulini, itd.).

Proteinuriju je kao dijagnostički simptom 1770. otkrio Cotugno.

Najvažnija funkcionalna bubrežna proteinurija kod djece su sljedeća:

1. Fiziološka proteinurija novorođenčeta... Javlja se kod većine novorođenčadi i nema štetan učinak. Objašnjeno krhkim bubrežnim filterom, oštećenjem pri rođenju ili gubitkom tečnosti u ranim danima života. Fiziološka proteinurija nestaje 4-10 dana nakon rođenja (kasnije kod nedonoščadi). Količina proteina je mala. To je nukleoalbumin.

Dugotrajna neonatalna albuminurija može biti simptom urođenih luesa.

2. Moždani udar albuminurija... Uzrokovani su prekoračenjem praga normalne razdražljivosti bubrežnog filtra značajnim mehaničkim, termičkim, hemijskim, mentalnim i drugim iritacijama - gubitkom tečnosti kod novorođenčadi (dehidratacijska proteinurija), hladnim kupanjem, obilnom hranom bogata proteinima (alimentarna proteinurija) , palpacija bubrega (palpacija albuminurija), fizički prekomjerni rad, strah itd.

Albuminurija moždanog udara lakše se pojavljuje kod djece u ranoj dobi nego kod starije djece i odraslih, jer se bubrezi dojenčadi i malog djeteta lakše iritiraju. Dehidratacija albuminurije (kršenje hranjenja, hidratacija, toksikoza, proljev, povraćanje) posebno je česta kod novorođenčadi.

Albuminurija moždanog udara je benigna. Nestaju odmah nakon uklanjanja uzroka koji ih uzrokuju. Sediment ponekad sadrži pojedinačne leukocite, odljevke i eritrocite. Protein je najčešće nukleoalbumin.

3. Ortostatska proteinurija... Ovo stanje je tipično za djecu predškolskog i školskog uzrasta. Javlja se na osnovu vazomotornih poremećaja opskrbe bubrega krvlju. Tipično za ortostatsku albuminuriju (otuda i naziv) je da se pojavljuje samo kada dijete stoji, kada je kičma u lordotskom položaju. U ležećem položaju nestaje. Oslobađa se nukleoalbumin. U sumnjivim slučajevima možete pribjeći ortostatskom iskustvu koje se sastoji u sljedećem: navečer, sat vremena prije spavanja, dijete isprazni mjehur; ujutro, ustajući iz kreveta, opet pušta mokraću. Ovaj urin ne sadrži proteine. Zatim se dijete stavi na koljena 15-30 minuta štapom iza leđa, između savijenih laktova obje ruke. Stvara se položaj lordoze, što rezultira oslobađanjem proteina, bez promjena u sedimentu.

S ortostatskom albuminurijom može se osloboditi 8-10 g proteina dnevno.

Organska bubrežna proteinurija je od presudne kliničke važnosti između svih proteinurija. Uzrokovane su organskom bubrežnom bolešću (nefritis, nefroza, nefroskleroza). Proteinurija je jedan od najvažnijih i najpoznatijih simptoma organske bolesti bubrega.

1. U akutnom i hroničnom glomerulonefritisu, proteinurija se javlja redovito. Količina proteina je umjerena i ne postoji paralela između stepena proteinurije i težine bolesti. Suprotno tome, hronični i teži nefritis često se javlja s manje proteina od akutnog. Nakon akutnog nefritisa, ponekad na duže vrijeme (godine), u urinu se uspostavljaju male količine bjelančevina koje nemaju patološki značaj („rezidualna albuminurija“). Ne treba zaboraviti da se može javiti i "nefritis bez proteinurije". Ponekad se protein nalazi u jednom dijelu urina, ali ne i u drugom. Odnos albumina i globulina kod akutnog nefritisa je nizak, a kod hroničnog nefritisa veći.

2. Kod nefroskleroze, količina proteina u urinu prilično je beznačajna, često se mogu naći oblici bolesti bez proteina u urinu.

3. Od svih bubrežnih bolesti, nefroza se javlja s najizraženijom proteinurijom.

4. U zaraznim i toksičnim uvjetima postoje takozvana febrilna i toksična proteinurija. To su akutne nefroze kod kojih je količina proteina mala. U ovu skupinu spadaju i proteinurija u konvulzivnim stanjima (konvulzije), sa hiperfunkcijom štitnjače, žuticom, inususcepcijom, enterokolitisom, opekotinama, ozbiljnom anemijom itd. Ove albuminurije su benigne i brzo prolaze (prolazna albuminurija).

