मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के तरीके। मात्रात्मक मूल्यांकन के तरीके। मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के तरीके

26.02.2009

कुरिलक ओ.ए., पीएच.डी.

आम तौर पर, मूत्र में प्रोटीन अपेक्षाकृत कम मात्रा में उत्सर्जित होता है, आमतौर पर प्रति दिन 100-150 मिलीग्राम से अधिक नहीं।

एक स्वस्थ व्यक्ति में दैनिक डायरिया 1000-1500 मिली / दिन है; इस प्रकार, शारीरिक स्थितियों के तहत प्रोटीन एकाग्रता 8-10 मिलीग्राम/डीएल (0.08-0.1 ग्राम/ली) है।

मूत्र के कुल प्रोटीन को तीन मुख्य अंशों द्वारा दर्शाया जाता है - एल्ब्यूमिन, म्यूकोप्रोटीन और ग्लोब्युलिन।

मूत्र एल्ब्यूमिन सीरम एल्ब्यूमिन का वह भाग है जिसे ग्लोमेरुलस में फ़िल्टर किया गया है और फिर से अवशोषित नहीं किया गया है गुर्दे की नली; सामान्य मूत्र एल्ब्यूमिन का उत्सर्जन 30 मिलीग्राम / दिन से कम है। मूत्र में प्रोटीन का एक अन्य मुख्य स्रोत वृक्क नलिकाएं हैं, विशेष रूप से नलिकाओं का दूरस्थ भाग। ये नलिकाएं कुल मूत्र प्रोटीन का दो-तिहाई स्रावित करती हैं; इस राशि का लगभग 50% टैम-हॉर्सफॉल ग्लाइकोप्रोटीन द्वारा दर्शाया जाता है, जो डिस्टल नलिकाओं के उपकला द्वारा स्रावित होता है और निर्माण में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। मूत्र पथरी. मूत्र में अन्य प्रोटीन मौजूद होते हैं छोटी राशिऔर वृक्क फिल्टर-फ़िल्टर्ड कम आणविक भार प्लाज्मा प्रोटीन से उत्पन्न होते हैं जो वृक्क नलिकाओं, वृक्क ट्यूबलर एपिथेलियम (RTE) माइक्रोग्लोबुलिन, और प्रोस्टेटिक और योनि स्राव में पुन: अवशोषित नहीं होते हैं।

प्रोटीनुरिया, यानी मूत्र में प्रोटीन की मात्रा में वृद्धि, गुर्दे की क्षति को दर्शाने वाले सबसे महत्वपूर्ण लक्षणों में से एक है। हालाँकि, पूरी लाइनप्रोटीनूरिया के साथ अन्य स्थितियां भी हो सकती हैं। इसलिए, प्रोटीनुरिया के दो मुख्य समूह हैं: वृक्क (सच्चा) और एक्स्ट्रारेनल (झूठा) प्रोटीनमेह।

वृक्क प्रोटीनमेह में, ग्लोमेरुलर फिल्टर की पारगम्यता में वृद्धि के कारण प्रोटीन रक्त से सीधे मूत्र में प्रवेश करता है। रेनल प्रोटीनुरिया अक्सर ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस, नेफ्रोसिस, पायलोनेफ्राइटिस, नेफ्रोस्क्लेरोसिस, रीनल एमाइलॉयडोसिस में पाया जाता है। विभिन्न रूपनेफ्रोपैथी, उदाहरण के लिए, गर्भावस्था की नेफ्रोपैथी, ज्वर की स्थिति, उच्च रक्तचापआदि। स्वस्थ लोगों में भारी शारीरिक परिश्रम, हाइपोथर्मिया, मनोवैज्ञानिक तनाव के बाद भी प्रोटीनूरिया पाया जा सकता है। जीवन के पहले हफ्तों में नवजात शिशुओं में, शारीरिक प्रोटीनुरिया मनाया जाता है, और बच्चों और किशोरों में अस्टेनिया के साथ संयोजन में तेजी से विकास 7-18 वर्ष की आयु में, ऑर्थोस्टेटिक प्रोटीनुरिया संभव है (शरीर की सीधी स्थिति में)।

झूठे (एक्स्ट्रारेनल) प्रोटीनुरिया के साथ, मूत्र में प्रोटीन का स्रोत ल्यूकोसाइट्स, एरिथ्रोसाइट्स और मूत्र पथ उपकला के यूरोटेलियल कोशिकाओं का एक मिश्रण है। इन तत्वों का क्षय, विशेष रूप से उच्चारित क्षारीय प्रतिक्रियामूत्र, मूत्र में प्रोटीन के प्रवेश की ओर जाता है, जो पहले से ही गुर्दे के फिल्टर को पार कर चुका है। ख़ास तौर पर एक उच्च डिग्रीझूठी प्रोटीनमेह मूत्र में रक्त का एक मिश्रण देता है, प्रचुर मात्रा में हेमट्यूरिया के साथ यह 30 ग्राम / लीटर या उससे अधिक तक पहुंच सकता है। रोग जो एक्स्ट्रारेनल प्रोटीनुरिया के साथ हो सकते हैं - यूरोलिथियासिस रोग, गुर्दे का तपेदिक, गुर्दे या मूत्र पथ के ट्यूमर, सिस्टिटिस, पाइलाइटिस, प्रोस्टेटाइटिस, मूत्रमार्गशोथ, vulvovaginitis।

नैदानिक ​​वर्गीकरण में हल्के प्रोटीनमेह (0.5 ग्राम/दिन से कम), मध्यम (0.5 से 4 ग्राम/दिन), या गंभीर (4 ग्राम/दिन से अधिक) शामिल हैं।

गुर्दे की बीमारी वाले अधिकांश रोगियों जैसे तीव्र ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस या पायलोनेफ्राइटिस में हल्का प्रोटीनमेह होता है, लेकिन नेफ्रोटिक सिंड्रोम वाले रोगी आमतौर पर मूत्र में प्रतिदिन 4 ग्राम से अधिक प्रोटीन उत्सर्जित करते हैं।

प्रोटीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए विधियों की एक विस्तृत श्रृंखला का उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से, एकीकृत ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि, बाय्यूरेट विधि, सल्फ़ोसैलिसिलिक एसिड का उपयोग करने वाली विधि, Coomassie ब्लू डाई, पाइरोगॉल रेड डाई, आदि का उपयोग करने वाली विधियाँ।

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए विभिन्न विधियों के उपयोग से मूत्र में प्रोटीन की सामान्य सामग्री की सीमा की व्याख्या में गंभीर भ्रम पैदा हो गया है। चूंकि प्रयोगशालाओं में सबसे अधिक बार 2 विधियों का उपयोग किया जाता है - सल्फोसैलिसिलिक एसिड और पाइरोगॉलोल लाल डाई के साथ, हम उनके लिए मानदंडों की सीमा की शुद्धता की समस्या पर विचार करेंगे। सामान्य मूत्र में सल्फोसैलिसिलिक विधि की स्थिति से, पाइरोगॉल विधि की स्थिति से प्रोटीन सामग्री 0.03 ग्राम / एल से अधिक नहीं होनी चाहिए - 0.1 ग्राम / एल! मतभेद तिगुना!

सल्फोसैलिसिलिक एसिड का उपयोग करते समय मूत्र में प्रोटीन की सांद्रता के मानदंड के निम्न मान निम्नलिखित बिंदुओं के कारण होते हैं:

• अंशांकन वक्र के अनुसार बनाया गया है जलीय घोलएल्बुमिन इसकी संरचना में मूत्र पानी से बहुत अलग है: पीएच, लवण, कम आणविक भार यौगिक (क्रिएटिनिन, यूरिया, आदि)। नतीजतन, Altshuler, Rakov और Tkachev के अनुसार, मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने में त्रुटि 3 गुना या अधिक हो सकती है! वे। सही निर्धारण के परिणाम केवल उन मामलों में प्राप्त किए जा सकते हैं जहां मूत्र बहुत कम है विशिष्ट गुरुत्वऔर इसकी संरचना और पीएच पानी के करीब पहुंचता है;
• अन्य प्रोटीनों की तुलना में एल्ब्यूमिन के लिए सल्फोसैलिसिलिक विधि की उच्च संवेदनशीलता (जबकि, जैसा कि ऊपर उल्लेख किया गया है, सामान्य मूत्र के नमूनों में एल्ब्यूमिन कुल मूत्र प्रोटीन के 30% से अधिक नहीं होता है);
• यदि मूत्र के पीएच को क्षारीय पक्ष में स्थानांतरित कर दिया जाता है, तो सल्फोसैलिसिलिक एसिड बेअसर हो जाता है, जो प्रोटीन निर्धारण के परिणामों को कम करके आंकने का कारण भी है;
• अवक्षेपों के अवसादन की दर महत्वपूर्ण भिन्नता के अधीन है - यदि नहीं उच्च सांद्रताप्रोटीन अवक्षेपण धीमा हो जाता है, और प्रतिक्रिया के शीघ्र रुकने से परिणाम को कम करके आंका जाता है;
• अवक्षेपण प्रतिक्रिया की दर अनिवार्य रूप से प्रतिक्रिया मिश्रण की हलचल पर निर्भर करती है। उच्च प्रोटीन सांद्रता में, ट्यूब के जोरदार झटकों से बड़े गुच्छे बन सकते हैं और उनका तेजी से निपटान हो सकता है।

विधि की उपरोक्त सभी विशेषताओं से मूत्र में निर्धारित प्रोटीन सांद्रता का एक महत्वपूर्ण कम आंकलन होता है। कम आंकने की डिग्री एक विशेष मूत्र के नमूने की संरचना पर अत्यधिक निर्भर है। चूंकि सल्फोसैलिसिलिक एसिड विधि कम प्रोटीन सांद्रता देती है, इसलिए 0.03 ग्राम / एल की इस विधि की सामान्य सीमा को भी नैदानिक ​​​​प्रयोगशाला निदान पर विदेशी संदर्भ पुस्तकों में दिए गए आंकड़ों की तुलना में लगभग तीन गुना कम करके आंका जाता है।

पश्चिमी देशों में प्रयोगशालाओं के विशाल बहुमत ने मूत्र में प्रोटीन की एकाग्रता का निर्धारण करने के लिए सल्फोसैलिसिलिक विधि के उपयोग को छोड़ दिया है और इस उद्देश्य के लिए सक्रिय रूप से पाइरोगॉल विधि का उपयोग कर रहे हैं। मूत्र और अन्य जैविक तरल पदार्थों में प्रोटीन की सांद्रता का निर्धारण करने के लिए पाइरोगॉल विधि, पाइरोगॉल रेड डाई कॉम्प्लेक्स और सोडियम मोलिब्डेट कॉम्प्लेक्स के अणुओं के साथ प्रोटीन अणुओं के परस्पर क्रिया द्वारा गठित रंगीन कॉम्प्लेक्स के ऑप्टिकल घनत्व को मापने के फोटोमेट्रिक सिद्धांत पर आधारित है। पाइरोगॉलोल रेड-मोलिब्डेट कॉम्प्लेक्स)।

