소변에서 단백질을 측정하는 방법. 정량적 평가 방법. 소변에서 단백질을 측정하는 방법

26.02.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

일반적으로 단백질은 100-150mg/day를 넘지 않는 비교적 적은 양으로 소변으로 배설됩니다.

건강한 사람의 일일 이뇨는 1000-1500 ml / day입니다. 따라서 생리학적 조건에서 단백질 농도는 8-10 mg/dL(0.08-0.1 g/L)입니다.

소변의 총 단백질은 알부민, 점액 단백질 및 글로불린의 세 가지 주요 분획으로 표시됩니다.

소변 알부민은 혈청 알부민의 일부로 사구체에서 여과되어 사구체로 재흡수되지 않습니다. 신세뇨관; 정상적인 소변 알부민 배설은 30mg/day 미만입니다. 소변에서 단백질의 또 다른 주요 공급원은 세뇨관, 특히 세뇨관의 말단 부분입니다. 이 세뇨관은 총 요단백의 2/3를 분비합니다. 이 양의 약 50%는 원위 세뇨관의 상피에서 분비되고 형성에 중요한 역할을 하는 Tamm-Horsfall 당단백질로 표시됩니다. 요로결석. 다른 단백질은 소변에 존재합니다. 소량신세뇨관, 신세뇨관 상피(RTE) 마이크로글로불린, 전립선 및 질 분비물에서 재흡수되지 않는 신장 필터 여과된 저분자량 혈장 단백질에서 유래합니다.

단백뇨, 즉 소변의 단백질 함량이 증가하는 것은 신장 손상을 나타내는 가장 중요한 증상 중 하나입니다. 하지만, 전선다른 조건은 또한 단백뇨를 동반할 수 있습니다. 따라서, 단백뇨의 두 가지 주요 그룹이 있습니다: 신장(진정) 및 신외(거짓) 단백뇨.

신장 단백뇨에서 단백질은 사구체 필터의 투과성 증가로 인해 혈액에서 직접 소변으로 들어갑니다. 신장 단백뇨는 사구체신염, 신증, 신우신염, 신장경화증, 신장 아밀로이드증, 다양한 형태신병증, 예를 들어 임신 신병증, 열성 질환, 고혈압등. 단백뇨는 무거운 육체 노동, 저체온증, 심리적 스트레스 후에 건강한 사람들에게서도 발견될 수 있습니다. 생후 첫 주에 신생아에서 생리적 단백뇨가 관찰되고 어린이와 청소년의 무력증과 함께 빠른 성장 7-18 세의 나이에 기립성 단백뇨가 가능합니다 (신체의 직립 자세에서).

거짓(신외) 단백뇨의 경우 소변의 단백질 공급원은 요로 상피의 백혈구, 적혈구 및 요로상피 세포의 혼합물입니다. 이러한 요소의 붕괴, 특히 다음에서 두드러집니다. 알칼리 반응소변은 이미 신장 필터를 통과 한 소변으로 단백질의 침입으로 이어집니다. 특히 높은 학위거짓 단백뇨는 소변에 혈액이 혼합되어 있으며 혈뇨가 많으면 30g / l 이상에 도달 할 수 있습니다. 신장 외 단백뇨가 동반될 수 있는 질병 - 요로결석증, 신장의 결핵, 신장 또는 요로의 종양, 방광염, 신우염, 전립선염, 요도염, 외음부 질염.

임상 분류에는 경증(0.5g/일 미만), 중등도(0.5-4g/일) 또는 중증(4g/일 이상)의 단백뇨가 포함됩니다.

급성 사구체신염이나 신우신염과 같은 신장 질환이 있는 대부분의 환자는 경미한 단백뇨를 보이지만 신증후군 환자는 일반적으로 하루에 4g 이상의 단백질을 소변으로 배설합니다.

단백질의 정량적 측정에는 다양한 방법이 사용되며, 특히 통합 Brandberg-Roberts-Stolnikov 방법, 뷰렛 방법, sulfosalicylic acid를 사용하는 방법, Coomassie blue 염료, pyrogallol red 염료를 사용하는 방법 등이 있습니다.

소변에서 단백질을 측정하기 위한 다양한 방법의 사용은 소변의 정상적인 단백질 함량의 한계를 해석하는 데 심각한 혼란을 초래했습니다. sulfosalicylic acid와 pyrogallol red 염료와 함께 2 가지 방법이 실험실에서 가장 자주 사용되기 때문에 규범 한계의 정확성 문제를 고려할 것입니다. 정상적인 소변에서 설포살리실산법의 위치에서 단백질 함량은 피로갈롤법의 위치에서 0.03g/l를 초과해서는 안되며 - 0.1g/l! 차이 3배!

sulfosalicylic acid를 사용할 때 소변의 단백질 농도 표준 값이 낮은 이유는 다음과 같습니다.

  • 교정 곡선은 에 따라 작성됩니다. 수용액알부민. 구성의 소변은 pH, 염, 저분자량 화합물(크레아티닌, 요소 등)과 같이 물과 매우 다릅니다. 결과적으로 Altshuler, Rakov 및 Tkachev에 따르면 소변에서 단백질을 결정하는 오류는 3배 이상일 수 있습니다! 저것들. 소변 농도가 매우 낮은 경우에만 정확한 결정 결과를 얻을 수 있습니다. 비중그리고 그 구성과 pH가 물에 접근합니다.
  • 다른 단백질과 비교하여 알부민에 대한 설포살리실산 방법의 더 높은 민감도(위에서 언급한 바와 같이 정상 소변 샘플의 알부민은 총 소변 단백질의 30%를 초과하지 않음);
  • 소변의 pH가 알칼리성 쪽으로 이동하면 설포살리실산이 중화되는데, 이는 단백질 측정 결과를 과소평가하는 이유이기도 합니다.
  • 침전물의 침강 속도는 상당한 변동이 있을 수 있습니다. 그렇지 않은 경우 고농도단백질 침전이 느려지고 반응이 일찍 중단되면 결과가 과소 평가됩니다.
  • 침전 반응의 속도는 본질적으로 반응 혼합물의 혼합에 따라 달라집니다. 높은 단백질 농도에서 튜브를 세게 흔들면 큰 플레이크가 형성되고 빠르게 침전될 수 있습니다.

이 방법의 위의 모든 기능은 소변에서 결정된 단백질 농도의 상당한 과소 평가로 이어집니다. 과소평가의 정도는 특정 소변 샘플의 구성에 크게 의존합니다. sulfosalicylic acid 방법은 단백질 농도를 과소평가하기 때문에 이 방법의 정상 한계인 0.03g/l도 임상 실험실 진단에 대한 외국 참고서에 제공된 데이터와 비교하여 약 3배 정도 과소 평가됩니다.

서구 국가의 실험실 대다수는 소변의 단백질 농도를 측정하기 위해 설포살리실산법의 사용을 포기하고 이 목적을 위해 피로갈롤법을 적극적으로 사용하고 있습니다. 소변 및 기타 생물학적 유체의 단백질 농도를 측정하기 위한 피로갈롤 방법은 단백질 분자와 피로갈롤 레드 염료 복합체 및 몰리브덴산 나트륨 복합체 분자의 상호 작용에 의해 형성된 착색 복합체의 광학 밀도를 측정하는 광도 측정 원리를 기반으로 합니다. 피로갈롤 레드-몰리브덴산염 복합체).