5. Stagnacijom krvi u bubrezima javlja se takozvana kongestivna albuminurija, koja je karakteristična za kardiološke bolesnike u fazi dekompenzacije. Takođe se javlja kod ascitesa i tumora abdomena.

S febrilnom, toksičnom i kongestivnom albuminurijom, povećana propusnost bubrežnog filtra je posebno izražena. Prema nekim autorima, mnoge od ovih proteinurija prolaze bez organskog oštećenja bubrežnog parenhima.

Ekstrarenalna albuminurija obično su uzrokovane proteinskim nečistoćama (izlučevine, raspadnute ćelije), koje izlučuju bolesni mokraćni kanali i genitalije. Ekstrarenalna albuminurija zbog cistopielitisa (piurija) je češća, rjeđe zbog vulvovaginitisa, kamenca i tumora mokraćnog sustava.

Sa ekstrarenalnom albuminurijom, u sedimentu se nalazi veliki broj leukocita i bakterija. Bubrežni elementi gotovo nikada nisu pronađeni. Količina proteina je mala. Filtrirani ili centrifugirani urin obično nema pozitivan test na protein.

U onih koji se oporavljaju od pijelitisa, albuminurija nestaje nakon bakteriurije i piurije.

Kao karakterističan fenomen treba naglasiti da se u ranom djetinjstvu organske bubrežne bolesti javljaju izuzetno rijetko, stoga je i organska proteinurija rijetka. Od njih postoje uglavnom febrilne i otrovne. Za razliku od organske proteinurije, albuminurija moždanog udara vrlo je česta kod djece u ranoj dobi.

U starije djece organska proteinurija je češće funkcionalna. Generalno, s godinama su funkcionalne proteinurije rjeđe, a organske češće.

Elektroforetska ispitivanja proteina u urinu

Brojni autori koriste elektroforetsku metodu za proučavanje proteina u urinu (uroproteini). Iz dobivenih elektroforegrama vidi se da imaju jednak kvalitativni sastav kao i proteini plazme. To ukazuje da su proteini u urinu izvedeni iz proteina plazme.

R-vi 50% otopina azota za vas ili otopina lariona. Postupak određivanja: stavite nekoliko epruveta u stativ i ulijte 1 ml otopine azota, dodajte 1 ml urina, položite na reagens i zabilježite vrijeme kada se prsten pojavi, zapišite vrijeme izgled prstena. Ako je prsten širok, razrijedite urin.

4. Određivanje koncentracije proteina u urinu sa 3% sulfosalicilne kiseline.

R-you: 3% ccc, natrijum hlorid 9%, str albumin 10% Tok određivanja: U dvije merne epruvete za centrifugu "O" - iskustvo i "K" - kontrola se stavlja na 1,25 ml bistrog urina. U eksperimentalnu se doda 3,75 ml 3% rastvora sulfosalicilne kiseline, u kontrolne 3,75 ml 0,9% rastvora natrijum hlorida. Ostavite 5 minuta, a zatim fotometrijski na FEC na talasnoj dužini od 590 - 650 nm (narančasti ili crveni filter) u kiveti sa debljinom sloja od 5 mm, eksperiment protiv kontrole. Proračun se vrši prema kalibracijskom rasporedu ili tablici. Princip metode zasnovan na činjenici da protein sa sulfosalicilnom kiselinom daje maglicu čiji je intenzitet direktno proporcionalan koncentraciji proteina.

5. otkrivanje glukoze u testu urina Gaines-Akimov. Načelo: Glukoza, kada se zagrije u alkalnom medijumu, redukuje bakar-dihidroksid (žuti) u bakar-monohidroksid (narandžasto-crveni). Priprema reagensa: 1) 13,3 g hem. čisti kristalni bakar sulfat (CuSO 4 . 5 H 2 O) rastvor. u 400 ml vode. 2) 50 g natrijum hidroksida rastvori se u 400 ml vode. 3) 15 g čistog glicerina razblaži se u 200 ml vode. Prva i druga otopina se miješaju i odmah se ulije treća. Reagens stoji. Napredak u određivanju: Dodajte 1 kap urina i 9 kapi reagensa u epruvetu i kuhajte u vodenoj kupelji 1-2 minute. Pozitivan uzorak: žuta ili narančasta boja tečnosti ili taloga.