पाइरोगॉल विधि अधिक सटीक मूत्र प्रोटीन माप क्यों प्रदान करती है? सबसे पहले, प्रतिक्रिया मिश्रण में मूत्र के नमूने के अधिक कमजोर पड़ने के कारण। यदि सल्फोसैलिसिलिक विधि में मूत्र के नमूने / अभिकर्मक का अनुपात 1/3 है, तो पाइरोगॉल विधि में यह विधि प्रकार के आधार पर 1/12.5 से 1/60 तक हो सकता है, जो मूत्र संरचना के प्रभाव को काफी कम कर देता है। माप परिणाम। दूसरे, प्रतिक्रिया एक सक्सेनेट बफर में होती है, जो कि एक स्थिर पीएच पर होती है। और, अंत में, विधि का सिद्धांत, कोई कह सकता है, अधिक "पारदर्शी" है। सोडियम मोलिब्डेट और पाइरोगॉल रेड डाई एक प्रोटीन अणु के साथ एक कॉम्प्लेक्स बनाते हैं। यह इस तथ्य की ओर जाता है कि मुक्त अवस्था में डाई अणु, जो 600 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर प्रकाश को अवशोषित नहीं करते हैं, प्रोटीन के संयोजन में प्रकाश को अवशोषित करते हैं। इस प्रकार, हम प्रत्येक प्रोटीन अणु को डाई के साथ लेबल करते हैं, और इसके परिणामस्वरूप, हम पाते हैं कि 600 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर प्रतिक्रिया मिश्रण के ऑप्टिकल घनत्व में परिवर्तन स्पष्ट रूप से मूत्र में प्रोटीन एकाग्रता से संबंधित है। इसके अलावा, चूंकि विभिन्न प्रोटीन अंशों के लिए पायरोगैलोल लाल की आत्मीयता लगभग समान है, विधि आपको कुल मूत्र प्रोटीन निर्धारित करने की अनुमति देती है। इसलिए, सीमा सामान्य मानमूत्र में प्रोटीन की सांद्रता 0.1 g/l है (यह नैदानिक ​​​​और प्रयोगशाला निदान के लिए सभी आधुनिक पश्चिमी दिशानिर्देशों में इंगित किया गया है, जिसमें "नैदानिक ​​​​गाइड टू लेबोरेटरी टेस्ट", एन। टिट्ज़ द्वारा संपादित) शामिल है। मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए पाइरोगॉलोल और सल्फोसैलिसिलिक विधियों की तुलनात्मक विशेषताएं तालिका 1 में प्रस्तुत की गई हैं।

अंत में, मैं एक बार फिर इस तथ्य पर ध्यान देना चाहूंगा कि जब प्रयोगशाला मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए सल्फोसैलिसिलिक विधि से पाइरोगॉल विधि में स्विच करती है, तो सामान्य मूल्यों की सीमा काफी बढ़ जाती है (0.03 ग्राम / एल से 0.1 ग्राम तक) / एल!)। प्रयोगशाला के कर्मचारियों को निश्चित रूप से इस बारे में चिकित्सकों को सूचित करना चाहिए, क्योंकि। इस स्थिति में, प्रोटीनमेह का निदान तभी किया जा सकता है जब मूत्र में प्रोटीन की मात्रा 0.1 g/l से अधिक हो।

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स्वस्थ व्यक्तियों के दैनिक मूत्र में थोड़ी मात्रा में प्रोटीन पाया जाता है। हालाँकि, इस तरह की कम सांद्रता का पता नहीं लगाया जा सकता है पारंपरिक तरीकेअनुसंधान। बड़ी मात्रा में प्रोटीन का उत्सर्जन, जिस पर मूत्र में प्रोटीन के लिए सामान्य गुणात्मक परीक्षण सकारात्मक हो जाते हैं, प्रोटीनुरिया कहलाता है। वृक्क (सच्चे) और एक्स्ट्रारेनल (झूठे) प्रोटीनमेह हैं। वृक्क प्रोटीनुरिया में, गुर्दे के ग्लोमेरुली द्वारा इसके निस्पंदन में वृद्धि या ट्यूबलर पुनर्अवशोषण में कमी के कारण प्रोटीन रक्त से सीधे मूत्र में प्रवेश करता है।

रेनल (सच) प्रोटीनुरिया

वृक्क (सच्चा) प्रोटीनमेह कार्यात्मक और जैविक है। कार्यात्मक वृक्क प्रोटीनमेह के बीच, निम्न प्रकार सबसे अधिक बार देखे जाते हैं:

नवजात शिशुओं का शारीरिक प्रोटीनमेह, जो जन्म के 4 से 10 वें दिन और समय से पहले के बच्चों में थोड़ी देर बाद गायब हो जाता है;
- ऑर्थोस्टेटिक एल्बुमिनुरिया, जो 7-18 वर्ष की आयु के बच्चों के लिए विशिष्ट है और केवल शरीर की सीधी स्थिति में दिखाई देता है;
- क्षणिक (स्ट्रोक) एल्बुमिनुरिया, जो पाचन तंत्र के विभिन्न रोगों, गंभीर रक्ताल्पता, जलन, चोट या के कारण हो सकता है शारीरिक कारक: अधिक वज़नदार व्यायाम तनाव, अल्प तपावस्था, शक्तिशाली भावनाएं, भरपूर मात्रा में, प्रोटीन युक्त भोजन, आदि।

गुर्दे की बीमारियों (ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस, नेफ्रोसिस, नेफ्रोस्क्लेरोसिस, एमाइलॉयडोसिस, गर्भावस्था में नेफ्रोपैथी) में गुर्दे की ग्लोमेरुली के एंडोथेलियम के क्षतिग्रस्त क्षेत्रों के माध्यम से रक्त से प्रोटीन के पारित होने के कारण कार्बनिक (गुर्दे) प्रोटीनुरिया मनाया जाता है, गुर्दे हेमोडायनामिक्स के विकार (गुर्दे के शिरापरक) उच्च रक्तचाप, हाइपोक्सिया), ग्लोमेरुलर केशिकाओं की दीवारों पर ट्रॉफिक और विषाक्त (औषधीय सहित) प्रभाव।

एक्स्ट्रारेनल (झूठी) प्रोटीनुरिया

एक्स्ट्रारेनल (झूठा) प्रोटीनमेह, जिसमें मूत्र में प्रोटीन का स्रोत ल्यूकोसाइट्स, एरिथ्रोसाइट्स, बैक्टीरिया, यूरोटेलियल कोशिकाओं का मिश्रण होता है। मूत्र संबंधी रोगों (यूरोलिथियासिस, गुर्दा तपेदिक, गुर्दे और मूत्र पथ के ट्यूमर, आदि) में मनाया जाता है।

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए अधिकांश गुणात्मक और मात्रात्मक तरीके मूत्र की मात्रा में या मीडिया (मूत्र और एसिड) के इंटरफेस पर इसके जमाव पर आधारित होते हैं।

मूत्र में बेडका का निर्धारण करने के लिए गुणात्मक तरीकों में, सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ एकीकृत परीक्षण और हेलर रिंग परीक्षण का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

सल्फासैलिसिलिक एसिड के साथ एक मानकीकृत नमूना निम्नानुसार किया जाता है। फ़िल्टर्ड मूत्र के 3 मिलीलीटर को 2 ट्यूबों में डाला जाता है। उनमें से एक में सल्फासैलिसिलिक एसिड के 20% घोल की 6-8 बूंदें मिलाएं। दोनों ट्यूबों की तुलना एक गहरे रंग की पृष्ठभूमि से की जाती है। सल्फासैलिसिलिक एसिड के साथ एक परखनली में मूत्र का मैला होना प्रोटीन की उपस्थिति को इंगित करता है। अध्ययन से पहले, मूत्र की प्रतिक्रिया निर्धारित करना आवश्यक है, और यदि यह क्षारीय है, तो 10% समाधान की 2-3 बूंदों के साथ अम्लीकरण करें। सिरका अम्ल.

गेलर परीक्षण इस तथ्य पर आधारित है कि नाइट्रिक एसिड और मूत्र की सीमा पर मूत्र में प्रोटीन की उपस्थिति में, यह जमा हो जाता है और एक सफेद अंगूठी दिखाई देती है। नाइट्रिक एसिड के 30% घोल के 1-2 मिलीलीटर को एक परखनली में डाला जाता है और ठीक उसी मात्रा में फ़िल्टर किए गए मूत्र को परखनली की दीवार के साथ सावधानी से बिछाया जाता है। दो तरल पदार्थों के बीच अंतरापृष्ठ पर एक सफेद वलय का दिखना मूत्र में प्रोटीन की उपस्थिति को इंगित करता है। यह याद रखना चाहिए कि कभी-कभी बड़ी मात्रा में पेशाब की उपस्थिति में एक सफेद अंगूठी बनती है, लेकिन प्रोटीन की अंगूठी के विपरीत, यह दो तरल पदार्थों के बीच की सीमा से थोड़ा ऊपर दिखाई देती है और गर्म होने पर घुल जाती है [पलेटनेवा एनजी, 1987]।

सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली मात्रात्मक विधियाँ हैं:

1) एकीकृत ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि, जो हेलर रिंग टेस्ट पर आधारित है;
2) सल्फासैलिसिलिक एसिड के अतिरिक्त द्वारा गठित मैलापन द्वारा मूत्र में प्रोटीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए फोटोइलेक्ट्रोक्लोरिमेट्रिक विधि;
3) बाय्यूरेट विधि।

सरलीकृत त्वरित विधि द्वारा मूत्र में प्रोटीन का पता लगाने के लिए संकेतक पेपर का उपयोग करके वर्णमिति विधि द्वारा किया जाता है, जो लचेमा (स्लोवाकिया), अल्बुफन, एम्स (इंग्लैंड), अल्बस्टिक्स, बोहरिंगर (जर्मनी), कॉम्बर्टेस्ट और अन्य द्वारा निर्मित होता है। विधि में शामिल हैं टेट्राब्रोमोफेनॉल ब्लू और साइट्रेट बफर के साथ मूत्र में एक विशेष पेपर स्ट्रिप को डुबोने में, जो मूत्र में प्रोटीन सामग्री के आधार पर अपना रंग पीले से नीले रंग में बदलता है। अस्थायी रूप से, परीक्षण मूत्र में प्रोटीन की सांद्रता एक मानक पैमाने का उपयोग करके निर्धारित की जाती है। पाने के लिए सही परिणामनिम्नलिखित शर्तों का पालन किया जाना चाहिए। मूत्र पीएच 3.0-3.5 की सीमा में होना चाहिए; बहुत अधिक क्षारीय मूत्र (पीएच 6.5) के साथ प्राप्त किया जाएगा गलत सकारात्मक परिणाम, और बहुत अम्लीय मूत्र (पीएच 3.0) के साथ - गलत नकारात्मक।