피로갈롤 방법이 더 정확한 요단백 측정을 제공하는 이유는 무엇입니까? 첫째, 반응 혼합물에서 소변 샘플이 더 많이 희석되기 때문입니다. 설포살리실산 방법에서 소변 샘플/시약의 비율이 1/3인 경우 피로갈롤 방법에서는 방법 변형에 따라 1/12.5에서 1/60의 범위가 될 수 있으며, 이는 소변 조성의 영향을 크게 감소시킵니다. 측정 결과. 둘째, 반응은 석시네이트 완충액, 즉 안정적인 pH에서 진행됩니다. 그리고 마지막으로 방법의 원리 자체가 더 "투명"하다고 말할 수 있습니다. 몰리브덴산나트륨과 피로갈롤 적색 염료는 단백질 분자와 복합체를 형성합니다. 이것은 600 nm의 파장에서 빛을 흡수하지 않는 자유 상태의 염료 분자가 단백질과 결합하여 빛을 흡수한다는 사실로 이어집니다. 따라서 우리는 각 단백질 분자에 염료를 표시하고 그 결과 600nm 파장에서 반응 혼합물의 광학 밀도 변화가 소변의 단백질 농도와 명확하게 상관 관계가 있음을 발견했습니다. 또한 다른 단백질 분획에 대한 피로갈롤 레드의 친화도가 거의 동일하기 때문에 이 방법을 사용하면 총 소변 단백질을 결정할 수 있습니다. 따라서 국경 정상 값소변의 단백질 농도는 0.1g/l입니다(N. Titz가 편집한 "Clinical Guide to Laboratory Tests"를 포함하여 임상 및 실험실 진단을 위한 모든 현대 서양 지침에 표시되어 있음). 소변의 단백질을 측정하기 위한 피로갈롤과 설포살리실산 방법의 비교 특성은 표 1에 나와 있습니다.

결론적으로, 나는 실험실이 소변의 단백질을 결정하는 sulfosalicylic 방법에서 pyrogallol 방법으로 전환 할 때 정상 값의 한계가 크게 증가한다는 사실에 다시 한 번 초점을 맞추고 싶습니다 (0.03g / l에서 0.1g으로 /엘!). 실험실 직원은 반드시 이에 대해 임상의에게 알려야 합니다. 이 상황에서 단백뇨의 진단은 소변의 단백질 함량이 0.1g/l를 초과할 때만 할 수 있습니다.

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건강한 사람의 매일 소변에서 소량의 단백질이 발견됩니다. 그러나 이러한 낮은 농도는 다음을 사용하여 감지할 수 없습니다. 기존 방법연구. 소변의 단백질에 대한 일반적인 정성 검사가 양성이 되는 다량의 단백질 배설을 단백뇨라고 합니다. 신장(true) 및 extrarenal(false) 단백뇨가 있습니다. 신장 단백뇨에서 단백질은 신장의 사구체에 의한 여과 증가 또는 세뇨관 재흡수 감소로 인해 혈액에서 직접 소변으로 들어갑니다.

신장(진정) 단백뇨

신장(진정) 단백뇨는 기능적이고 유기적입니다. 기능성 신 단백뇨 중 다음 유형이 가장 자주 관찰됩니다.

출생 후 4-10 일에 사라지고 조산아에서 조금 늦게 사라지는 신생아의 생리 학적 단백뇨;
- 기립성 알부민뇨는 7-18세 어린이에게 전형적이며 신체의 직립자세에서만 나타납니다.
- 소화기 계통의 다양한 질병, 중증 빈혈, 화상, 상해 또는 생리적 요인: 무거운 운동 스트레스, 저체온증, 강력한 감정, 풍부하고 단백질이 풍부한 음식 등

유기 (신장) 단백뇨는 신장 질환 (사구체 신염, 신장증, 신장 경화증, 아밀로이드증, 임신 중 신장 병증), 신장 혈역학 장애 (신장 정맥 고혈압, 저산소증), 사구체 모세혈관 벽에 대한 영양 및 독성(약물 포함) 효과.

신장외(거짓) 단백뇨

소변의 단백질 공급원이 백혈구, 적혈구, 박테리아, 요로상피 세포의 혼합물인 신장 외(거짓) 단백뇨. 비뇨기과 질환 (요로 결석, 신장 결핵, 신장 및 요로 종양 등)에서 관찰됩니다.

소변의 단백질 측정

소변 내 단백질을 측정하는 대부분의 정성적 및 정량적 방법은 소변의 부피 또는 매체(소변 및 산)의 경계면에서의 응고를 기반으로 합니다.

요중 베드카를 측정하는 정성적 방법 중 sulfosalicylic acid를 이용한 통합검사와 Heller ring test가 가장 널리 사용된다.

설파살리실산으로 표준화된 샘플은 다음과 같이 수행됩니다. 여과된 소변 3ml를 2개의 튜브에 붓습니다. 그들 중 하나에 sulfasalicylic acid의 20 % 용액 6-8 방울을 추가하십시오. 두 튜브 모두 어두운 배경과 비교됩니다. 설파살리실산이 포함된 시험관의 소변 탁도는 단백질의 존재를 나타냅니다. 연구 전에 소변의 반응을 결정할 필요가 있으며 알칼리성이면 10 % 용액 2-3 방울로 산성화하십시오 아세트산.

겔러 검사는 질산과 소변의 경계에 있는 소변에 단백질이 존재하면 응고되어 흰색 고리가 나타난다는 사실에 근거합니다. 30% 질산용액 1-2ml를 시험관에 붓고 정확히 같은 양의 여과된 소변을 시험관의 벽을 따라 조심스럽게 쌓는다. 두 액체 사이의 경계면에 흰색 고리가 나타나는 것은 소변에 단백질이 있음을 나타냅니다. 때때로 많은 양의 요산염이 존재할 때 백색 고리가 형성되지만 단백질 고리와 달리 두 액체 사이의 경계보다 약간 위에 나타나 가열되면 용해된다는 것을 기억해야 합니다[Pletneva N.G., 1987].

가장 일반적으로 사용되는 정량적 방법은 다음과 같습니다.

1) Heller 링 테스트를 기반으로 하는 통합 Brandberg-Roberts-Stolnikov 방법;
2) 설파살리실산의 첨가에 의해 형성된 탁도에 의한 소변 내 단백질의 정량적 측정을 위한 광전색계 방법;
3) 뷰렛 방법.

단순화 된 가속 방법에 의한 소변의 단백질 검출은 Lachema (슬로바키아), Albuphan, Ames (영국), Albustix, Boehringer (독일), Comburtest 등에서 생산되는 지시지를 사용하는 비색 방법으로 수행됩니다. 테트라브로모페놀 블루와 시트르산 완충액이 함침된 특수 종이 스트립을 소변에 담그면 소변의 단백질 함량에 따라 색이 노란색에서 파란색으로 바뀝니다. 잠정적으로, 검사 소변의 단백질 농도는 표준 척도를 사용하여 결정됩니다. 얻기 위해 정확한 결과다음 조건을 준수해야 합니다. 소변 pH는 3.0-3.5 범위에 있어야 합니다. 너무 알칼리성인 소변(pH 6.5)을 얻을 수 있습니다. 위양성 결과, 너무 산성인 소변(pH 3.0) - 위음성.