6. Kvalitativno određivanje glukoze u urinu metodom glukoza oksidaze. Princip metode: glukoza se oksidira u prisustvu glukoze oksidaze, u skladu sa reakcijom: Glukoza + O 2 glikonolant + H 2 O 2. Nastali vodonik-peroksid pod dejstvom peroksidaze oksidira supstrat stvaranjem obojenog proizvoda.

Dodamo i inkubiramo 15 minuta na 37 ° S. Pogledajte KFK, kiveta 5 mm.

Zatim se izračuni vrše prema formuli: C op = Vanjski op . Cst / Ect st.

7. Detekcija ketonskih tijela u urinu Lestradeovim testom. Prašak ili tableta Lestradeove otopine nanosi se (na vrh skalpela) na stakalce i na njega se nanose 2-3 kapi urina. U prisustvu ketonskih tijela pojavit će se boja od ružičaste do ljubičaste. Uzorak se procjenjuje na bijeloj pozadini.

8. Detekcija krvnog pigmenta u urinu uzorkom sa 5% alkoholnom otopinom amidopirina.

1,5% alkoholna otopina amidopirina (0,5 g amidopirina se rastvori u 10 ml alkohola 96%) 2,3% otopina vodonik-peroksida 1,5 g hidropirita se rastvori u 50 ml vode) Postupak: sipa se 2-3 ml sirćetne kiseline u epruvetu - ekstrakt etera ili promućkani nefiltrirani urin, dodajte 8-10 kapi 5% otopine amidopirina i 8-10 kapi 3% otopine vodonik-peroksida; uzmite u obzir rezultat najkasnije 2-3 minute. uzorak se smatra pozitivnim u prisustvu sivo-ljubičaste boje.

Detekcija urobilina u urinu Neubauerovim testom.

Na osnovu reakcije boje urobilinogena sa Ehrlichovim reagensom, koji se sastoji od 2 g paradimetilaminobenaldehida i 100 ml otopine klorovodične kiseline (200 g l). Određivanje. Nekoliko kapi Ehrlichove otopine ulije se u nekoliko ml svježeg urina (na 1 ml urina i 1 ml otopine. Pojava crvene boje u prvih 30 sekundi ukazuje na povećanje busena. Urobilinogena. Obično se boja pojavljuje kasnije ili je uopće nema. Kad urin stoji, urobilinogen se pretvara u urobilin i test može biti lažno negativan.Ne zagrijavajte jer se mogu stvoriti spojevi složenih spojeva, aldehidi s porfirinima, indol i ljekoviti pripravci.

Otkrivanje bilirubina u urinu Rosinovim testom.

Alkoholna otopina joda (10 g l): 1 g kristalnog joda rastvori se u boci zapremine 100 ml u 20-30 ml 96 g rektifikovanog alkohola, a zatim doda alkohol do oznake. 4-5 ml testirajte urin i pažljivo na njega nanesite alkoholnu otopinu joda (ako urin ima malu relativnu gustinu, tada je treba slojiti na alkoholnu otopinu joda). U prisustvu bilirubina na granici između tekućina, zeleni prsten (kada se uzima antipirin, kao i soda u urinu krvnog pigmenta, test se pokazuje pozitivnim). U zdrave osobe ovaj test je negativan.

Ispitivanje urina suvom hemijom (monopolites).

Načelo. Metoda se temelji na utjecaju proteina na boju indikatora u puferskoj otopini, što rezultira promjenom boje od žute do plave.

Pri provođenju reakcije na prisustvo proteina u urinu i određivanju pH pomoću indikatorskog papira, preporučuje se slijediti ove upute:

  1. Sakupljajte urin u dobro opranu posudu.
  2. Koristite svježe sakupljeni urin bez konzervansa.
  3. Pažljivo zatvorite kućište nakon što iz njega uklonite potreban broj traka s indikatorima.
  4. Ne hvatajte zone indikatora prstima.
  5. Koristite samo u roku upotrebe navedenom na etiketi.
  6. Pridržavajte se pravila za skladištenje indikatorskog papira.
  7. Provedite procjenu rezultata u skladu s uputama datim u uputama.

Izvođenje analize urina na hemijskom analizatoru suve urina.

Napredak u određivanju. Traka indikatorskog papira uklanja se s pernice i uranja u test mokraću tako da istovremeno navlaži obje indikatorske zone. Nakon 2-3 s traka se stavi na bijelu staklenu ploču. Neposredna procjena pH vrši se pomoću obojene skale otisnute na kućištu. Vrijednost pH na skali boja je 6,0 (ili manje); 7,0; 8,0; 9.0.