कागज को निर्देशों में बताए गए से अधिक समय तक परीक्षण किए जा रहे मूत्र के संपर्क में नहीं होना चाहिए, अन्यथा परीक्षण एक झूठी सकारात्मक प्रतिक्रिया देगा। उत्तरार्द्ध तब भी देखा जाता है जब मूत्र में बड़ी मात्रा में बलगम होता है। संवेदनशीलता विभिन्न प्रकारऔर कागज की श्रृंखला अलग हो सकती है, इसलिए इस विधि द्वारा मूत्र में प्रोटीन का मात्रात्मक मूल्यांकन सावधानी के साथ किया जाना चाहिए। संकेतक पेपर का उपयोग करके दैनिक मूत्र में इसकी मात्रा निर्धारित करना असंभव है [पलेटनेवा एन.जी., 1987]

दैनिक प्रोटीनुरिया की परिभाषा

प्रति दिन मूत्र में उत्सर्जित प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करने के कई तरीके हैं। सबसे सरल ब्रांडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि है।

कार्यप्रणाली।अच्छी तरह मिश्रित दैनिक मूत्र का 5-10 मिलीलीटर एक परखनली में डाला जाता है और नाइट्रिक एसिड का 30% घोल सावधानीपूर्वक इसकी दीवारों के साथ मिलाया जाता है। मूत्र में 0.033% (यानी 33 मिलीग्राम प्रति 1 लीटर मूत्र) की मात्रा में प्रोटीन की उपस्थिति में, 2-3 मिनट के बाद एक पतली, लेकिन स्पष्ट रूप से दिखाई देने वाली सफेद अंगूठी दिखाई देती है। कम एकाग्रता पर, परीक्षण नकारात्मक है। मूत्र में उच्च प्रोटीन सामग्री के साथ, इसकी मात्रा आसुत जल के साथ मूत्र के बार-बार कमजोर पड़ने से निर्धारित होती है जब तक कि अंगूठी बनना बंद न हो जाए। अंतिम परखनली में जिसमें वलय अभी भी दिखाई दे रहा है, प्रोटीन सांद्रता 0.033% होगी। मूत्र के कमजोर पड़ने की डिग्री से 0.033 गुणा करके, ग्राम में 1 लीटर बिना पतला मूत्र में प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करें। फिर दैनिक मूत्र में प्रोटीन की मात्रा की गणना सूत्र द्वारा की जाती है:

कश्मीर \u003d (एक्स वी) / 1000

जहाँ K दैनिक मूत्र (g) में प्रोटीन की मात्रा है; x 1 लीटर मूत्र (g) में प्रोटीन की मात्रा है; वी प्रति दिन उत्सर्जित मूत्र की मात्रा (एमएल) है।

आम तौर पर, दिन के दौरान मूत्र में 27 से 150 मिलीग्राम (औसत 40-80 मिलीग्राम) प्रोटीन उत्सर्जित होता है।

यह परीक्षण आपको मूत्र में केवल ठीक प्रोटीन (एल्ब्यूमिन) निर्धारित करने की अनुमति देता है। अधिक सटीक मात्रात्मक विधियाँ (कलरिमेट्रिक केजेल्डहल विधि, आदि) काफी जटिल हैं और इसके लिए विशेष उपकरणों की आवश्यकता होती है।

गुर्दे के प्रोटीनमेह के साथ, न केवल एल्ब्यूमिन, बल्कि अन्य प्रकार के प्रोटीन भी मूत्र में उत्सर्जित होते हैं। एक सामान्य प्रोटीनोग्राम (सीट्ज़ एट अल।, 1953 के अनुसार) में निम्नलिखित प्रतिशत होता है: एल्ब्यूमिन - 20%, α 1-ग्लोब्युलिन - 12%, α 2-ग्लोबुलिन - 17%, γ-ग्लोबुलिन - 43% और β-ग्लोब्युलिन - 8%। एल्ब्यूमिन और ग्लोब्युलिन का अनुपात बदल जाता है विभिन्न रोगगुर्दे, यानी प्रोटीन अंशों के बीच मात्रात्मक अनुपात टूट गया है।

यूरोप्रोटीन को विभाजित करने के लिए सबसे आम तरीके निम्नलिखित हैं: तटस्थ लवण, इलेक्ट्रोफोरेटिक विभाजन, प्रतिरक्षात्मक तरीकों (मैनसिनी के अनुसार रेडियल इम्यूनोडिफ्यूजन प्रतिक्रिया, इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेटिक विश्लेषण, वर्षा इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस), क्रोमैटोग्राफी, जेल निस्पंदन और अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन के साथ नमकीन बनाना।

इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता, आणविक भार परिवर्तनशीलता, यूरोप्रोटीन अणुओं के आकार और आकार के अध्ययन के आधार पर यूरोप्रोटीन विभाजन विधियों की शुरूआत के संबंध में, व्यक्तिगत प्लाज्मा की मंजूरी का अध्ययन करने के लिए, किसी विशेष बीमारी की प्रोटीनुरिया विशेषता के प्रकारों को अलग करना संभव हो गया। प्रोटीन। आज तक, मूत्र में 40 से अधिक प्लाज्मा प्रोटीन की पहचान की गई है, जिसमें सामान्य मूत्र में 31 प्लाज्मा प्रोटीन शामिल हैं।

चयनात्मक प्रोटीनमेह

हाल के वर्षों में, प्रोटीनुरिया चयनात्मकता की अवधारणा सामने आई है। 1955 में, हार्डविक और स्क्वॉयर ने "चयनात्मक" और "गैर-चयनात्मक" प्रोटीनुरिया की अवधारणा तैयार की, यह निर्धारित करते हुए कि मूत्र में प्लाज्मा प्रोटीन का निस्पंदन एक निश्चित पैटर्न का अनुसरण करता है: मूत्र में उत्सर्जित प्रोटीन का आणविक भार जितना अधिक होगा, इसकी निकासी जितनी कम होगी और मूत्र में इसकी सांद्रता उतनी ही कम होगी। अंतिम मूत्र। प्रोटीनुरिया, इस पैटर्न के अनुरूप, गैर-चयनात्मक के विपरीत चयनात्मक है, जिसके लिए व्युत्पन्न पैटर्न की विकृति विशेषता है।

मूत्र में अपेक्षाकृत बड़े आणविक भार वाले प्रोटीन का पता लगाना वृक्क फिल्टर की चयनात्मकता की अनुपस्थिति और इसके स्पष्ट नुकसान को इंगित करता है। इन मामलों में, कोई प्रोटीनमेह की कम चयनात्मकता की बात करता है। इसलिए, वर्तमान में, स्टार्च और पॉलीएक्रिलामाइड जैल में वैद्युतकणसंचलन के तरीकों का उपयोग करके मूत्र के प्रोटीन अंशों का निर्धारण व्यापक हो गया है। इन शोध विधियों के परिणामों के आधार पर कोई भी प्रोटीनमेह की चयनात्मकता का न्याय कर सकता है।

वीएस मखलीना (1975) के अनुसार, 6-7 व्यक्तिगत रक्त प्लाज्मा प्रोटीन (एल्ब्यूमिन, ट्रैनफेरिन, α 2 - मैक्रोग्लोबुलिन, आईजीए, आईजीजी, आईजीएम) की निकासी की तुलना करके प्रोटीनुरिया की चयनात्मकता का निर्धारण सबसे उचित है। मैनसिनी, इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेटिक विश्लेषण और वर्षा इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस के अनुसार रेडियल इम्यूनोडिफ्यूजन की प्रतिक्रिया के विशिष्ट मात्रात्मक प्रतिरक्षाविज्ञानी तरीके। प्रोटीनुरिया चयनात्मकता की डिग्री चयनात्मकता सूचकांक द्वारा निर्धारित की जाती है, जो कि तुलना और संदर्भ प्रोटीन (एल्ब्यूमिन) का अनुपात है।

व्यक्तिगत प्लाज्मा प्रोटीन की निकासी का अध्ययन गुर्दे के ग्लोमेरुली के निस्पंदन तहखाने झिल्ली की स्थिति के बारे में विश्वसनीय जानकारी प्राप्त करने की अनुमति देता है। मूत्र में उत्सर्जित प्रोटीन की प्रकृति और ग्लोमेरुली के तहखाने की झिल्लियों में परिवर्तन के बीच संबंध इतना स्पष्ट और स्थिर है कि यूरोप्रोटीनोग्राम अप्रत्यक्ष रूप से गुर्दे के ग्लोमेरुली में पैथोफिजियोलॉजिकल परिवर्तनों का न्याय कर सकता है। जुर्माना औसत आकारग्लोमेरुलर बेसमेंट मेम्ब्रेन के छिद्र 2.9-4 A ° NM होते हैं, जो 10 4 (मायोग्लोबुलिन, एसिड α 1 - ग्लाइकोप्रोटीन, इम्युनोग्लोबुलिन लाइट चेन, Fc और Fab - IgG टुकड़े, एल्ब्यूमिन और) के आणविक भार वाले प्रोटीन को पास कर सकते हैं। ट्रांसफरिन)।

ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस, नेफ्रोटिक सिंड्रोम के साथ, ग्लोमेरुली के तहखाने की झिल्लियों में छिद्रों का आकार बढ़ जाता है, और इसलिए तहखाने की झिल्ली बड़े आकार और द्रव्यमान (सेरुलोप्लास्मिन, हैप्टोग्लोबिन, आईजीजी, आईजीए, आदि) के प्रोटीन अणुओं के लिए पारगम्य हो जाती है। गुर्दे के ग्लोमेरुली को अत्यधिक नुकसान के साथ, रक्त प्लाज्मा प्रोटीन (α 2-मैक्रोग्लोबुलिन, आईजीएम और β 2-लिपोप्रोटीन) के विशाल अणु मूत्र में दिखाई देते हैं।

मूत्र के प्रोटीन स्पेक्ट्रम का निर्धारण करते हुए, यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है कि नेफ्रॉन के कुछ हिस्से मुख्य रूप से प्रभावित होते हैं। ग्लोमेरुलर बेसमेंट मेम्ब्रेन के प्रमुख घाव वाले ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस के लिए, मूत्र में बड़े और मध्यम आणविक भार प्रोटीन की उपस्थिति विशेषता है। नलिकाओं के बेसल झिल्ली के प्रमुख घाव के साथ पाइलोनफ्राइटिस के लिए, बड़े आणविक प्रोटीन की अनुपस्थिति और मध्यम और निम्न आणविक भार प्रोटीन की बढ़ी हुई मात्रा की उपस्थिति विशेषता है।