종이는 지침에 표시된 것보다 더 오랫동안 테스트 중인 소변과 접촉해서는 안 됩니다. 그렇지 않으면 테스트에서 위양성 반응이 나타날 것입니다. 후자는 소변에 많은 양의 점액이 있을 때도 관찰됩니다. 감광도 다양한 종류그리고 일련의 종이가 다를 수 있으므로 이 방법에 의한 소변 내 단백질의 정량적 평가는 주의해서 다루어야 합니다. 지표지를 사용하여 일일 소변의 양을 측정하는 것은 불가능합니다[Pletneva N.G., 1987]

일일 단백뇨의 정의

하루에 소변으로 배설되는 단백질의 양을 결정하는 몇 가지 방법이 있습니다. 가장 간단한 방법은 Brandberg-Roberts-Stolnikov 방법입니다.

방법론.철저하게 혼합된 일일 소변 5-10ml를 시험관에 붓고 30% 질산 용액을 벽을 따라 조심스럽게 첨가합니다. 소변에 단백질이 0.033%(즉, 소변 1리터당 33mg) 존재하면 2-3분 후에 얇지만 분명히 보이는 흰색 고리가 나타납니다. 낮은 농도에서 테스트는 음성입니다. 소변의 단백질 함량이 높으면 고리가 형성되지 않을 때까지 증류수로 소변을 반복적으로 희석하여 그 양을 결정합니다. 고리가 여전히 보이는 마지막 시험관에서 단백질 농도는 0.033%가 됩니다. 0.033에 소변 희석 정도를 곱하여 희석하지 않은 소변 1리터의 단백질 함량을 그램 단위로 결정합니다. 그런 다음 일일 소변의 단백질 함량은 다음 공식으로 계산됩니다.

K \u003d (x V) / 1000

여기서 K는 일일 소변의 단백질 양(g)입니다. x는 1리터의 소변에 있는 단백질의 양(g)입니다. V는 하루에 배설되는 소변의 양(ml)입니다.

일반적으로 하루 동안 27~150mg(평균 40~80mg)의 단백질이 소변으로 배설됩니다.

이 검사를 통해 소변에서 미세한 단백질(알부민)만 확인할 수 있습니다. 보다 정확한 정량적 방법(colorimetric Kjeldahl 방법 등)은 매우 복잡하고 특수 장비가 필요합니다.

신장 단백뇨의 경우 알부민뿐만 아니라 다른 유형의 단백질도 소변으로 배설됩니다. 정상 단백질도(Seitz et al., 1953에 따름)는 알부민 - 20%, α 1 -글로불린 - 12%, α 2 -글로불린 - 17%, γ-글로불린 - 43% 및 β-글로불린 - 8% . 알부민 대 글로불린의 비율은 다음과 같이 변합니다. 다양한 질병신장, 즉 단백질 분획 사이의 정량적 비율이 깨집니다.

요단백질을 분별하는 가장 일반적인 방법은 다음과 같습니다: 중성염으로 염석, 전기영동 분획, 면역학적 방법(Mancini에 따른 방사형 면역확산 반응, 면역전기영동 분석, 침전 면역전기영동), 크로마토그래피, 겔 여과 및 초원심분리.

전기영동의 이동성, 분자량의 가변성, 요로단백 분자의 크기 및 모양에 대한 연구를 기반으로 요단백을 분별하는 방법의 도입과 관련하여 특정 질병의 특징인 단백뇨의 유형을 분리하고 개별 혈장 단백질. 현재까지 40개 이상의 혈장 단백질이 소변에서 확인되었으며 정상 소변의 31개 혈장 단백질을 포함합니다.

선택적 단백뇨

최근 몇 년 동안 단백뇨 선택성의 개념이 등장했습니다. 1955년에 Hardwicke과 Squire는 "선택적" 및 "비선택적" 단백뇨의 개념을 공식화하여 혈장 단백질이 소변으로 여과되는 특정 패턴을 따릅니다. 즉, 소변으로 배출되는 단백질의 분자량이 클수록 클리어런스가 낮아지고 소변 농도가 낮아집니다.최종 소변. 이 패턴에 해당하는 단백뇨는 유도 패턴의 변이가 특징적인 비선택적인 것과 대조적으로 선택적입니다.

소변에서 분자량이 비교적 큰 단백질의 검출은 신장 필터의 선택성이 없고 현저한 손상을 나타냅니다. 이 경우 단백뇨의 선택성이 낮습니다. 따라서 현재 전분 및 폴리 아크릴 아미드 겔에서 전기 영동 방법을 사용하여 소변의 단백질 분획을 결정하는 것이 널리 보급되었습니다. 이러한 연구 방법의 결과를 바탕으로 단백뇨의 선택성을 판단할 수 있습니다.

V.S. Makhlina(1975)에 따르면 가장 정당한 것은 6-7개의 개별 혈장 단백질(알부민, 트라네페린, α2-마크로글로불린, IgA, IgG, IgM)의 클리어런스를 정밀하고 비교하여 단백뇨의 선택성을 결정하는 것입니다. Mancini에 따른 방사형 면역확산 반응의 특정 정량적 면역학적 방법, 면역전기영동 분석 및 침전 면역전기영동. 단백뇨 선택성의 정도는 비교 단백질(알부민)과 비교 단백질(알부민)의 비율인 선택성 지수에 의해 결정됩니다.

개별 혈장 단백질의 청소율에 대한 연구를 통해 신장 사구체의 여과 기저막 상태에 대한 신뢰할 수 있는 정보를 얻을 수 있습니다. 소변으로 배출되는 단백질의 성질과 사구체 기저막의 변화 사이의 관계는 매우 뚜렷하고 일정하기 때문에 요로단백도는 신장 사구체의 병태생리학적 변화를 간접적으로 판단할 수 있습니다. 괜찮은 평균 크기사구체 기저막의 기공은 2.9-4 A ° NM이며 분자량이 최대 10 4 인 단백질 (미오글로불린, 산 α 1 - 당단백질, 면역 글로불린 경쇄, Fc 및 Fab - IgG 단편, 알부민 및 트랜스페린).

사구체신염, 신증후군의 경우 사구체 기저막의 기공 크기가 증가하여 기저막이 큰 크기와 질량의 단백질 분자(세룰로플라스민, 합토글로빈, IgG, IgA 등)에 대해 투과성이 됩니다. 신장의 사구체에 극도의 손상을 입히면 거대한 혈장 단백질 분자(α 2 -마크로글로불린, IgM 및 β 2 -지단백질)가 소변에 나타납니다.

소변의 단백질 스펙트럼을 결정하면 네프론의 특정 부분이 주로 영향을 받는다는 결론을 내릴 수 있습니다. 사구체 기저막의 병변이 우세한 사구체신염의 경우 소변에 분자량이 크고 중간 정도의 단백질이 존재하는 것이 특징적입니다. 세뇨관 기저막의 우세한 병변이 있는 신우신염의 경우, 큰 분자 단백질의 부재와 증가된 양의 중간 및 저분자량 단백질의 존재가 특징적입니다.