Priprema mokraće, priprema preparata iz mikroskopskog pregleda sedimenta mokraće na približan način.

Mikroskopsko ispitivanje sedimenta urina vrši se približnom metodom u opštoj analizi i kvantitativnom proračunu formiranih elemenata radi preciznije procjene stepena lukociturije i hematurije.

Pravila za pripremu sedimenta urina za mikroskopiju.

Prvi uzorak jutarnjeg urina podliježe mikroskopskom pregledu.

Nakon preliminarnog miješanja uzima se 10 ml urina, centrifugira se 10 minuta na 1500 o / min.

Zatim se oštrim pokretom prevrne epruveta za centrifugu s urinom, tečna tekućina brzo se ulije u praznu teglu.

Promiješajte, stavite kap na staklo i pažljivo pokrijte pokrivačem.

Ako se sediment sastoji od nekoliko slojeva, tada se priprema preparat, a zatim ponovo centrifugira i preparati se pripremaju iz svakog sloja posebno.

U nedostatku oka vidljivog taloga, kap urina nanosi se na staklo i mikroskopira.

Na početku se materijal ispituje pri malom uvećanju (okular 7-10, cilj 8), kondenzator se spušta, dijafragma se malo sužava, a zatim se detaljno ispituje preparat pri velikom uvećanju (okular 10.7; cilj 40).

14.Kvantitativna studija sedimenta urina prema Nechiporenku.

Metoda se koristi za latentne trome upalne procese (pijelonefritis, glomerulonefritis), latentnu piuriju. Proučavati patološki proces u dinamici. Da bi se procijenila efikasnost liječenja. Prednosti metode: tehnički jednostavan, ne zahtijeva veliku količinu urina i trajanje. njegovo skladištenje, koristi se u ambulantnoj praksi. Obaveza uvjetima: jutarnji urin, srednji obrok, kisela otopina (u alkalnom može doći do djelomičnog propadanja staničnih elemenata). 1. Stavite 10 ml urina u mjernu epruvetu za centrifugu i centrifugirajte 10 minuta pri 1500 o / min. 3. Nakon centrifuge. usisavanje Otpipetirajte vrh tečnosti, ostavite. tačno 1 ml sedimenta. 4. Talog se temeljno promiješa i napuni u komoru Gorjajeva. 5. Za 3-5 minuta nakon punjenja, počnite brojati oblikovane elemente. 6.Broj leukocita, Er, cilindri s okularom 15, cilj 8 kada je izostavljen. kondenzator, na 100 velikih kvadrata komore. Leukociti, Er broje se odvojeno, cilindri (računajući najmanje 4 komore Gorjajeva) izlučuju medije. arith. X = A x 0,25x 106 / l. Norma: kanta za zalijevanje. 2-4x 10 6 / l, Er do 1 x 10 6 / l, cilindri do 0,02 x 10 6 / l (jedan za 4 komore). Kod djece: kanta za zalijevanje. do 2-4x 10 6 / l, Er do 0,75 x 10 6 / l, cilindri do 0,02 x 10 6 / l.

15. Studija urina prema Zimnitsky

Ovaj test utvrđuje sposobnost bubrega da se koncentrišu. i razblaženi urin. Suština uzorka u dinamičkom određivanju relativne gustine i količine urina u tri sata u obrocima tokom dana. Testiranje: nakon pražnjenja mokraćnog mjehura u 6 sati ujutro u toalet, pacijent sakuplja mokraću u zasebne tegle svaka tri sata tokom dana. Samo 8 porcija. Napredak istraživanja: 1. Isporučeno. Urin se raspoređuje po satu, a količina i relativna gustina određuju se u svakom obroku. 2. Uporedite dnevnu količinu urina i količinu popijene tečnosti da biste utvrdili. % njegove eliminacije. 3. Izračunajte dnevnu i noćnu diurezu, zbrojite, dobijte dnevnu diurezu. 4. Postavite opseg kolebanja broja i relativnog. gustina urina dnevno, tj. koja je razlika između najmanjeg i najvećeg dijela. Pokaži. uzorci za zdravlje. ljudi: 1. Dnevna količina urina 800-1500 ml. 2. Dnevno izlučivanje urina značajno prevladava nad noćnim. 3. Kolebanja u količini urina u pojedinim porcijama su značajna (od 50 do 400 ml). 4. Kolebanja u p od 1.003 do 1.028, trebale bi biti veće od 0.008. Uz funk. zatajenje bubrega: hipostenurija, hipoizostenurija, izostenurija, hiperstenurija, oligurija, anurija, nokturija.