β 2 -माइक्रोग्लोबुलिन

प्रसिद्ध प्रोटीन जैसे एल्ब्यूमिन, इम्युनोग्लोबुलिन, लिपोप्रोटीन के अलावा। फाइब्रिनोजेन, ट्रांसफरिन, मूत्र में प्लाज्मा माइक्रोप्रोटीन प्रोटीन होते हैं, जिनमें से β 2-माइक्रोग्लोबुलिन, जिसे 1968 में बर्गर्ड और बर्न द्वारा खोजा गया था, नैदानिक ​​​​रुचि का है। कम आणविक भार (1800 के सापेक्ष आणविक भार) के साथ, यह स्वतंत्र रूप से गुर्दे के ग्लोमेरुली से होकर गुजरता है। और समीपस्थ नलिकाओं में पुन: अवशोषित हो जाता है। यह रक्त और मूत्र में β 2-माइक्रोग्लोबुलिन के मात्रात्मक निर्धारण को ग्लोमेरुलर निस्पंदन और समीपस्थ नलिकाओं में प्रोटीन को पुन: अवशोषित करने के लिए गुर्दे की क्षमता निर्धारित करने की अनुमति देता है।

रक्त प्लाज्मा और मूत्र में इस प्रोटीन की सांद्रता एक मानक किट "फाडे-बेस β 2-मिक्रोएस्ट" (फार्माशिया, स्वीडन) का उपयोग करके रेडियोइम्यूनोसे द्वारा निर्धारित की जाती है। स्वस्थ लोगों के रक्त सीरम में औसतन 1.7 mg / l (0.6 से 3 mg / l तक) होता है, मूत्र में - औसत 81 μg / l (अधिकतम 250 μg / l) β 2-माइक्रोग्लोबुलिन। 1000 एमसीजी/ली से अधिक मूत्र में इसकी अधिकता एक रोग संबंधी घटना है। रक्त में β 2-माइक्रोग्लोबुलिन की सामग्री बिगड़ा ग्लोमेरुलर निस्पंदन के साथ बीमारियों में बढ़ जाती है, विशेष रूप से तीव्र और पुरानी ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस, पॉलीसिस्टिक किडनी रोग, नेफ्रोस्क्लेरोसिस, मधुमेह अपवृक्कता, तीव्र गुर्दे की विफलता में।

मूत्र में β 2-माइक्रोग्लोब्युलिन की एकाग्रता बीमारियों के साथ बढ़ जाती है, साथ में नलिकाओं के पुन: अवशोषण समारोह का उल्लंघन होता है, जिससे मूत्र में इसके उत्सर्जन में 10-50 गुना की वृद्धि होती है, विशेष रूप से, पाइलोनफ्राइटिस, क्रोनिक रीनल के साथ विफलता, प्युलुलेंट नशा, आदि। यह विशेषता है कि पाइलोनफ्राइटिस के विपरीत सिस्टिटिस के साथ, मूत्र में β 2-माइक्रोग्लोबुलिन की एकाग्रता में कोई वृद्धि नहीं होती है, जिसका उपयोग इन रोगों के विभेदक निदान के लिए किया जा सकता है। हालांकि, अध्ययन के परिणामों की व्याख्या करते समय, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि तापमान में कोई भी वृद्धि हमेशा मूत्र में β 2-माइक्रोग्लोबुलिन के उत्सर्जन में वृद्धि के साथ होती है।

औसत रक्त और मूत्र अणु

मध्यम अणु (एसएम), जिसे अन्यथा प्रोटीन विषाक्त पदार्थ कहा जाता है, 500-5000 डाल्टन के आणविक भार वाले पदार्थ होते हैं। भौतिक संरचनाउन्हें अज्ञात है। एसएम की संरचना में कम से कम 30 पेप्टाइड्स शामिल हैं: ऑक्सीटोसिन, वैसोप्रेसिन, एंजियोटेंसिन, ग्लूकागन, एड्रेनोकोर्टिकोट्रोपिक हार्मोन (एसीटीएच), आदि। एसएम का अत्यधिक संचय गुर्दे के कार्य में कमी और बड़ी मात्रा में विकृत प्रोटीन और उनके मेटाबोलाइट्स के साथ मनाया जाता है। रक्त। उनके पास विभिन्न प्रकार के जैविक प्रभाव होते हैं और न्यूरोटॉक्सिक होते हैं, माध्यमिक इम्यूनोसप्रेशन, माध्यमिक एनीमिया का कारण बनते हैं, प्रोटीन बायोसिंथेसिस और एरिथ्रोपोएसिस को रोकते हैं, कई एंजाइमों की गतिविधि को रोकते हैं, और सूजन प्रक्रिया के चरणों को बाधित करते हैं।

रक्त और मूत्र में एसएम का स्तर एक स्क्रीनिंग टेस्ट द्वारा निर्धारित किया जाता है, साथ ही DI-8B स्पेक्ट्रोफोटोमीटर पर 254 और 280 मिमी के तरंग दैर्ध्य पर पराबैंगनी क्षेत्र में स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा, साथ ही तरंग दैर्ध्य में कंप्यूटर प्रसंस्करण के साथ गतिशील स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा निर्धारित किया जाता है। एक ही बेकमैन स्पेक्ट्रोमीटर पर 220-335 एनएम की सीमा। रक्त में एसएम की सामग्री को आदर्श के रूप में लिया जाता है, जो 0.24 ± 0.02 अरब के बराबर होता है। इकाइयाँ, और मूत्र में - 0.312 ± 0.09 अरब। इकाइयों
शरीर के सामान्य अपशिष्ट उत्पाद होने के कारण, उन्हें सामान्य रूप से रात में ग्लोमेरुलर निस्पंदन द्वारा 0.5% से हटा दिया जाता है; उनमें से 5% का निपटान दूसरे तरीके से किया जाता है। सभी एसएम अंश ट्यूबलर पुनर्अवशोषण से गुजरते हैं।

गैर-प्लाज्मा (ऊतक) यूरोप्रोटीन

रक्त प्लाज्मा प्रोटीन के अलावा, मूत्र में गैर-प्लाज्मा (ऊतक) प्रोटीन हो सकते हैं। बक्सबाम और फ्रैंकलिन (1970) के अनुसार, गैर-प्लाज्मा प्रोटीन सभी मूत्र बायोकोलॉइड के लगभग 2/3 और पैथोलॉजिकल प्रोटीनुरिया में यूरोप्रोटीन का एक महत्वपूर्ण अनुपात है। ऊतक प्रोटीन सीधे गुर्दे या मूत्र पथ से जुड़े अंगों से मूत्र में प्रवेश करते हैं, या अन्य अंगों और ऊतकों से रक्त में प्रवेश करते हैं, और इससे गुर्दे के ग्लोमेरुली के तहखाने झिल्ली के माध्यम से मूत्र में प्रवेश करते हैं। बाद के मामले में, मूत्र में ऊतक प्रोटीन का उत्सर्जन विभिन्न आणविक भार के प्लाज्मा प्रोटीन के उत्सर्जन के समान होता है। गैर-प्लाज्मा यूरोप्रोटीन की संरचना अत्यंत विविध है। इनमें ग्लाइकोप्रोटीन, हार्मोन, एंटीजन, एंजाइम (एंजाइम) हैं।

मूत्र में ऊतक प्रोटीन का पता प्रोटीन रसायन विज्ञान के पारंपरिक तरीकों (अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन, जेल क्रोमैटोग्राफी, विभिन्न प्रकार के वैद्युतकणसंचलन), एंजाइमों और हार्मोन के लिए विशिष्ट प्रतिक्रियाओं और प्रतिरक्षाविज्ञानी विधियों का उपयोग करके लगाया जाता है। उत्तरार्द्ध भी मूत्र में गैर-प्लाज्मा यूरोप्रोटीन की एकाग्रता को निर्धारित करना संभव बनाता है और, कुछ मामलों में, ऊतक संरचनाओं को निर्धारित करने के लिए जो इसकी उपस्थिति का स्रोत बन गए हैं। मूत्र में गैर-प्लाज्मा प्रोटीन का पता लगाने की मुख्य विधि मानव मूत्र के साथ प्रयोगात्मक जानवरों के टीकाकरण द्वारा प्राप्त एंटीसेरम के साथ इम्यूनोडिफ्यूजन विश्लेषण है और बाद में रक्त प्लाज्मा प्रोटीन द्वारा समाप्त (adsorbed) है।

रक्त और मूत्र में एंजाइमों की जांच

पैथोलॉजिकल प्रक्रिया में, कोशिकाओं की महत्वपूर्ण गतिविधि में गहरा गड़बड़ी देखी जाती है, साथ ही शरीर के तरल मीडिया में इंट्रासेल्युलर एंजाइमों की रिहाई होती है। एंजाइमोडायग्नोस्टिक्स प्रभावित अंगों की कोशिकाओं से निकलने वाले कई एंजाइमों के निर्धारण पर आधारित है, न कि रक्त सीरम की विशेषता पर।
मानव और पशु नेफ्रॉन के अध्ययन से पता चला है कि इसके अलग-अलग हिस्सों में एक उच्च एंजाइमेटिक भेदभाव होता है, जो प्रत्येक विभाग द्वारा किए जाने वाले कार्यों से निकटता से संबंधित होता है। गुर्दे के ग्लोमेरुली में अपेक्षाकृत होते हैं एक बड़ी संख्या कीविभिन्न एंजाइम।

वृक्क नलिकाओं की कोशिकाओं, विशेष रूप से समीपस्थ वाले, में होते हैं अधिकतम राशिएंजाइम। उनकी उच्च गतिविधि हेनले, प्रत्यक्ष नलिकाओं और एकत्रित नलिकाओं के लूप में देखी जाती है। विभिन्न किडनी रोगों में अलग-अलग एंजाइमों की गतिविधि में परिवर्तन प्रक्रिया की प्रकृति, गंभीरता और स्थानीयकरण पर निर्भर करता है। वे गुर्दे में रूपात्मक परिवर्तनों की उपस्थिति से पहले देखे जाते हैं। चूंकि विभिन्न एंजाइमों की सामग्री नेफ्रॉन में स्पष्ट रूप से स्थानीयकृत होती है, मूत्र में एक या दूसरे एंजाइम का निर्धारण सामयिक निदान में योगदान कर सकता है। रोग प्रक्रियागुर्दे (ग्लोमेरुली, नलिकाएं, कॉर्टिकल या मज्जा) में, गुर्दे की बीमारियों का विभेदक निदान और वृक्क पैरेन्काइमा में प्रक्रिया की गतिशीलता (क्षीणन और तेज) का निर्धारण।