β 2 -마이크로글로불린

알부민, 면역 글로불린, 지단백질과 같은 잘 알려진 단백질 외에도. 피브리노겐, 트랜스페린, 소변은 혈장 미량단백질 단백질을 함유하고 있는데 그 중 1968년 Berggard와 Bearn에 의해 발견된 β 2 -미세글로불린은 임상적으로 관심의 대상이 되며 저분자량(상대분자량 1800)으로 신장 사구체를 자유롭게 통과함 근위 세뇨관에서 재흡수됩니다. 이것은 사구체 여과 및 근위 세뇨관에서 단백질을 재흡수하는 신장의 능력을 결정하기 위해 혈액 및 소변에서 β 2 -마이크로글로불린의 정량적 결정을 허용합니다.

혈장 및 소변에서 이 단백질의 농도는 표준 키트 "Phade-bas β 2 -mikroiest"(Pharmacia, Sweden)를 사용하여 방사선면역분석에 의해 결정됩니다. 건강한 사람의 혈청에는 평균 1.7mg/l(0.6~3mg/l 범위), 평균 81㎍/l(최대 250㎍/l) β 2 -마이크로글로불린이 포함되어 있습니다. 1000mcg/l 이상의 소변 과잉은 병리학적 현상입니다. 혈액 내 β 2 -마이크로글로불린 함량은 사구체 여과 장애를 동반하는 질병, 특히 급성 및 만성 사구체신염, 다낭성 신장 질환, 신장 경화증, 당뇨병성 신장병, 급성 신부전에서 증가합니다.

소변의 β 2 -마이크로 글로불린 농도는 세뇨관의 재 흡수 기능을 침범하는 질병으로 증가하여 특히 신우 신염, 만성 신장의 경우 소변에서 배설이 10-50 배 증가합니다. 실패, 화농성 중독 등. 방광염의 경우 신우 신염과 달리 소변의 β 2 -마이크로 글로불린 농도가 증가하지 않는 것이 특징이며 이는 이러한 질병의 감별 진단에 사용할 수 있습니다. 그러나 연구 결과를 해석할 때 온도의 증가는 항상 소변에서 β 2 -마이크로글로불린 배설의 증가를 동반한다는 점을 고려해야 합니다.

평균 혈액 및 소변 분자

단백질 독소라고도 하는 중간 분자(SM)는 분자량이 500-5000 달톤인 물질입니다. 물리적 구조그들은 알려져 있지 않습니다. SM의 구성은 옥시토신, 바소프레신, 안지오텐신, 글루카곤, 부신피질 자극 호르몬(ACTH) 등 30개 이상의 펩타이드를 포함합니다. SM의 과도한 축적은 신장 기능의 감소와 다량의 변형된 단백질 및 대사 산물로 관찰됩니다. 피. 그들은 다양한 생물학적 효과가 있으며 신경 독성이 있으며 이차 면역 억제, 이차 빈혈을 유발하고 단백질 생합성 및 적혈구 생성을 억제하고 많은 효소의 활성을 억제하며 염증 과정의 단계를 방해합니다.

혈액 및 소변의 SM 수준은 스크리닝 테스트뿐만 아니라 DI-8B 분광 광도계의 254 및 280mm 파장에서 자외선 영역의 분광 광도계뿐만 아니라 파장의 컴퓨터 처리를 통한 동적 분광 광도계에 의해 결정됩니다. 동일한 Beckman 분광계에서 220-335 nm 범위. 혈액 내 SM 함량은 0.24 ± 0.02 arb와 동일한 표준으로 간주됩니다. 단위 및 소변 - 0.312 ± 0.09 arb. 단위
신체의 정상적인 폐기물이기 때문에 일반적으로 밤에 사구체 여과에 의해 0.5% 정도 제거됩니다. 그 중 5%는 다른 방식으로 처리됩니다. 모든 SM 분획은 관형 재흡수를 겪습니다.

비-혈장(조직) 요단백

혈장 단백질 외에도 소변에 비혈장(조직) 단백질이 있을 수 있습니다. Buxbaum과 Franklin(1970)에 따르면, 비-혈장 단백질은 모든 비뇨기 바이오콜로이드의 약 2/3를 차지하고 병적 단백뇨에서 요단백의 상당 부분을 차지합니다. 조직 단백질은 해부학적으로 요로와 관련된 신장 또는 기관에서 직접 소변으로 들어가거나 다른 기관 및 조직에서 혈액으로 들어가고 신장 사구체의 기저막을 통해 소변으로 들어갑니다. 후자의 경우 조직 단백질의 소변으로의 배설은 다양한 분자량의 혈장 단백질의 배설과 유사하게 발생합니다. 비 혈장 요단백질의 구성은 매우 다양합니다. 그 중에는 당단백질, 호르몬, 항원, 효소(효소)가 있습니다.

소변의 조직 단백질은 단백질 화학의 일반적인 방법(초원심분리, 젤 크로마토그래피, 다양한 유형의 전기영동), 효소 및 호르몬에 대한 특이적 반응, 면역학적 방법을 사용하여 검출됩니다. 후자는 또한 소변의 비 혈장 요단백질 농도를 결정하고 어떤 경우에는 출현의 원인이 된 조직 구조를 결정하는 것을 가능하게 합니다. 소변에서 비혈장 단백질을 검출하는 주요 방법은 실험 동물을 인간 소변으로 면역시킨 후 혈장 단백질에 의해 고갈(흡착)하여 얻은 항혈청을 사용한 면역확산 분석입니다.

혈액 및 소변의 효소 검사

병리학 적 과정에서 세포 내 효소가 신체의 액체 매체로 방출되는 것과 함께 세포의 중요한 활동에 심각한 장애가 관찰됩니다. 효소 진단은 혈청의 특징이 아닌 영향을 받는 기관의 세포에서 방출되는 효소의 수를 결정하는 데 기반을 둡니다.
인간 및 동물 네프론에 대한 연구에 따르면 개별 부분에는 각 부서가 수행하는 기능과 밀접한 관련이 있는 높은 효소적 분화가 있습니다. 신장의 사구체는 상대적으로 많은 수의다양한 효소.

신장 세뇨관의 세포, 특히 근위 세뇨관에는 다음이 포함됩니다. 최대 금액효소. 그들의 높은 활성은 Henle 고리, 직접 세관 및 집합관에서 관찰됩니다. 다양한 신장 질환에서 개별 효소의 활성 변화는 과정의 성격, 중증도 및 국소화에 따라 다릅니다. 그들은 신장에 형태 학적 변화가 나타나기 전에 관찰됩니다. 다양한 효소의 함량이 네프론에 명확하게 국한되어 있기 때문에 소변에서 하나 또는 다른 효소의 측정이 국소 진단에 기여할 수 있습니다. 병리학 적 과정신장 (사구체, 세뇨관, 피질 또는 수질)에서 신장 질환의 감별 진단 및 신장 실질에서 과정의 역학 (약독화 및 악화) 결정.

비뇨 생식기 질환의 감별 진단을 위해 다음 효소의 혈액 및 소변 활성 측정이 사용됩니다. , β-글루쿠로니다제, 글루타민-옥살로아세트산 트랜스아미나제(GST), 알돌라제, 트랜스아미디나제 등. 혈청 및 소변에서 효소의 활성은 생화학적, 분광광도계, 크로마토그래피, 형광계 및 화학발광 방법을 사용하여 결정됩니다.