16. Opis opštih svojstava izmeta.

Obično se izmet sastoji od proizvoda izlučivanja i izlučivanja probavnog trakta, ostataka nekvarljivosti ili djelomične probave prehrambenih proizvoda, mikrobne flore. Količina izmeta je 100-150 g. Konzistencija je gusta. Oblik je cilindričan. Miris je uobičajen izmet. Smeđa boja. P-cija - neutralna, blago alkalna ili blago kisela (pH 6,5-7,0-7,5). Sluzi nema. Nedostaje krvi. Nema ostataka neprobavljene hrane.

Instrukcije

Kvalitativne metode za određivanje proteina u urin: Gelerova metoda, test sa 20% otopinom sulfosalicilne kiseline, test ključanja itd. Polukvantitativne metode: upotreba dijagnostičkih test traka za određivanje proteina u urin, Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov. Kvantitativne metode: turbidimetrijske i kolorimetrijske.

Određivanje proteina dnevno urin u koncentraciji od 0,033 g / l ili više je patologija. Po pravilu, u jutarnjem obroku urina koncentracija proteina ne prelazi 0,002 g / l, a u dnevnom urin koncentracija proteina nije veća od 50-150 mg proteina.

Izvori:

  • određivanje proteina u urinu

Urin je proizvod ljudskog metabolizma. Nastaje filtriranjem krvi u bubrezima, zbog čega sastav urina daje jasan opis stanja ljudskog tijela.

Urin je složena otopina od više od 150 jedinjenja. Neke specifične supstance, na primjer, aceton, žučne kiseline, proteini, glukoza, mogu biti prisutne samo kod određenih bolesti.

Za kontrolu ljudskog zdravlja prije svega potrebno je odrediti količinu urina. Norma je stvaranje 1-1,8 litara urina dnevno. Kada se oslobodi više od 2 litre urina, to je znak mogućeg oštećenja u radu bubrega, dijabetes melitusa i brojnih drugih bolesti. Ako se dnevno stvori manje od 0,5 litara urina, dolazi do začepljenja uretera ili mokraćnog mjehura.

Boja urina

Boja izlučenog urina ovisi o mnogim čimbenicima, pa može varirati od svijetlo žute do narančaste. Na prisustvo određenih nijansi mogu utjecati neki prehrambeni proizvodi, kao i lijekovi koje osoba uzima.

Nakon uzimanja lijekova, mokraća može postati obojena i crvenkasta. Ako se osoba aktivno kreće, dok ima veliku količinu znoja, mokraća će imati intenzivnu žutu boju, kao i prilikom uzimanja sredstava poput "Nitroxolina" ili "Biomicina".

Ako osoba nije uzimala obojenu hranu i lijekove, ali se boja urina razlikuje od uobičajene, može se sumnjati na prisustvo bolesti u tijelu. Na primjer, kod bolesti jetre mokraća će biti tamnožute ili zelenkaste boje.

Prisustvo krvi u izlučenom urinu jasno ukazuje na prisustvo kamenaca u bubrežnom krvarenju ili ako se primijeti i bol.

Ako je mokrenje otežano, to može ukazivati ​​na upalni proces izazvan infekcijom u mokraćnom mjehuru. Ali prljavi i mutni urin ukazuje na ozbiljnu bolest bubrega.

Proteini u urinu

U krvi osobe nema proteina ili je njegova količina toliko mala da se ne može utvrditi pomoću laboratorijskih testova. Ako se u urinu otkriju proteini, potrebno je ponovo testirati, jer oni mogu biti prisutni kad se osoba probudi ujutro, kao i nakon teškog fizičkog rada ili stresa kod sportista.

100% je nemoguće vizualno utvrditi da li je protein prisutan u urinu ili ne. Može se samo nagađati kada u urinu ima velike količine bjelkastih pahuljica.

Ako se protein ponovo detektira u mokraći, to ukazuje na prisustvo neke vrste bolesti bubrega. Upalni procesi koji se javljaju u njima izazivaju neznatno povećanje količine proteina. Ako se više od 2 grama izluči urinom, to je alarmantan signal.

Pijelonefritis je upalna bolest kod koje su zahvaćene bubrežna zdjelica, čaška i parenhim. U većini slučajeva uzrok upale je bakterijska infekcija. Potpuni oporavak moguć je samo uz pravovremenu dijagnozu, stoga je, kada se pojave simptomi, potrebno temeljito ispitivanje.