जननांग प्रणाली के रोगों के विभेदक निदान के लिए, निम्नलिखित एंजाइमों के रक्त और मूत्र में गतिविधि के निर्धारण का उपयोग किया जाता है: लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज (LDH), ल्यूसीन एमिनोपेप्टिडेज़ (LAP), एसिड फॉस्फेट (AP), क्षारीय फॉस्फेट (AP) , β-glucuronidase, glutamine-oxaloacetic transaminase (GST), aldolase, transamidinase, आदि। रक्त सीरम और मूत्र में एंजाइमों की गतिविधि जैव रासायनिक, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक, क्रोमैटोग्राफिक, फ्लोरीमेट्रिक और केमिलुमिनसेंट विधियों का उपयोग करके निर्धारित की जाती है।

गुर्दे की बीमारी में एंजाइमीमिया एंजाइममिया की तुलना में अधिक स्पष्ट और नियमित होता है। यह विशेष रूप से रोग के तीव्र चरण में उच्चारित किया जाता है ( गुर्दे की तीव्र और अचानक संक्रमण, आघात, ट्यूमर क्षय, गुर्दा रोधगलन, आदि)। इन रोगों में, ट्रांसमिडीनेस, एलडीएच, क्षारीय फॉस्फेटस और सीपी, हाइलूरोनिडेस, एलएपी, साथ ही जीएसटी, कैटेलेज जैसे गैर-विशिष्ट एंजाइमों की एक उच्च गतिविधि पाई जाती है [पॉलीएंत्सेवा एलआर, 1972]।

मूत्र में एलएपी और एएलपी का पता लगाने पर नेफ्रॉन में एंजाइमों का चयनात्मक स्थानीयकरण हमें तीव्र और के बारे में विश्वास के साथ बोलने की अनुमति देता है जीर्ण रोगगुर्दा (तीव्र) किडनी खराब, गुर्दे ट्यूबलर परिगलन, जीर्ण ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस) [शेमेटोव वी.डी., 1968]। ए.ए. करेलिन और एल.आर. पोलीएंत्सेवा (1965) के अनुसार, ट्रांसएमिडीनेस केवल दो अंगों में पाया जाता है - गुर्दे और अग्न्याशय। यह गुर्दे का माइटोकॉन्ड्रियल एंजाइम है और आमतौर पर रक्त और मूत्र में अनुपस्थित होता है। गुर्दे के विभिन्न रोगों के साथ, रक्त और मूत्र में ट्रांसमिडीनेस दिखाई देता है, और अग्न्याशय को नुकसान के साथ - केवल रक्त में।

ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस और पाइलोनफ्राइटिस क्रोटकिव्स्की (1963) के निदान में अंतर परीक्षण मूत्र में क्षारीय फॉस्फेट की गतिविधि पर विचार करता है, जिसकी वृद्धि तीव्र और पुरानी नेफ्रैटिस की तुलना में पाइलोनफ्राइटिस और मधुमेह ग्लोमेरुलोस्केलेरोसिस के लिए अधिक विशिष्ट है। एमिलाजेमिया की गतिशीलता में वृद्धि के साथ-साथ एमाइलसुरिया में कमी नेफ्रोस्क्लेरोसिस और गुर्दे की झुर्रियों का संकेत दे सकती है, एलएपी सबसे महत्वपूर्ण है रोग संबंधी परिवर्तनगुर्दे के ग्लोमेरुली और घुमावदार नलिकाओं में, क्योंकि नेफ्रॉन के इन हिस्सों में इसकी सामग्री अधिक होती है [शेपोटिनोव्स्की वी.पी. एट अल।, 1980]। ल्यूपस नेफ्रैटिस के निदान के लिए, β-ग्लुकुरोनिडेस और सीएफ के निर्धारण की सिफारिश की जाती है [प्रिवलेंको एम.एन. एट अल।, 1974]।

गुर्दे की बीमारी के निदान में एंजाइमुरिया की भूमिका का मूल्यांकन करते समय, निम्नलिखित प्रावधानों को ध्यान में रखा जाना चाहिए। एंजाइम, उनकी प्रकृति प्रोटीन होने के कारण, एक छोटे आणविक भार के साथ, तथाकथित शारीरिक एंजाइम का निर्धारण करते हुए, बरकरार ग्लोमेरुली से गुजर सकते हैं। इन एंजाइमों में α-amylase (सापेक्ष आणविक भार 45,000) और uropepsin (सापेक्ष आणविक भार 38,000) मूत्र में लगातार पाए जाते हैं।

स्वस्थ व्यक्तियों के मूत्र में निम्न-आणविक एंजाइमों के साथ, अन्य एंजाइम भी छोटी सांद्रता में पाए जा सकते हैं: एलडीएच, एस्पार्टेट और एलेनिन एमिनोट्रांस्फरेज, क्षारीय फॉस्फेट और सीपी, माल्टेज़, एल्डोलेज़, लाइपेस, विभिन्न प्रोटीज़ और पेप्टिडेज़, सल्फेट, कैटलस, राइबोन्यूक्लिएज, पेरोक्साइड।

रिक्टरिच (1958) और हेस (1962) के अनुसार, 70,000-100,000 से अधिक के सापेक्ष आणविक भार वाले उच्च-आणविक एंजाइम मूत्र में तभी प्रवेश कर सकते हैं, जब ग्लोमेरुलर फिल्टर की पारगम्यता बिगड़ा हो। मूत्र में एंजाइमों की सामान्य सामग्री मूत्रवाहिनी रोड़ा के साथ गुर्दे में रोग प्रक्रिया को बाहर करने की अनुमति नहीं देती है। एपिमुरिया के साथ, एंजाइम न केवल गुर्दे से, बल्कि अन्य पैरेन्काइमल अंगों, मूत्र पथ के श्लेष्म झिल्ली की कोशिकाओं, प्रोस्टेट ग्रंथि के साथ-साथ हेमट्यूरिया या ल्यूकोसाइटुरिया के साथ मूत्र के गठित तत्वों से भी जारी किए जा सकते हैं।

अधिकांश एंजाइम गुर्दे के लिए विशिष्ट नहीं होते हैं, इसलिए यह निर्धारित करना मुश्किल है कि स्वस्थ और बीमार लोगों के मूत्र में पाए जाने वाले एंजाइम कहां से आते हैं। हालांकि, गुर्दे की क्षति में गैर-विशिष्ट एंजाइमों के लिए भी एंजाइम्यूरिया की डिग्री सामान्य से अधिक है या अन्य अंगों के रोगों में देखी गई है। कई एंजाइमों, विशेष रूप से अंग-विशिष्ट वाले, जैसे ट्रांसएमिनेस की गतिशीलता के व्यापक अध्ययन द्वारा अधिक मूल्यवान जानकारी प्रदान की जा सकती है।

मूत्र में एंजाइम के गुर्दे की उत्पत्ति के मुद्दे को हल करने में, आइसोनिजाइम का अध्ययन अध्ययन के तहत अंग के विशिष्ट अंशों की पहचान करने में मदद करता है। Isoenzymes एंजाइम होते हैं जो क्रिया में आइसोजेनिक होते हैं (उसी प्रतिक्रिया को उत्प्रेरित करते हैं), लेकिन रासायनिक संरचना और अन्य गुणों में विषम होते हैं। प्रत्येक ऊतक का अपना आइसोएंजाइम स्पेक्ट्रम होता है। आइसोनाइजेस को अलग करने के लिए मूल्यवान तरीके स्टार्च और पॉलीएक्रिलामाइड जैल में वैद्युतकणसंचलन हैं, साथ ही आयन-एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी भी हैं।

बेंस जोन्स प्रोटीन

मल्टीपल मायलोमा और वाल्डेनस्ट्रॉम के मैक्रोग्लोबुलिनमिया के साथ, मूत्र में बेंस-जोन्स प्रोटीन पाया जाता है। मूत्र में इस प्रोटीन का पता लगाने की विधि थर्मोप्रेजर्वेशन प्रतिक्रिया पर आधारित है। पहले इस्तेमाल किए गए तरीके जो इस प्रोटीन के 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर विघटन का मूल्यांकन करते हैं और बाद में ठंडा होने पर पुन: वर्षा अविश्वसनीय हैं, क्योंकि सभी बेंस-जोन्स प्रोटीन निकायों में उपयुक्त गुण नहीं होते हैं।

40-60 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर इसकी वर्षा से इस पैराप्रोटीन का अधिक विश्वसनीय पता लगाना। हालांकि, इन परिस्थितियों में भी, बहुत अम्लीय (पीएच .) में वर्षा नहीं हो सकती है< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6,5) मूत्र, कम ओपीएम और कम बेंस-जोन्स प्रोटीन एकाग्रता के साथ। इसकी वर्षा के लिए सबसे अनुकूल परिस्थितियां पटनाम द्वारा प्रस्तावित विधि द्वारा प्रदान की जाती हैं: फ़िल्टर किए गए मूत्र के 4 मिलीलीटर को 2 एम एसीटेट बफर पीएच 4.9 के 1 मिलीलीटर के साथ मिश्रित किया जाता है और 56 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पानी के स्नान में 15 मिनट के लिए गरम किया जाता है। बेंस-जोन्स प्रोटीन की उपस्थिति में, पहले 2 मिनट के दौरान एक स्पष्ट अवक्षेप दिखाई देता है।

बेंस-जोन्स प्रोटीन की सांद्रता 3 g / l से कम होने पर, परीक्षण नकारात्मक हो सकता है, लेकिन व्यवहार में यह अत्यंत दुर्लभ है, क्योंकि मूत्र में इसकी सांद्रता आमतौर पर अधिक महत्वपूर्ण होती है। उबालने के नमूनों पर पूरी तरह भरोसा नहीं किया जा सकता है। पूरी निश्चितता के साथ, इम्युनोग्लोबुलिन की भारी और हल्की श्रृंखलाओं के खिलाफ विशिष्ट सीरा का उपयोग करके इम्यूनो-इलेक्ट्रोफोरेटिक विधि द्वारा मूत्र में इसका पता लगाया जा सकता है।

मूत्र में प्रोटीन: निर्धारण के तरीके

पैथोलॉजिकल प्रोटीनुरिया गुर्दे और मूत्र पथ के रोगों के सबसे महत्वपूर्ण और निरंतर लक्षणों में से एक है। मूत्र में प्रोटीन की मात्रा का निर्धारण मूत्र के अध्ययन का एक अनिवार्य और महत्वपूर्ण तत्व है। प्रोटीनमेह का पता लगाना और मात्रा का ठहराव न केवल कई प्राथमिक और माध्यमिक गुर्दे की बीमारियों के निदान में महत्वपूर्ण है, बल्कि गतिकी में प्रोटीनमेह की गंभीरता में परिवर्तन का आकलन रोग प्रक्रिया के पाठ्यक्रम और उपचार की प्रभावशीलता के बारे में जानकारी देता है। मूत्र में प्रोटीन का पता लगाना, यहां तक ​​कि थोड़ी मात्रा में भी, के संबंध में खतरनाक होना चाहिए संभावित रोगगुर्दे या मूत्र पथ और पुन: विश्लेषण की आवश्यकता है। विशेष रूप से नोट मूत्र के अध्ययन की संवेदनहीनता है और, विशेष रूप से, सभी को देखे बिना मूत्र प्रोटीन का निर्धारण संग्रह नियम.