신장 질환의 효소 뇨증은 효소 혈증보다 더 뚜렷하고 규칙적입니다. 그것은 특히 질병의 급성기에 두드러집니다 ( 급성 신우신염, 외상, 종양 부패, 신장 경색 등). 이러한 질병에서 트랜스아미디나제, LDH, 알칼리성 인산분해효소 및 CP, 히알루로니다제, LAP 및 GST, 카탈라제와 같은 비특이적 효소의 높은 활성이 발견됩니다[Polyantseva LR, 1972].

소변에서 LAP와 ALP가 검출되면 네프론에서 효소를 선택적으로 국소화하여 급성 및 만성 질환신장(급성 신부전, 신세뇨관 괴사, 만성 사구체신염) [Shemetov V.D., 1968]. A.A. Karelin과 L.R. Polyantseva(1965)에 따르면, 트랜스아미디나아제는 신장과 췌장의 두 기관에서만 발견됩니다. 그것은 신장의 미토콘드리아 효소이며 일반적으로 혈액과 소변에는 없습니다. 신장의 다양한 질병으로 인해 트랜스 아미디나아제가 혈액과 소변에 나타나고 췌장이 손상되어 혈액에서만 나타납니다.

사구체신염 및 신우신염 진단의 감별 테스트 Krotkiewski(1963)는 소변에서 알칼리성 인산분해효소의 활성을 고려하며, 그 증가는 급성 및 만성 신염보다 신우신염 및 당뇨병성 사구체 경화증에서 더 일반적입니다. 아밀라즈혈증의 역학이 증가하고 아밀라뇨증의 동시 감소는 신장 경화증 및 신장 주름을 나타낼 수 있으며, LAP는 다음에서 가장 중요합니다. 병리학적 변화신장의 사구체와 복잡한 세뇨관에서 네프론의 이러한 부분의 함량이 더 높기 때문에 [Shepotinovsky V.P. et al., 1980]. 루푸스 신염의 진단을 위해서는 β-glucuronidase와 CF의 측정이 권장된다[Privalenko M.N. et al., 1974].

신장 질환 진단에서 효소의 역할을 평가할 때 다음 조항을 고려해야 합니다. 작은 분자량을 가진 단백질인 효소는 온전한 사구체를 통과하여 소위 생리학적 효소를 결정할 수 있습니다. 이들 효소 중 α-아밀라아제(상대분자량 45,000)와 유로펩신(상대분자량 38,000)은 소변에서 지속적으로 검출됩니다.

건강한 사람의 소변에 있는 저분자 효소와 함께 LDH, 아스파르테이트 및 알라닌 아미노트랜스퍼라제, 알칼리성 포스파타제 및 CP, 말타제, 알돌라제, 리파제, 다양한 프로테아제 및 펩티다제, 설파타제, 카탈라제, 리보뉴클레아제, 퍼옥시다아제.

Richterich(1958)와 Hess(1962)에 따르면 상대 분자량이 70,000-100,000 이상인 고분자 효소는 사구체 필터의 투과성이 손상된 경우에만 소변으로 들어갈 수 있습니다. 소변에서 효소의 정상적인 함량은 요관 폐색으로 신장의 병리학 적 과정을 배제하는 것을 허용하지 않습니다. epimuria로 효소는 신장 자체뿐만 아니라 다른 실질 기관, 요로 점막 세포, 전립선, 혈뇨 또는 백혈구 뇨가 있는 소변의 형성 요소에서도 방출될 수 있습니다.

대부분의 효소는 신장에 비특이적이므로 건강한 사람과 아픈 사람의 소변에서 발견되는 효소가 어디에서 왔는지 확인하기 어렵습니다. 그러나 신장 손상의 비특이적 효소의 경우에도 효소의 정도는 정상 또는 다른 장기의 질병에서 관찰되는 것보다 높습니다. 많은 효소, 특히 아미노전이효소와 같은 장기 특이적 효소의 역학에 대한 포괄적인 연구를 통해 더 가치 있는 정보를 얻을 수 있습니다.

소변에 있는 효소의 신장 기원 문제를 해결하는 데 있어 동종효소 연구는 연구 대상 기관의 전형적인 분획을 식별하는 데 도움이 됩니다. 동종효소는 작용 시 동종(동일한 반응을 촉매함)이지만 화학 구조 및 기타 특성이 이질적인 효소입니다. 각 조직에는 고유한 동종효소 스펙트럼이 있습니다. 동종효소 분리를 위한 유용한 방법은 전분 및 폴리아크릴아미드 겔에서의 전기영동과 이온 교환 크로마토그래피입니다.

벤스 존스 단백질

다발성 골수종과 Waldenström의 거대 글로불린혈증이 있는 경우 Bence-Jones 단백질이 소변에서 발견됩니다. 소변에서 이 단백질을 검출하는 방법은 열침전 반응을 기반으로 합니다. 100°C의 온도에서 이 단백질의 용해를 평가하고 후속 냉각 시 재침전을 평가하는 이전에 사용된 방법은 모든 Bence-Jones 단백질 몸체가 적절한 특성을 갖는 것은 아니기 때문에 신뢰할 수 없습니다.

40-60 °C의 온도에서 침전하여 이 파라단백질을 보다 안정적으로 검출합니다. 그러나 이러한 조건에서도 너무 산성(pH)에서는 침전이 일어나지 않을 수 있습니다.< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6,5) 낮은 OPM 및 낮은 Bence-Jones 단백질 농도와 함께 소변. 가장 유리한 침전 조건은 Patnem이 제안한 방법에 의해 제공됩니다. 여과된 소변 4ml를 2M 아세테이트 완충액 pH 4.9 1ml와 혼합하고 56°C 온도의 수조에서 15분 동안 가열합니다. Bence-Jones 단백질이 있는 경우 처음 2분 동안 뚜렷한 침전물이 나타납니다.

Bence-Jones 단백질 농도가 3g/l 미만이면 검사가 음성일 수 있지만 실제로는 소변 농도가 일반적으로 더 중요하기 때문에 매우 드뭅니다. 끓는 샘플은 완전히 신뢰할 수 없습니다. 면역 글로불린의 중쇄 및 경쇄에 대한 특정 혈청을 사용하는 면역 전기 영동 방법으로 소변에서 완전히 확실하게 검출할 수 있습니다.

소변의 단백질 : 결정 방법

병적 단백뇨 신장 및 요로 질환의 가장 중요하고 지속적인 징후 중 하나입니다. 소변의 단백질 농도를 결정하는 것은 소변 연구의 필수적이고 중요한 요소입니다. 단백뇨의 검출 및 정량화는 많은 1차 및 2차 신장 질환의 진단에서 중요할 뿐만 아니라 역학에서 단백뇨의 중증도 변화의 평가는 병리학적 과정 및 치료의 효과에 대한 정보를 전달합니다. 미량이라도 소변에서 단백질이 검출되면 가능한 질병신장 또는 요로에 대한 재분석이 필요합니다. 특히 주목할만한 점은 소변 연구의 무의미함, 특히 모든 것을 관찰하지 않고 소변 단백질을 측정한다는 것입니다. 수집 규칙.