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के सभी तरीकों में विभाजित किया जा सकता है:

गुणवत्ता,

अर्ध-मात्रात्मक,

मात्रात्मक।

गुणात्मक तरीके

हर चीज़ मूत्र में प्रोटीन के लिए गुणात्मक परीक्षण विभिन्न भौतिक और रासायनिक कारकों के प्रभाव में प्रोटीन को विकृत करने की क्षमता के आधार पर। परीक्षण मूत्र के नमूने में प्रोटीन की उपस्थिति में, या तो मैलापन या flocculation प्रकट होता है।

जमावट प्रतिक्रिया के आधार पर मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए शर्तें:

मूत्र अम्लीय होना चाहिए। क्षारीय मूत्र को एसिटिक एसिड (5 - 10%) की कुछ (2 - 3) बूंदों के साथ अम्लीकृत किया जाता है।

पेशाब साफ होना चाहिए। एक पेपर फिल्टर के माध्यम से मैलापन हटा दिया जाता है। यदि धुंध बनी रहती है, तो तालक या जले हुए मैग्नेशिया (लगभग 1 चम्मच प्रति 100 मिलीलीटर मूत्र) मिलाएं, हिलाएं और छान लें।

एक गुणात्मक नमूना दो टेस्ट ट्यूबों में किया जाना चाहिए, उनमें से एक नियंत्रण एक है।

मैलापन की तलाश संचरित प्रकाश में एक काली पृष्ठभूमि पर होनी चाहिए।

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए गुणात्मक विधियों में शामिल हैं:

हेलर रिंग टेस्ट,

15-20% सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ नमूना,

उबलते परीक्षण, और अन्य।

कई अध्ययनों से पता चला है कि मूत्र में प्रोटीन के गुणात्मक निर्धारण के लिए बड़ी संख्या में ज्ञात विधियों में से कोई भी विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम प्रदान नहीं करता है। इसके बावजूद, रूस में अधिकांश डीएलटी में, इन विधियों का व्यापक रूप से स्क्रीनिंग के रूप में उपयोग किया जाता है - मूत्र में सकारात्मक गुणात्मक प्रतिक्रिया के साथ, प्रोटीन का आगे मात्रात्मक निर्धारण किया जाता है। गुणात्मक प्रतिक्रियाओं में से, गेलर परीक्षण और सल्फ़ोसैलिसिलिक एसिड परीक्षण अधिक सामान्यतः उपयोग किए जाते हैं, लेकिन सल्फ़ोसैलिसिलिक एसिड परीक्षण को आमतौर पर रोग संबंधी प्रोटीनमेह का पता लगाने के लिए सबसे उपयुक्त माना जाता है। क्वथनांक परीक्षण वर्तमान में इसकी जटिलता और अवधि के कारण व्यावहारिक रूप से उपयोग नहीं किया जाता है।

अर्ध-मात्रात्मक तरीके

प्रति अर्ध-मात्रात्मक तरीके संबंधित:

ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि,

डायग्नोस्टिक टेस्ट स्ट्रिप्स का उपयोग करके मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण।

ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि गेलर रिंग परीक्षण पर आधारित है, इसलिए, इस पद्धति के साथ, गेलर परीक्षण के समान ही त्रुटियां देखी जाती हैं।

वर्तमान में, मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए डायग्नोस्टिक स्ट्रिप्स का तेजी से उपयोग किया जाता है। साइट्रेट बफर में ब्रोमोफेनॉल ब्लू डाई का उपयोग अक्सर एक पट्टी पर मूत्र में प्रोटीन के अर्ध-मात्रात्मक निर्धारण के लिए एक संकेतक के रूप में किया जाता है। मूत्र में प्रोटीन की मात्रा नीले-हरे रंग की तीव्रता से आंकी जाती है जो मूत्र के साथ प्रतिक्रिया क्षेत्र के संपर्क के बाद विकसित होती है। परिणाम का मूल्यांकन नेत्रहीन या मूत्र विश्लेषक का उपयोग करके किया जाता है। शुष्क रसायन विज्ञान विधियों (सादगी, विश्लेषण की गति) की महान लोकप्रियता और स्पष्ट लाभों के बावजूद, सामान्य रूप से यूरिनलिसिस के ये तरीके और विशेष रूप से प्रोटीन निर्धारण गंभीर कमियों के बिना नहीं हैं। उनमें से एक, नैदानिक ​​जानकारी के विरूपण के लिए अग्रणी, अन्य प्रोटीन की तुलना में ब्रोमोफेनॉल ब्लू इंडिकेटर की एल्ब्यूमिन की अधिक संवेदनशीलता है। इस संबंध में, परीक्षण स्ट्रिप्स मुख्य रूप से चयनात्मक ग्लोमेरुलर प्रोटीनुरिया का पता लगाने के लिए अनुकूलित होते हैं, जब लगभग सभी मूत्र प्रोटीन एल्ब्यूमिन द्वारा दर्शाए जाते हैं। परिवर्तनों की प्रगति और चयनात्मक ग्लोमेरुलर प्रोटीनुरिया के गैर-चयनात्मक (मूत्र में ग्लोब्युलिन की उपस्थिति) के संक्रमण के साथ, प्रोटीन निर्धारण के परिणामों को वास्तविक मूल्यों की तुलना में कम करके आंका जाता है। यह तथ्य गतिशीलता में गुर्दे (ग्लोमेरुलर फिल्टर) की स्थिति का आकलन करने के लिए मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए इस पद्धति का उपयोग करना असंभव बनाता है। ट्यूबलर प्रोटीनुरिया के साथ, प्रोटीन निर्धारण के परिणामों को भी कम करके आंका जाता है। डिपस्टिक के साथ प्रोटीन परीक्षण प्रोटीनूरिया के निम्न स्तर का एक विश्वसनीय संकेतक नहीं है (वर्तमान में उपलब्ध अधिकांश डिपस्टिक 0.15 ग्राम/ली से कम सांद्रता में मूत्र में प्रोटीन का पता लगाने में सक्षम नहीं हैं)। स्ट्रिप्स पर प्रोटीन निर्धारण के नकारात्मक परिणाम मूत्र में ग्लोब्युलिन, हीमोग्लोबिन, यूरोमुकोइड, बेंस-जोन्स प्रोटीन और अन्य पैराप्रोटीन की उपस्थिति को बाहर नहीं करते हैं।

ग्लाइकोप्रोटीन की एक उच्च सामग्री के साथ बलगम के गुच्छे (उदाहरण के लिए, मूत्र पथ में भड़काऊ प्रक्रियाओं में, पायरिया, बैक्टीरियूरिया) पट्टी के संकेतक क्षेत्र पर बस सकते हैं और झूठे सकारात्मक परिणाम दे सकते हैं। झूठे सकारात्मक परिणाम भी उच्च सांद्रता से जुड़े हो सकते हैं यूरिया. खराब रोशनी और खराब रंग धारणा के कारण गलत परिणाम हो सकते हैं।

इस संबंध में, डायग्नोस्टिक स्ट्रिप्स का उपयोग स्क्रीनिंग प्रक्रियाओं तक सीमित होना चाहिए, और उनकी मदद से प्राप्त परिणामों को केवल सांकेतिक माना जाना चाहिए।

मात्रात्मक विधियां

सही मूत्र में प्रोटीन का मात्रात्मक निर्धारण कुछ मामलों में यह एक मुश्किल काम साबित होता है। इसके समाधान की कठिनाइयाँ निम्नलिखित कारकों द्वारा निर्धारित की जाती हैं:

कई यौगिकों के मूत्र में उपस्थिति जो रासायनिक प्रतिक्रियाओं के दौरान हस्तक्षेप कर सकती है;

विभिन्न रोगों में मूत्र प्रोटीन की सामग्री और संरचना में महत्वपूर्ण उतार-चढ़ाव, जिससे पर्याप्त अंशांकन सामग्री चुनना मुश्किल हो जाता है।

नैदानिक ​​​​प्रयोगशालाओं में, मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए तथाकथित "नियमित" विधियों का मुख्य रूप से उपयोग किया जाता है, लेकिन वे हमेशा संतोषजनक परिणाम प्रदान नहीं करते हैं।

प्रयोगशाला में काम कर रहे एक विश्लेषक के दृष्टिकोण से, मूत्र में प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करने के लिए डिज़ाइन की गई एक विधि को निम्नलिखित आवश्यकताओं को पूरा करना चाहिए:

रासायनिक प्रतिक्रिया के दौरान गठित कॉम्प्लेक्स के अवशोषण और नमूने में प्रोटीन सामग्री के बीच एक व्यापक संबंध है, जो अनुसंधान के लिए नमूना तैयार करते समय अतिरिक्त संचालन से बचने की अनुमति देगा;

सरल होना चाहिए, कलाकार की उच्च योग्यता की आवश्यकता नहीं है, कम संख्या में संचालन के साथ किया जाना चाहिए;

परीक्षण सामग्री के छोटे संस्करणों का उपयोग करते समय उच्च संवेदनशीलता, विश्लेषणात्मक विश्वसनीयता है;

विभिन्न कारकों (नमूने की संरचना में उतार-चढ़ाव, दवाओं की उपस्थिति, आदि) के लिए प्रतिरोधी होना;

एक स्वीकार्य लागत है;

स्वतःविश्लेषकों के लिए आसानी से अनुकूलनीय हो;

दृढ़ संकल्प के परिणाम पर निर्भर नहीं होना चाहिए प्रोटीन संरचनामूत्र के नमूने का परीक्षण करें।

मूत्र में प्रोटीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए वर्तमान में ज्ञात विधियों में से कोई भी पूरी तरह से "स्वर्ण मानक" होने का दावा नहीं कर सकता है।

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए मात्रात्मक तरीकों को टर्बिडीमेट्रिक और वर्णमिति में विभाजित किया जा सकता है।

टर्बिडिमेट्रिक तरीके

टर्बिडिमेट्रिक विधियों में शामिल हैं:

सल्फोसैलिसिलिक एसिड (एसएसके) के साथ प्रोटीन का निर्धारण,

प्रोटीन का निर्धारण ट्राइक्लोरोएसिटिक एसिड(गुरु),

बेंजेथोनियम क्लोराइड के साथ प्रोटीन का निर्धारण।

टर्बिडिमेट्रिक विधियां अवक्षेपण एजेंटों के प्रभाव में निलंबित कणों के निलंबन के गठन के कारण मूत्र प्रोटीन की घुलनशीलता में कमी पर आधारित हैं। परीक्षण नमूने में प्रोटीन सामग्री को या तो प्रकाश के प्रकीर्णन की तीव्रता से, प्रकाश-प्रकीर्णन कणों की संख्या (विश्लेषण की नेफेलोमेट्रिक विधि) द्वारा निर्धारित किया जाता है, या परिणामी निलंबन (विश्लेषण की टर्बिडिमेट्रिक विधि) द्वारा प्रकाश प्रवाह के कमजोर होने से आंका जाता है। )

मूत्र में प्रोटीन का पता लगाने के लिए वर्षा के तरीकों में प्रकाश के बिखरने की मात्रा कई कारकों पर निर्भर करती है: अभिकर्मकों की मिश्रण दर, प्रतिक्रिया मिश्रण का तापमान, माध्यम का पीएच मान, विदेशी यौगिकों की उपस्थिति, फोटोमेट्रिक विधियाँ। प्रतिक्रिया की स्थिति का सावधानीपूर्वक अवलोकन एक स्थिर कण आकार के साथ एक स्थिर निलंबन के गठन और अपेक्षाकृत प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम प्राप्त करने में योगदान देता है।

कुछ दवाएं मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए टर्बिडीमेट्रिक विधियों के परिणामों में हस्तक्षेप करती हैं, जिससे तथाकथित "गलत सकारात्मक" या "गलत नकारात्मक" परिणाम सामने आते हैं। इनमें कुछ एंटीबायोटिक्स (बेंज़िलपेनिसिलिन, क्लोक्सासिलिन, आदि), रेडियोपैक आयोडीन युक्त पदार्थ, सल्फ़ानिलमाइड तैयारी शामिल हैं।

टर्बिडिमेट्रिक विधियों को मानकीकृत करना मुश्किल है और अक्सर गलत परिणाम देते हैं, लेकिन इसके बावजूद, वर्तमान में कम लागत और अभिकर्मकों की उपलब्धता के कारण प्रयोगशालाओं में उनका व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। रूस में सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ प्रोटीन का निर्धारण है।

वर्णमिति तरीके

प्रोटीन की विशिष्ट रंग प्रतिक्रियाओं के आधार पर, कुल मूत्र प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए सबसे संवेदनशील और सटीक वर्णमिति विधियां हैं।

इसमे शामिल है:

बाय्यूरेट प्रतिक्रिया,

लोरी विधि,

प्रोटीन के साथ कॉम्प्लेक्स बनाने के लिए विभिन्न रंगों की क्षमता पर आधारित तरीके:

पोंसेउ एस (पोंसेउ एस),

Coomassie Brilliant Blue (Coomassie Brilliant Blue)

पायरोगैलोल लाल (पाइरोगॉल लाल)।

कलाकार के दृष्टिकोण से, अनुसंधान के एक बड़े प्रवाह के साथ प्रयोगशाला के दैनिक कार्य में, बड़ी संख्या में संचालन के कारण ब्यूरेट विधि असुविधाजनक है। इसी समय, विधि को उच्च विश्लेषणात्मक विश्वसनीयता की विशेषता है, सांद्रता की एक विस्तृत श्रृंखला में प्रोटीन के निर्धारण और तुलनीय संवेदनशीलता के साथ एल्ब्यूमिन, ग्लोब्युलिन और पैराप्रोटीन का पता लगाने की अनुमति देता है, जिसके परिणामस्वरूप बायोरेट विधि को एक के रूप में माना जाता है। मूत्र में प्रोटीन का पता लगाने के लिए अन्य विश्लेषणात्मक तरीकों की तुलना के लिए संदर्भ और सिफारिश की जाती है। मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए बायोरेट विधि अधिमानतः नेफ्रोलॉजिकल विभागों की सेवा करने वाली प्रयोगशालाओं में की जाती है और उन मामलों में उपयोग की जाती है जहां अन्य तरीकों का उपयोग करके निर्धारण के परिणाम संदिग्ध होते हैं, साथ ही नेफ्रोलॉजिकल रोगियों में दैनिक प्रोटीन हानि की मात्रा निर्धारित करने के लिए भी उपयोग किया जाता है।

लोरी विधि, जिसमें बायोरेट विधि की तुलना में अधिक संवेदनशीलता होती है, प्रोटीन अणु में अमीनो एसिड टायरोसिन और ट्रिप्टोफैन के लिए बायोरेट प्रतिक्रिया और फोलिन प्रतिक्रिया को जोड़ती है। इसकी उच्च संवेदनशीलता के बावजूद, यह विधि हमेशा मूत्र में प्रोटीन सामग्री के निर्धारण में विश्वसनीय परिणाम प्रदान नहीं करती है। इसका कारण मूत्र के गैर-प्रोटीन घटकों (अक्सर अमीनो एसिड, यूरिक एसिड, कार्बोहाइड्रेट) के साथ फोलिन के अभिकर्मक की गैर-विशिष्ट बातचीत है। डायलिसिस या प्रोटीन वर्षा द्वारा इन और अन्य मूत्र घटकों को अलग करने से मूत्र में प्रोटीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए इस पद्धति का सफलतापूर्वक उपयोग किया जा सकता है। कुछ दवाएं - सैलिसिलेट्स, क्लोरप्रोमाज़िन, टेट्रासाइक्लिन इस पद्धति को प्रभावित कर सकती हैं और अध्ययन के परिणामों को विकृत कर सकती हैं।

पर्याप्त संवेदनशीलता, अच्छी प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता, और डाई बाइंडिंग द्वारा प्रोटीन निर्धारण में आसानी इन तरीकों को आशाजनक बनाती है, लेकिन अभिकर्मकों की उच्च लागत प्रयोगशालाओं में उनके व्यापक उपयोग में बाधा डालती है। वर्तमान में, रूस में पायरोगैलोल लाल के साथ विधि अधिक व्यापक होती जा रही है।

प्रोटीनमेह के स्तर की जांच करते समय, यह ध्यान में रखना चाहिए कि प्रोटीनमेह का निर्धारण करने के विभिन्न तरीकों में कई मूत्र प्रोटीनों के लिए अलग संवेदनशीलता और विशिष्टता होती है।

अनुभवजन्य आंकड़ों के आधार पर, प्रोटीन को दो अलग-अलग तरीकों से निर्धारित करने और गणना करने की सिफारिश की जाती है वास्तविक मूल्यउपरोक्त सूत्रों में से एक के अनुसार: प्रोटीनुरिया = 0.4799 बी + 0.5230 एल; प्रोटीनुरिया = 1.5484 बी - 0.4825 एस; प्रोटीनुरिया = 0.2167 एस + 0.7579 एल; प्रोटीनुरिया = 1.0748 पी - 0.0986 बी; प्रोटीनुरिया = 1.0104 पी - 0.0289 एस; प्रोटीनुरिया = 0.8959 पी + 0.0845 एल; जहां B Coomassie G-250 के साथ माप का परिणाम है; एल लोरी के अभिकर्मक के साथ माप का परिणाम है; पी पाइरोगॉलोल मोलिब्डेट के साथ माप परिणाम है; एस सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ माप का परिणाम है।

दिन के अलग-अलग समय में प्रोटीनुरिया के स्तर में स्पष्ट उतार-चढ़ाव को ध्यान में रखते हुए, साथ ही मूत्र में प्रोटीन की एकाग्रता की मूत्र पर निर्भरता, मूत्र के अलग-अलग हिस्सों में इसकी अलग-अलग सामग्री, अब यह आकलन करने के लिए प्रथागत है। मूत्र में प्रोटीन के दैनिक नुकसान से गुर्दे की विकृति में प्रोटीनमेह की गंभीरता, अर्थात् तथाकथित दैनिक प्रोटीनमेह निर्धारित करने के लिए। इसे g/दिन में व्यक्त किया जाता है।

यदि दैनिक मूत्र एकत्र करना असंभव है, तो मूत्र के एक हिस्से में प्रोटीन और क्रिएटिनिन की एकाग्रता को निर्धारित करने की सिफारिश की जाती है। चूंकि दिन के दौरान क्रिएटिनिन रिलीज की दर काफी स्थिर होती है और पेशाब की दर में बदलाव पर निर्भर नहीं होती है, प्रोटीन एकाग्रता का क्रिएटिनिन एकाग्रता का अनुपात स्थिर होता है। यह अनुपात दैनिक प्रोटीन उत्सर्जन के साथ अच्छी तरह से संबंध रखता है और इसलिए, प्रोटीनूरिया की गंभीरता का आकलन करने के लिए इसका उपयोग किया जा सकता है। आम तौर पर, प्रोटीन/क्रिएटिनिन अनुपात 0.2 से कम होना चाहिए। प्रोटीन और क्रिएटिनिन को g/l में मापा जाता है। प्रोटीन-क्रिएटिनिन अनुपात द्वारा प्रोटीनमेह की गंभीरता का आकलन करने की विधि का एक महत्वपूर्ण लाभ दैनिक मूत्र की असंभवता या अपूर्ण संग्रह से जुड़ी त्रुटियों का पूर्ण उन्मूलन है।

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मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के सभी तरीके रासायनिक या थर्मल एजेंटों के प्रभाव में प्रोटीन जमावट पर आधारित होते हैं। मूत्र में प्रोटीन की उपस्थिति में मैलापन दिखाई देता है, जिसकी मात्रा प्रोटीन की मात्रा पर निर्भर करती है।

ए) गुणवत्ता परीक्षणमूत्र में प्रोटीन का निर्धारण - अनिवार्य है।

1. नाइट्रिक एसिड के साथ नमूना- 50% नाइट्रिक एसिड समाधान के 1-2 मिलीलीटर के साथ एक परखनली में, ध्यान से मूत्र की समान मात्रा की परत लगाएं, तरल को हिलाने की कोशिश न करें। मूत्र में प्रोटीन की उपस्थिति के मामले में, दो तरल पदार्थों की सीमा पर एक सफेद अंगूठी दिखाई देती है, जो एक काले रंग की पृष्ठभूमि के खिलाफ बेहतर दिखाई देती है।

2. सल्फासैलिसिलिक एसिड के साथ नमूना- एक परखनली में 4-5 मिली मूत्र डाला जाता है और अभिकर्मक की 8-10 बूंदें डाली जाती हैं। मूत्र में प्रोटीन की उपस्थिति में, इसकी मात्रा के आधार पर, मैलापन या फ्लोक्यूलेशन हो सकता है।