소변에서 단백질을 결정하는 모든 방법은 다음과 같이 나눌 수 있습니다.

    품질,

    반 정량적,

    양적.

정성적 방법

모두 소변의 단백질에 대한 정성 검사 다양한 물리적 및 화학적 요인의 영향으로 단백질이 변성하는 능력을 기반으로 합니다. 테스트 소변 샘플에 단백질이 있는 경우 탁도나 응집 침전이 나타납니다.

응고 반응을 기반으로 한 소변의 단백질 결정 조건:

    소변은 산성이어야 합니다. 알칼리성 소변은 몇 방울의 아세트산(5 - 10%)으로 산성화됩니다.

    소변이 깨끗해야 합니다. 탁도는 종이 필터를 통해 제거됩니다. 연무가 지속되면 활석 또는 탄 마그네시아(소변 100ml당 약 1티스푼)를 추가하고 흔들어 여과합니다.

    정성적 샘플은 두 개의 시험관에서 수행되어야 하며, 그 중 하나는 대조군입니다.

    탁도는 투과광에서 검정색 배경에 있어야 합니다.

소변에서 단백질을 측정하는 정성적 방법은 다음과 같습니다.

    헬러 링 테스트,

    15 - 20% 설포살리실산이 포함된 샘플,

    끓는 시험 등.

수많은 연구에 따르면 소변 내 단백질의 정성적 측정에 대해 알려진 수많은 방법 중 어느 것도 신뢰할 수 있고 재현 가능한 결과를 제공하지 못합니다. 그럼에도 불구하고 러시아의 대부분의 DLT에서 이러한 방법은 스크리닝으로 널리 사용됩니다. 긍정적 인 정성 반응이있는 소변에서 단백질의 추가 정량적 결정이 수행됩니다. 정성적 반응 중 Geller 검사와 sulfosalicylic acid 검사가 더 일반적으로 사용되지만 일반적으로 sulfosalicylic acid 검사가 병적 단백뇨를 검출하는 데 가장 적합하다고 여겨집니다. 끓는 시험은 복잡성과 기간으로 인해 현재 실제로 사용되지 않습니다.

반정량적 방법

에게 반정량적 방법 말하다:

    Brandberg-Roberts-Stolnikov 방법,

    진단 테스트 스트립을 사용하여 소변의 단백질 측정.

Brandberg-Roberts-Stolnikov 방법은 Geller 링 테스트를 기반으로 하므로 이 방법을 사용하면 Geller 테스트와 동일한 오류가 관찰됩니다.

현재 진단 스트립은 소변의 단백질을 결정하는 데 점점 더 많이 사용됩니다. 구연산염 완충액의 브로모페놀 블루 염료는 스트립의 소변 내 단백질의 반정량적 측정을 위한 지표로 가장 자주 사용됩니다. 소변의 단백질 함량은 반응 영역이 소변과 접촉한 후 나타나는 청록색의 강도에 의해 판단됩니다. 결과는 시각적으로 또는 소변 분석기를 사용하여 평가됩니다. 건식 화학법의 큰 인기와 명백한 장점(간단함, 분석 속도)에도 불구하고 일반적으로 이러한 소변 분석 및 특히 단백질 측정 방법에는 심각한 단점이 있습니다. 진단 정보의 왜곡을 초래하는 그 중 하나는 다른 단백질에 비해 알부민에 대한 브로모페놀 블루 지표의 더 큰 민감도입니다. 이와 관련하여 테스트 스트립은 거의 모든 소변 단백질이 알부민으로 표시되는 선택적 사구체 단백뇨의 검출에 주로 적용됩니다. 변화의 진행과 선택적 사구체 단백뇨가 비선택성(소변에서 글로불린의 출현)으로 전환됨에 따라 단백질 측정 결과는 실제 값에 비해 과소 평가됩니다. 이 사실은 역학에서 신장(사구체 필터)의 상태를 평가하기 위해 소변의 단백질을 결정하는 이 방법을 사용하는 것을 불가능하게 만듭니다. 관상 단백뇨의 경우 단백질 측정 결과도 과소 평가됩니다. 계량봉을 사용한 단백질 검사는 낮은 수준의 단백뇨를 나타내는 신뢰할 수 있는 지표가 아닙니다(현재 사용 가능한 대부분의 계량봉은 0.15g/l 미만 농도에서 소변의 단백질을 검출할 수 없습니다). 스트립에 대한 단백질 측정의 음성 결과는 소변에 글로불린, 헤모글로빈, uromucoid, Bence-Jones 단백질 및 기타 파라단백질의 존재를 배제하지 않습니다.

당단백질 함량이 높은 점액 조각(예: 요로의 염증 과정, 농뇨, 세균뇨)은 스트립의 표시 영역에 정착하여 위양성 결과를 초래할 수 있습니다. 위양성 결과는 또한 높은 농도와 관련될 수 있습니다. 요소. 조명이 약하고 색상 인식이 좋지 않으면 결과가 정확하지 않을 수 있습니다.

이와 관련하여 진단 스트립의 사용은 선별 절차로 제한되어야 하며 도움을 받아 얻은 결과는 참고용으로만 고려해야 합니다.

정량적 방법

옳은 소변 내 단백질의 정량적 측정 어떤 경우에는 어려운 작업으로 판명됩니다. 솔루션의 어려움은 다음과 같은 요인에 의해 결정됩니다.

    화학 반응 과정을 방해할 수 있는 많은 화합물의 소변 존재;

    다양한 질병에서 요단백의 함량과 구성에 상당한 변동이 있어 적절한 교정 물질을 선택하기 어렵습니다.

임상 실험실에서는 소변의 단백질을 측정하기 위한 소위 "일상적인" 방법이 주로 사용되지만 항상 만족스러운 결과를 제공하는 것은 아닙니다.

실험실에서 일하는 분석가의 관점에서 볼 때 소변의 단백질을 정량화하도록 설계된 방법은 다음 요구 사항을 충족해야 합니다.

    화학 반응 중에 형성된 복합체의 흡수와 광범위한 농도에서 샘플의 단백질 함량 사이에 선형 관계가 있어 연구용 샘플을 준비할 때 추가 작업을 피할 수 있습니다.

    단순해야 하며 수행자의 높은 자격을 요구하지 않으며 적은 수의 작업으로 수행되어야 합니다.

    소량의 시험 재료를 사용할 때 높은 감도, 분석 신뢰성을 갖는다.

    다양한 요인(샘플 구성의 변동, 약물의 존재 등)에 내성이 있어야 합니다.

    수용 가능한 비용이 있어야 합니다.

    자동 분석기에 쉽게 적응할 수 있어야 합니다.

    결정의 결과에 의존해서는 안 됩니다. 단백질 조성소변 샘플을 테스트합니다.

현재 알려진 소변 단백질의 정량적 측정 방법 중 어느 것도 "황금 표준"이라고 완전히 주장할 수는 없습니다.

소변에서 단백질을 측정하는 정량적 방법은 탁도법과 비색법으로 나눌 수 있습니다.

탁도법

탁도 측정 방법에는 다음이 포함됩니다.

    설포살리실산(SSK)으로 단백질 측정,

    단백질의 결정 트리클로로아세트산(목),

    염화 벤제토늄으로 단백질 측정.

탁도 측정법은 침전제의 영향으로 부유 입자의 현탁액이 형성되어 소변 단백질의 용해도가 감소하는 것을 기반으로합니다. 테스트 샘플의 단백질 함량은 광산란 입자의 수에 의해 결정되는 광산란 강도(네펠로메트릭 분석법) 또는 생성된 현탁액에 의한 광속의 약화(탁도 분석법 분석)에 의해 판단됩니다. ).

소변에서 단백질을 검출하기 위한 침전 방법에서 빛 산란의 양은 시약의 혼합 속도, 반응 혼합물의 온도, 매질의 pH 값, 외부 화합물의 존재, 측광 방법과 같은 많은 요인에 따라 달라집니다. 반응 조건을 주의 깊게 관찰하면 입자 크기가 일정한 안정적인 현탁액이 형성되고 비교적 재현 가능한 결과를 얻을 수 있습니다.

일부 약물은 소변의 단백질을 측정하기 위한 탁도 측정 방법의 결과를 방해하여 소위 "위양성" 또는 "위음성" 결과를 초래합니다. 여기에는 일부 항생제(벤질페니실린, 클록사실린 등), 방사선 불투과성 요오드 함유 물질, 설파닐아미드 제제가 포함됩니다.

탁도법은 표준화가 어렵고 종종 잘못된 결과를 초래하지만, 그럼에도 불구하고 저렴한 비용과 시약의 가용성으로 인해 현재 실험실에서 널리 사용됩니다. 러시아에서 가장 널리 사용되는 방법은 설포살리실산으로 단백질을 측정하는 것입니다.

비색법

가장 민감하고 정확한 것은 단백질의 특정 색상 반응을 기반으로 소변의 총 단백질을 결정하는 비색 방법입니다.

여기에는 다음이 포함됩니다.

    뷰렛 반응,

    로리 방법,

    단백질과 복합체를 형성하는 다양한 염료의 능력에 기반한 방법:

    폰소 S(퐁소 S),

    Coomassie Brilliant Blue(쿠마시 브릴리언트 블루)

    피로갈롤 레드(Pyrogallol Red).

수행자 입장에서는 연구의 흐름이 많은 연구실의 일상 업무에서 뷰렛 방식은 수술 횟수가 많아 불편하다. 동시에, 이 방법은 높은 분석 신뢰성을 특징으로 하며, 광범위한 농도의 단백질 측정 및 비교 가능한 감도로 알부민, 글로불린 및 파라단백질의 검출을 허용하므로 뷰렛 방법은 다음과 같이 간주됩니다. 참고로 소변에서 단백질을 검출하는 다른 분석 방법과 비교하는 것이 좋습니다. 소변의 단백질을 측정하는 뷰렛 방법은 신장과를 담당하는 실험실에서 수행하는 것이 바람직하며 다른 방법을 사용한 측정 결과가 의심스러운 경우 및 신장 환자의 일일 단백질 손실량을 결정하는 데 사용됩니다.

뷰렛법보다 감도가 높은 로우리법은 단백질 분자 내 아미노산 티로신과 트립토판에 대해 뷰렛 반응과 폴린 반응을 결합한 것이다. 높은 감도에도 불구하고 이 방법은 소변의 단백질 함량을 결정할 때 항상 신뢰할 수 있는 결과를 제공하지는 않습니다. 그 이유는 Folin 시약과 소변의 비단백질 성분(대부분 아미노산, 요산, 탄수화물)과의 비특이적 상호작용 때문입니다. 투석 또는 단백질 침전에 의한 이들 및 기타 요 성분의 분리는 이 방법을 요내 단백질의 정량적 측정에 성공적으로 사용할 수 있도록 합니다. 살리실산염, 클로르프로마진, 테트라사이클린과 같은 일부 약물은 이 방법에 영향을 미치고 연구 결과를 왜곡할 수 있습니다.

충분한 감도, 우수한 재현성 및 염료 결합에 의한 단백질 측정 용이성은 이러한 방법을 유망하게 만들지만 높은 시약 비용은 실험실에서의 광범위한 사용을 방해합니다. 현재 러시아에서는 피로갈롤 레드를 사용하는 방법이 널리 보급되고 있습니다.

단백뇨의 수준을 검사할 때 단백뇨를 결정하는 다른 방법은 수많은 소변 단백질에 대해 다른 민감도와 특이성을 가지고 있음을 염두에 두어야 합니다.

경험적 데이터를 기반으로 두 가지 다른 방법으로 단백질을 결정하고 계산하는 것이 좋습니다. 진정한 가치위 공식 중 하나에 따라: 단백뇨 = 0.4799 B + 0.5230 L; 단백뇨 = 1.5484 B - 0.4825 S; 단백뇨 = 0.2167 S + 0.7579 L; 단백뇨 = 1.0748 P - 0.0986 B; 단백뇨 = 1.0104 P - 0.0289 S; 단백뇨 = 0.8959P + 0.0845L; 여기서 B는 Coomassie G-250으로 측정한 결과입니다. L은 Lowry 시약으로 측정한 결과입니다. P는 피로갈롤 몰리브덴산염을 사용한 측정 결과입니다. S는 설포살리실산으로 측정한 결과이다.

하루 중 다른 시간에 단백뇨 수준의 뚜렷한 변동과 이뇨에 대한 소변의 단백질 농도 의존성, 소변의 개별 부분의 함량이 다르기 때문에 이제는 다음을 평가하는 것이 일반적입니다. 소변에서 단백질이 매일 손실되어 신장 병리학에서 단백뇨의 중증도, 즉 일일 단백뇨를 결정합니다. g/day로 표시됩니다.

일일 소변을 수집하는 것이 불가능한 경우 단일 소변 부분의 단백질 및 크레아티닌 농도를 결정하는 것이 좋습니다. 낮 동안의 크레아티닌 방출 속도는 매우 일정하고 배뇨 속도의 변화에 ​​의존하지 않기 때문에 크레아티닌 농도에 대한 단백질 농도의 비율은 일정합니다. 이 비율은 일일 단백질 배설과 잘 관련되어 있으므로 단백뇨의 중증도를 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 일반적으로 단백질/크레아티닌 비율은 0.2 미만이어야 합니다. 단백질과 크레아티닌은 g/l로 측정됩니다. 단백질-크레아티닌 비율로 단백뇨의 중증도를 평가하는 방법의 중요한 이점은 일일 소변 수집이 불가능하거나 불완전한 수집과 관련된 오류를 완전히 제거한다는 것입니다.

문학:

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소변에서 단백질을 측정하는 모든 방법은 화학 물질 또는 열 작용제의 영향으로 단백질 응고를 기반으로 합니다. 소변에 단백질이 있으면 탁도가 나타나며 그 정도는 단백질 양에 따라 다릅니다.

가) 품질 테스트소변의 단백질 측정 - 필수입니다.

1. 질산 샘플- 시험관에 50% 질산용액 1-2ml를 넣고 액체가 흔들리지 않도록 조심스럽게 같은 양의 소변을 담습니다. 소변에 단백질이 있는 경우 두 액체의 경계에 흰색 고리가 나타나며 검은색 배경에서 더 잘 보입니다.

2. 설파살리실산 샘플- 시험관에 소변 4~5ml를 붓고 시약 8~10방울을 가한다. 소변에 단백질이 있는 경우 그 양에 따라 탁함이나 응집이 발생할 수 있습니다.