3. एक्सप्रेस टेस्ट (ड्राई डायग्नोस्टिक टेस्ट)- अल्बुफन इंडिकेटर पेपर की एक पट्टी को टेस्ट यूरिन में डुबोया जाता है ताकि दोनों इंडिकेटर जोन एक साथ सिक्त हो जाएं (ऊपरी जोन पीएच निर्धारण के लिए है, निचला क्षेत्र प्रोटीन निर्धारण के लिए है)। 2-3 सेकंड के बाद, पट्टी को एक सफेद कांच की प्लेट पर रख दिया जाता है। संकेतक स्ट्रिप्स के साथ मामले पर मुद्रित रंग पैमाने का उपयोग करके मूत्र के साथ पट्टी को गीला करने के 60 सेकंड बाद मूल्यांकन किया जाता है।

बी) मात्रात्मक नमूने- मूत्र के उन हिस्सों में किया जाता है जहां प्रोटीन पाया गया था गुणात्मक परिभाषा; निर्धारण सतह पर तैरनेवाला में centrifugation के बाद किया जाता है

ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि- 50% नाइट्रिक एसिड घोल का 1-3 मिली एक परखनली में डाला जाता है और उतनी ही मात्रा में मूत्र को दीवार के साथ सावधानी से बिछाया जाता है। स्टॉपवॉच पर समय रिकॉर्ड किया जाता है। यदि तरल पदार्थ के इंटरफेस पर रिंग लेयरिंग के तुरंत बाद या 2 मिनट से पहले बनती है, तो मूत्र को पानी से पतला होना चाहिए। उसके बाद, पतला मूत्र में प्रोटीन का बार-बार निर्धारण किया जाता है। जब तक पतला मूत्र नाइट्रिक एसिड में जोड़ा जाता है, तब तक दूसरे और तीसरे मिनट के बीच एक सफेद अंगूठी दिखाई देने तक पतलापन किया जाता है। प्रोटीन की मात्रा कमजोर पड़ने की डिग्री से 0.033 पीपीएम को गुणा करके निर्धारित की जाती है।

18. वनस्पतियों, गोनोकोकी, ट्राइकोमोनास के लिए स्मीयर लेने की तकनीक, साइटोलॉजिकल परीक्षा, केपीआई।

फ्लोरा स्मीयर तकनीक: सामग्री को गर्भाशय ग्रीवा नहर से और मूत्रमार्ग से दृश्य नियंत्रण में एक विशेष ब्रश के साथ लिया जाता है। परिणामी नमूने को तुरंत कांच की स्लाइड पर रखा जाता है और ट्रिट्यूरेट किया जाता है।

ट्राइकोमोनास के लिए स्मीयर लेने की तकनीक: सबसे पहले, सामग्री मूत्रमार्ग के श्लेष्म झिल्ली (जघन सिम्फिसिस पर 1 मिनट के लिए इसकी प्रारंभिक मालिश के बाद) और योनि के पीछे के फोर्निक्स से स्क्रैप करके ली जाती है, फिर गर्भाशय ग्रीवा के योनि भाग को एक से मिटा दिया जाता है बाँझ झाड़ू खारा के साथ सिक्त, श्लेष्म प्लग हटा दिया जाता है, में ग्रीवा नहरध्यान से, एक जांच 1.0-1.5 सेमी से अधिक की गहराई तक डाली जाती है और गर्भाशय ग्रीवा के श्लेष्म झिल्ली से एक स्क्रैपिंग ली जाती है।

गोनोकोकी के लिए स्मीयर तकनीक: सामग्री को खारा, योनि चिमटी या एक विशेष जांच के साथ सिक्त कपास झाड़ू से पोंछने के बाद मूत्रमार्ग, बार्थोलिन ग्रंथियों और पैरायूरेथ्रल मार्ग से लिया जाता है। मलाशय से, सामग्री को एक कुंद चम्मच से लिया जाता है। क्रोनिक और टॉरपीड गोनोरिया में, रोगज़नक़ की पहचान करने की संभावना को बढ़ाने के लिए अध्ययन से पहले एक उकसावे का प्रदर्शन किया जाता है।

आप सामग्री को एक कपास झाड़ू के साथ और मासिक धर्म के दौरान नहीं ले सकते।

साइटोलॉजिकल जांच के लिए स्मीयर लेने की तकनीक: एक स्मीयर एक्सोकर्विक्स, योनि और योनी की सतह से एक स्पैटुला के साथ, एंडोकर्विक्स से - एक एंडो ब्रश के साथ लिया जाता है। सामग्री लागू होती है पतली परतविशेष रूप से उपचारित स्किम्ड ग्लास पर और संसाधित विशेष रचनाकोशिकाओं को सूखने से रोकने के लिए। पपनिकोलाउ विधि (तथाकथित पैप स्मीयर) और सूक्ष्मदर्शी के अनुसार तैयारियों को दाग दिया जाता है।

कैरियोपाइक्नोटिक इंडेक्स- वेसिकुलर (गैर-पाइकोनोटिक) नाभिक वाली कोशिकाओं के लिए पाइक्नोटिक नाभिक के साथ सतह कोशिकाओं का प्रतिशत। कूपिक चरण की शुरुआत में सीआरपीडी मासिक धर्म 25-30%, ओव्यूलेशन के समय तक 60-70%, ल्यूटियल चरण में यह घटकर 25% हो जाता है।

अनुदेश

में प्रोटीन के निर्धारण के लिए गुणात्मक तरीके मूत्र: हेलर विधि, सल्फोसैलिसिलिक एसिड 20% घोल परीक्षण, क्वथनांक परीक्षण, आदि। अर्ध-मात्रात्मक विधियाँ: प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए नैदानिक ​​परीक्षण स्ट्रिप्स का उपयोग मूत्र, ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि। मात्रात्मक विधियां: टर्बिडीमेट्रिक और वर्णमिति।

दैनिक में प्रोटीन का निर्धारण मूत्र 0.033 ग्राम/लीटर या उससे अधिक की सांद्रता पर एक विकृति है। एक नियम के रूप में, मूत्र के सुबह के हिस्से में, प्रोटीन की मात्रा 0.002 ग्राम / लीटर से अधिक नहीं होती है, और दैनिक में मूत्रप्रोटीन सांद्रता 50-150 मिलीग्राम प्रोटीन से अधिक नहीं है।

स्रोत:

• मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण

मूत्र मानव चयापचय का एक उत्पाद है। यह गुर्दे में रक्त के निस्पंदन के दौरान बनता है, यही कारण है कि मूत्र की संरचना मानव शरीर की स्थिति का स्पष्ट विवरण देती है।

मूत्र 150 से अधिक यौगिकों का एक जटिल समाधान है। कुछ विशिष्ट पदार्थ, उदाहरण के लिए, एसीटोन, पित्त अम्ल, प्रोटीन, ग्लूकोज, केवल कुछ रोगों में ही मौजूद हो सकते हैं।

मानव स्वास्थ्य को नियंत्रित करने के लिए सबसे पहले मूत्र की मात्रा निर्धारित करना आवश्यक है। आदर्श प्रति दिन 1-1.8 लीटर मूत्र का निर्माण है। जब 2 लीटर से अधिक मूत्र उत्सर्जित होता है, तो यह गुर्दे के काम में संभावित गड़बड़ी का संकेत है, मधुमेहऔर कई अन्य बीमारियां। यदि प्रति दिन 0.5 लीटर से कम मूत्र बनता है, तो मूत्रवाहिनी या मूत्राशय में रुकावट होती है।

पेशाब का रंग

उत्सर्जित मूत्र का रंग कई कारकों पर निर्भर करता है, इसलिए यह भिन्न हो सकता है, हल्के पीले से नारंगी तक। कुछ रंगों की उपस्थिति कुछ खाद्य पदार्थों के साथ-साथ किसी व्यक्ति द्वारा ली गई दवाओं से भी प्रभावित हो सकती है।

दवा लेने के बाद, मूत्र दागदार हो सकता है और लाल रंग का हो सकता है। यदि कोई व्यक्ति सक्रिय रूप से चल रहा है, जबकि वह बड़ी मात्रा में पसीना छोड़ता है, तो मूत्र में तीव्र होगा पीला, साथ ही नाइट्रोक्सोलिन या बायोमाइसिन जैसे फंड लेते समय।

यदि किसी व्यक्ति ने कोई रंगीन खाद्य पदार्थ और दवाएं नहीं ली हैं, लेकिन उसके पेशाब का रंग सामान्य से अलग है, तो उसे शरीर में किसी बीमारी की उपस्थिति का संदेह हो सकता है। उदाहरण के लिए, जिगर के रोगों में, मूत्र का रंग गहरा पीला या हरा होगा।

उत्सर्जित मूत्र में रक्त की उपस्थिति स्पष्ट रूप से पथरी या गुर्दे से रक्तस्राव की उपस्थिति को इंगित करती है, यदि दर्द भी देखा जाता है।

यदि पेशाब करना मुश्किल है, तो यह मूत्राशय में संक्रमण के कारण होने वाली सूजन प्रक्रिया का संकेत हो सकता है। और यहाँ गंदा है बादल छाए रहेंगे पेशाबकी गवाही देता है गंभीर रोगगुर्दे।

पेशाब में प्रोटीन

किसी व्यक्ति के रक्त में प्रोटीन नहीं होता है या इसकी मात्रा इतनी कम होती है कि इसे प्रयोगशाला परीक्षणों का उपयोग करके निर्धारित नहीं किया जा सकता है। यदि मूत्र में एक प्रोटीन का पता चला है, तो बार-बार परीक्षण करना आवश्यक है, क्योंकि यह तब हो सकता है जब कोई व्यक्ति सुबह उठता है, साथ ही एथलीटों में कड़ी मेहनत या व्यायाम के बाद भी।

मूत्र में प्रोटीन मौजूद है या नहीं, यह निर्धारित करने के लिए 100% असंभव है। मूत्र में सफेद रंग के गुच्छे की अधिक मात्रा होने पर ही कोई अनुमान लगा सकता है।

यदि पेशाब में प्रोटीन का बार-बार पता चलता है, तो यह किसी प्रकार के गुर्दे की बीमारी की उपस्थिति का संकेत देता है। भड़काऊ प्रक्रियाएंउनमें होने वाली, प्रोटीन की मात्रा में मामूली वृद्धि को भड़काती है। यदि 2 ग्राम से अधिक मूत्र में उत्सर्जित होता है, तो यह है अलार्म संकेत.

पायलोनेफ्राइटिस है सूजन की बीमारी, जिसमें वृक्क श्रोणि, कैलीसिस और पैरेन्काइमा प्रभावित होते हैं। ज्यादातर मामलों में, सूजन के कारण होता है जीवाणु संक्रमण. समय पर निदान के साथ ही पूर्ण वसूली संभव है, इसलिए, जब लक्षण दिखाई देते हैं, तो पूरी तरह से जांच आवश्यक है।