3. 익스프레스 테스트(건식 진단 테스트)- Albufan 지시약지 스트립을 검사 소변에 담가 두 지시약 영역을 동시에 적셔줍니다(상단 영역은 pH 측정용, 아래쪽 영역은 단백질 측정용). 2-3초 후 스트립을 흰색 유리판 위에 놓습니다. 평가는 표시 스트립이 있는 케이스에 인쇄된 색상 눈금을 사용하여 스트립을 소변으로 적신 후 60초 후에 수행됩니다.

나) 정량 샘플- 소변 중 단백질이 발견된 부분에서 수행 정성적 정의; 원심분리 후 상층액에서 측정

Brandberg-Roberts-Stolnikov 방법- 시험관에 50% 질산용액 1~3ml를 가하고 같은 양의 소변을 벽을 따라 조심스럽게 쌓는다. 시간은 스톱워치에 기록됩니다. 액체의 계면에 링이 형성되는 즉시 또는 적층 후 2분 이전에 형성되는 경우 소변을 물로 희석해야 합니다. 그 후, 희석된 소변에서 단백질을 반복적으로 측정합니다. 희석된 소변을 질산에 가했을 때 2~3분 사이에 흰색 고리가 나타날 때까지 희석한다. 단백질의 양은 0.033ppm에 희석도를 곱하여 결정합니다.

18. 식물상, 임균, 트리코모나스, 세포 학적 검사, KPI.

식물 도말 기법: 재료는 시각적으로 제어되는 특수 브러시를 사용하여 자궁 경관과 요도에서 가져옵니다. 생성된 샘플을 즉시 유리 슬라이드에 놓고 분쇄합니다.

트리코모나스에 대한 도말 검사 기술: 먼저 요도의 점막(치골 결합부에 1분 동안 예비 마사지 후)과 질의 후두개를 긁어서 재료를 채취한 다음, 자궁경부의 질 부분을 a로 닦습니다. 식염수를 적신 멸균 면봉으로 점액 플러그를 제거합니다. 자궁 경관조심스럽게 프로브를 1.0-1.5cm 이하의 깊이로 삽입하고 자궁 경부의 점막에서 긁어냅니다.

임균에 대한 도말 기법: 생리식염수를 적신 면봉, 질 핀셋 또는 특수 탐침으로 요도, 바르톨린샘 및 요도주위 통로에서 물질을 채취합니다. 직장에서 무딘 숟가락으로 재료를 가져옵니다. 만성 및 미열 임질에서 병원체 식별 가능성을 높이기 위해 연구 전에 도발이 수행됩니다.

면봉으로 월경 중에 ​​재료를 가져갈 수 없습니다.

세포 학적 검사를위한 도말 검사 기술: 엔도 브러시로 자궁 경부에서 주걱으로 외경부, 질 및 외음부의 표면에서 얼룩을 채취합니다. 재료가 적용됩니다 얇은 층특수 처리된 탈지 유리에 특별한 구성세포가 건조해지는 것을 방지하기 위해. 제제는 Papanicolaou 방법(소위 Pap smear)에 따라 염색되고 현미경으로 관찰됩니다.

Karyopyknotic 지수- 소포(비단축) 핵이 있는 세포에 대한 비중병 핵이 있는 표면 세포의 백분율. 난포기 초기의 CRPD 생리주기 25-30%, 배란 시 60-70%, 황체기에는 25%로 감소합니다.

지침

단백질 측정을 위한 정성적 방법 오줌: Heller법, 20% sulfosalicylic acid test, Boiling test 등 반정량법 : 진단용 스트립을 이용하여 단백질을 정량 오줌, Brandberg-Roberts-Stolnikov 방법. 정량적 방법: 탁도 및 비색.

매일의 단백질 측정 오줌 0.033g/리터 이상의 농도에서 병리학입니다. 일반적으로 소변의 아침 부분에서 단백질 농도는 0.002g / l를 초과하지 않으며 매일 오줌단백질 농도는 50-150mg의 단백질을 넘지 않습니다.

출처:

  • 소변의 단백질 측정

소변은 인간의 신진대사의 산물입니다. 그것은 신장에서 혈액을 여과하는 동안 형성되기 때문에 소변의 구성이 인체의 상태를 명확하게 설명합니다.

소변은 150개 이상의 화합물로 구성된 복잡한 용액입니다. 아세톤, 담즙산, 단백질, 포도당과 같은 일부 특정 물질은 특정 질병에만 존재할 수 있습니다.

인간의 건강을 통제하려면 우선 소변의 양을 결정해야합니다. 표준은 하루에 1-1.8 리터의 소변이 형성되는 것입니다. 2 리터 이상의 소변이 배설되면 이것은 신장 활동에 위반 가능성이 있다는 신호입니다. 당뇨병및 기타 여러 질병. 하루에 0.5리터 미만의 소변이 생성되면 요관이나 방광이 막힌 것입니다.

소변 색깔

배설되는 소변의 색은 여러 요인에 따라 달라지므로 연한 노란색에서 주황색까지 다양합니다. 특정 색조의 존재는 특정 음식과 사람이 복용하는 약물의 영향을 받을 수 있습니다.

약물을 복용한 후 소변이 얼룩지고 붉은 색조가 나타날 수 있습니다. 사람이 활발하게 움직이면 많은 양의 땀을 흘리면서 소변의 농도가 짙어집니다. 노란색, Nitroxoline 또는 Bioomycin과 같은 자금을 복용할 때 뿐만 아니라.

사람이 착색 식품과 의약품을 복용하지 않았지만 소변의 색이 평소와 다른 경우 신체에 질병이 있음을 의심할 수 있습니다. 예를 들어, 간 질환에서 소변은 진한 노란색 또는 녹색을 띱니다.

배설된 소변에 혈액이 있으면 통증이 관찰되는 경우 결석이 있거나 신장 출혈이 있음을 분명히 나타냅니다.

배뇨가 어려운 경우 방광 감염으로 인한 염증 과정을 나타낼 수 있습니다. 그리고 여기 더러운 탁한 소변증언하다 심각한 질병신장.

소변의 단백질

사람의 혈액에는 단백질이 없거나 그 양이 너무 적어 실험실 검사로 결정할 수 없습니다. 소변에서 단백질이 검출되면 아침에 일어났을 때뿐만 아니라 운동 선수의 힘든 육체 노동이나 운동 후에도 존재할 수 있으므로 반복 검사를 수행해야합니다.

소변에 단백질이 존재하는지 여부를 육안으로 확인하는 것은 100% 불가능합니다. 소변에 희끄무레한 조각이 많을 때만 추측할 수 있습니다.

소변의 단백질이 반복적으로 감지되면 일종의 신장 질환이 있음을 나타냅니다. 염증 과정그들에서 발생하면 단백질 양이 약간 증가합니다. 2g 이상이 소변으로 배설되면 이것은 경보 신호.

신우신염은 염증성 질환, 신장 골반, 꽃받침 및 실질이 영향을받습니다. 대부분의 경우 염증은 다음으로 인해 발생합니다. 박테리아 감염. 적시에 진단해야 완전한 회복이 가능하므로 증상이 나타나면 철저한 검사가 필요합니다.